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Diagnostik Advertorial
››› SERAMUN DIAGNOSTICA GMBH
Mikrotiterplatten-basierte
Arrays für die Diagnostik
Dr. Klemens Löster und Dr. Silvia Porstmann, Seramun Diagnostica GmbH, Heidesee
Die Multiparameterdiagnostik wird für
den Nachweis von Infektions- und Autoimmunkrankheiten
durch verschiedene
Techniken realisiert. Sie sind entweder
mit dem Nachteil eines geringen Automatisierungsgrades
(z. B. Line Blots) oder einer
teuren Auswertetechnik (z.B. Luminex ® -
Technologien) behaftet.
An Multiparameterdiagnostik knüpfen sich
folgende Erwartungen:
– Höhere diagnostische Sicherheit
– Schnellere Diagnose
– Geringere Kosten durch geringere
Analyse zahlen, Materialersparnis und Abfallverringerung
Diesen Erwartungen stehen folgende Zwänge
gegenüber:
– Wesentliche Leistungsdaten wie Präzision,
Spezifität und Sensitivität müssen für jeden
einzelnen Analyten im Testsystem mit
bisherigen Einzeltesten vergleichbar sein.
– Die Kosten dürfen die von Einzelparameternachweisen
nicht übersteigen.
Mit der Produktplattform SeraSpot ® bietet
die Seramun Diagnostica GmbH Microarrays
in Mikrotiterplatten an und verbindet
damit die Vorteile der etablierten und
auto matisierbaren ELISA-Technik mit den
diag nostischen Möglichkeiten moderner
Array-Technologien unter Anwendung eigener
messtechnischer Lösungen.
Array-Prinzip
LABORWELT
Autoantigene oder Proteine pathogener Erreger
werden für die Diagnostik von Autoimmun-
oder Infektionskrankheiten im
Nanoliter-Maßstab als Spots auf den Boden
der Vertiefungen von Mikrotiterplatten gedruckt.
Sie dienen als Zielstrukturen für Antikörper
in Patientenproben. Testspezifische
Kontrollen sind in jede Vertiefung integriert.
Als Detektionssystem werden Peroxidasemarkierte
isotypspezifische Antikörper eingesetzt.
Bei positivem Befund werden bestimmte
Spots durch das präzipitierende Enzymsubstrat
SeramunBlau ® spot sichtbar gemacht.
Das Testergebnis kann visuell oder durch
Software-vermittelte Imageanalyse mit dem
für die SeraSpot ® Teste entwickelten Programm
SpotSight ® scan ausgewertet werden.
Dafür hat Seramun Lesegeräte entwickelt
und patentiert, die je nach Serienlänge komplette
Mikrotiterplatten mit bis zu 96 Proben
(Seramun SpotSight ® plate) oder einzelne
Streifen von Mikrotiterplatten mit bis zu acht
Patientenproben (Seramun SpotSight ® strip)
vermessen und auswerten. Die Analyse einer
kompletten 96-well-Platte dauert nur
3 min. Nach einer Gesamt Hands-on-Time
von knapp zwei Stunden können pro Patient
bis zu 20 verschiedene Antikörper selektiv
nachgewiesen werden. Der Reagenzienbedarf
je Probe reduziert sich auf 5% gegenüber
dem Bedarf klassischer Line Blots.
Test-Prototypen zur Medica 2012
vorgestellt
Abb. 1: SeraSpot ® Anti-Borrelia lgG
Abb. 2: dsDNA Quantifizierung im
SeraSpot ® ANA
Drei SeraSpot ® Prototyp-Teste wurden zur
Medica 2012 vorgestellt: SeraSpot ® Anti-
Yersinia IgG und IgA zum Nachweis von Antikörpern
gegen sechs verschiedene Pathogenitätsfaktoren
des Bakteriums Yersinia
enterocolitica und SeraSpot ® Anti-Borrelia
IgG und IgM als Bestätigungstest für die Diagnostik
der Lyme-Borreliose stehen für die Infektionsserologie
zur Verfügung. SeraSpot ®
Anti-Borrelia erlaubt zudem die Differenzierung
der Antikörperantwort gegen homologe
diagnostisch relevante Antigene der
drei in Europa zirkulierenden Genospezies
von Borrelia burgdorferi sensu lato (Abb.1).
Die interne Validierung des SeraSpot ® Anti-
Yersinia und des SeraSpot ® Anti-Borrelia
wurde erfolgreich abgeschlossen. Die Präzision
liegt mit Variationskoeffizienten von
< 10% innerhalb und