洪佳麟 - 黃慶璨研究室

結果與討論
1. 甲殼素對生物膜形成之影響
在培養基中加入甲殼素,發現生物膜活性隨甲殼素濃度增高而降低。以 SEM 觀察到
加甲殼素的組別,細胞外多醣量明顯減少。
2. 甲殼素對於莢膜多醣釋放之影響
以 ELISA spot 測試生物膜生成時,莢膜多醣的釋放情況,發現加入甲殼素的組別,
其標定到的多醣較多,但大小遠不如對照組。這說明甲殼素會影響細胞釋放多醣至周圍,
可能因此阻礙生物膜的附著。
3. 甲殼素對成熟生物膜的影響
將甲殼素加入成熟生物膜中,發現生物膜細胞活性及存活率皆隨甲殼素的濃度和處
理時間的增加而減少,SEM 及 confocal microscope 的觀察結果則說明加入甲殼素後,其
胞外多醣量及細胞活性皆減少。
4. 甲殼素對懸浮細胞的影響
將甲殼素加入懸浮細胞,發現細胞活性及存活率皆隨甲殼素的濃度增加而減少。跟
生物膜比起來,懸浮細胞對甲殼素的敏感度顯然比較高。SEM 可觀察到因加入甲殼素而
破損的細胞。
5. 甲殼素對莢膜多醣的影響
加入甲殼素培養新型隱球菌細胞,其莢膜明顯變小,且上清液中多醣含量明顯比對
照組多,說明甲殼素或許可將莢膜多醣截切,免疫螢光染色及 SEM 的觀察也顯示同樣的
清況。
6. 甲殼素對胞外多醣及莢膜多醣結構的影響
以 QE LS 儀器測量多醣分子的大小,發現加入甲殼素的組別,其莢膜多醣分子較小,
而胞外多醣分子較大,與上述實驗相符。
7. 甲殼素對 C. neoformans 的 zeta potential 之影響
由於莢膜及黑色素的影響,菌體本身帶負電,經過甲殼素處理後,細菌表面帶有強
力的正電,或許是電性的轉換,造成細胞膜受損。