Versuch Nr. 2 Textilverkeimungstest

Mikrobiologie-Praktikum
Versuch Nr. 2
Textilverkeimungstest
Inhalt
1. Einführung 2
2. Durchführung 2
2.1 Anzucht von Aspergillus niger 2
2.2 Beimpfung der Prüflinge 2
3. Ergebnisse 4
4. Diskussion 5

15.04.2005
1. Einführung
Vor einigen Jahren gab es einen Bewegung mit dem Namen „Green Cotton“. Hierbei ging es
um die Annahme, das naturbelassene Baumwolle gesünder sei als chemisch nachbehandelte.
Wie man jedoch heute weiß, enthält Rohbaumwolle 50 Millionen Bakterien und 600 000
Sporen pro Gramm. Dies ist auf eine Kontamination durch den Boden zurückzuführen.
In diesem Versuch soll die Verkeimungsfähigkeit eines BW/PE-Mischgewebes im Vergleich
zu Rohbaumwolle bestimmt werden. Die Beimpfung der Textilien erfolgt mit einer
Schimmel-Mischkultur, wie sie in Rohbaumwolle zu finden ist.
2. Durchführung
2.1 Anzucht von Aspergillus niger
Zunächst wird auf Rohbaumwolle eine Mischkultur von Schimmelpilzen angezüchtet. Ein
kreisrundes, unbehandeltes Stück Rohbaumwolle (∅ = 8cm) wird mit folgender, sterilen
Nährlösung in einem wiederverschließbaren Kunststoffbecher befeuchtet.
Nährlösung zur Anzucht von Aspergillus niger
(Zusammensetzung pro 1L Leitungswasser)
‣ 20 g Tannin
‣ 1 g Glucose
‣ 0,5 g K 2 HPO 4
‣ 0,2 g MgSO 4 x 7H 2 O
‣ 3 g NaNO 3
‣ 0,5 g Malzextrakt pH 3
Der Ansatz wird eine Woche bei Raumtemperatur bebrütet.
2.2 Beimpfung der Prüflinge
Es werden je zwei Prüflinge des Vergleichgewebes, sowie der zu bewertenden Textilprobe
vorbereitet. Um eine statistische Auswertung gewährleisten zu können, wird jede Probe
einmal mit vollentsalztem Wasser und einmal mit bis zum Siedepunkt erhitztem
Leitungswasser befeuchtet. Es ist darauf zu achten, dass sich keine Flüssigkeitsschicht im
Kunststoffbecher bildet.
Alle vier Prüflinge werden im Zentrum in steriler Arbeitsweise mit Aspergillus niger beimpft
und danach 35 Tage bei Raumtemperatur aufbewahrt.
Zeitnah an der Beimpfung erfolgen häufiger mikroskopische Beobachtungen, später werden
die Abstände größer.
Anmerkung: Eigentlich sollten von dem zu untersuchenden Gewebe vier Ansätze gemacht
werden. Zwei mit Leitungswasser und zwei mit vollentsalztem Wasser. Dies geschieht um
den unterschiedlichen Einfluss der zwei Befeuchtungsmittel zu eliminieren und um einen
Mittelwert zu erhalten. Ein Vergleichsgewebe in Form von Rohbaumwolle lässt man nach
neusten Standards nicht mehr mit laufen. Diese Informationen beruhen auf Gesprächen mit
Mitarbeitern des Steinbeis-Transferzentrums.
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Da wir nur jeweils einen Ansatz gemacht haben, ist das Ergebnis nicht statistisch abgesichert.
