Entwicklung einer HPLC-Methode zur Bestimmung des - OPUS ...

Hochdruckpumpe mit Manometer, Injektionsport (zur Probenaufgabe), Säule, Detektor
und Datenerfassung. Diese Komponenten sind entweder in ein Kompaktgerät
eingebaut, oder werden modular aus Einzelgeräten zusammenge
zusammengestellt.
Abb. 4: Schema einer HPLC-Apparatur Apparatur (124)
1.3.4 Lösungsmittel – die mobile Phase
Darunter versteht man eine Flüssigkeit, in der die zu messende Substanz gelöst wird
und sich dann mit Hilfe einer Pumpe du durch rch das chromatographische System bewegt.
Bei der Auswahl der mobilen Phase gilt es, Lösemittel zu finden, die das Gemisch in
Wechselwirkung mit einer geeigneten stationären Phase möglichst schnell und optimal
trennen. Dabei sind bestimmte Eigenschaften de des s Lösungsmittels wie beispielsweise
dessen Viskosität, UV-Durchlässigkeit, Durchlässigkeit, Brechungsindex und Siedepunkt entscheidend
(125). . Zudem eluieren die Lösungsmittel die Probenmoleküle unterschiedlich schnell.
Dies wird als die jedem Stoff toff typische Elutionsstärke bezeichnet. In der elutropen Reihe
werden die Lösemittel gemäß ihrer Elutionsstärke von schwachen (z. B. Fluoralkan FC FC-
78, n-Pentan) Pentan) bis starken (z. B. Methanol, Wasser, Salzlösungen, Puffer)
Lösungsmitteln eingeordnet (126).
1.3.5 Säulen und stationäre Phasen
Eine HPLC-Säule Säule besteht aus einem Rohr welches meist aus einem Stahl gefertigt wird
dem Chrom, Nickel und Molybdän zulegiert werden, wodurch ein austenitisches
Gefüge entsteht. Das heißt, die dieser ser Stahl ist rostfrei und nicht ferromagnetisch. An
19