Es wurde zu folgenden Zeitpunkten ausgewertet:
Zeitpunkt
Tage nach der Beimpfung
t 0
t A
00 Tage danach (Impfzeitpunkt)
01 Tag danach (Bewertung 0, wird nicht berücksichtigt)
t B 04 Tage danach (Bewertung 1)
t C 07 Tage danach (Bewertung 2)
t D 08 Tage danach (Bewertung 3)
t E 11 Tage danach (Bewertung 4)
t F 13 Tage danach (Bewertung 5)
t G 21 Tage danach (Bewertung 6)
t H 29 Tage danach (Bewertung 7)
t I 35 Tage danach (Bewertung 8)
Es ist darauf zu achten, dass die Prüflinge immer feucht gehalten werden. Staunässe ist jedoch
zu vermeiden.
Folgende Bereiche der Prüflinge wurden bei jedem Beobachtungstermin mikroskopisch auf
Verkeimung untersucht:
im
mor
mol
mul
mur
ao
ar
au
al
Impfstelle
Mitte oben rechts
Mitte oben links
Mitte unten links
Mitte unten rechts
außen oben
außen rechts
außen unten
außen links
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3. Ergebnisse
Zur Auswertung dienen zwei Verfahren. Der Grad der Verkeimung kann graphisch oder
rechnerisch ermittelt werden
Für die graphische Bewertung werden zunächst die Durchschnitts-Zeitpunktsbewertungen
(BWt X ) ermittelt. Dies geschieht mittels folgender Formel.
BWt X = (BWt X1 + BWt X2 ) / 2
D.h. man addiert die Anzahl der positiv befallenen Stellen der zwei Proben zu dem gegebenen
Auswertungszeitpunkt und dividiert durch zwei (Probenanzahl). Somit kann man die
unterschiedlichen Einflüsse von vollentsalztem Wasser und Leitungswasser eliminieren.
Die so erhaltenen Werte werden gegen die Anzahl der Tage aufgetragen und die sich daraus
ergebende Kurve mit im Diagramm integrierten Standards verglichen.
zunehmende Besiedlung
8
7
6
5
4
3
2
1
0
Verkeimungsfähigkeit eines Baumwoll-Polyester-Mischgewebes
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36
Tage ab Beimpfung
5
4
3
2
1
0
BW/PE
Gewebe
Abb.1 Verkeimungsfähigkeit des BW/PE Mischgewebes im Vergleich zu Standards
Wie in oben gezeigtem Diagramm zu sehen ist, wurde der Prüfling schnell besiedelt. Daraus
resultiert die grafisch ermittelte schlechte Echtheitsnote von 1.
Eine rechnerische Auswertung erfolgt mittels folgender Gleichung:
KBZ = (BWt B + BWt C + BWt D + BWt E + BWt F + BWt G + BWt H +BWt I ) / 8
Hierzu werden die oben ermittelten Durchschnitts-Zeitpunktsbewertungen addiert und durch
deren Anzahl dividiert.
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KBZ = (0,5 + 2 + 2,5 + 5 + 5 + 5 + 5 + 5) / 8 = 3,75
Da aus historischen Gründen die Textilechtheitsnoten von 1 nach 5 verlaufen, wobei 5 die
beste und 1 die schlechteste Note ist, muss dieser Wert noch angepasst werden, indem er von
5 subtrahiert wird.
5 – 3,75 = 1,25
Der grafisch ermittelte Wert liegt nahe an dem rechnerisch ermittelten Wert.
4. Diskussion
Das zu untersuchende BW/PE-Mischgewebe erzielte eine schlechte Echtheitsnote von 1 was
einer extremen Verkeimungsgefährdung entspricht. Da es sich um ein Mischgewebe und nicht
um reine Baumwolle handelt, war ein derart schlechtes Ergebnis nicht zu erwarten.
Geht man davon aus, dass das Ergebnis richtig ist, so muss der Anteil an Baumwolle
unzureichend chemisch gereinigt worden sein.
Die Richtigkeit des Ergebnisses ist jedoch stark anzuzweifeln, da nur mit zwei anstelle von
vier Prüflingen gearbeitet wurde. Ein statistisch fundiertes Ergebnis ist somit nicht gegeben.
Vermutlich schneidet dieses Gewebe deutlich besser ab.
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