1.3.1 NOM-127-SSA1-1994 Al margen un sello con ... - Colaboradores

Colocar una pequeña porción de lana de vidrio en una columna cromatográfica, enseguida colocar una
cantidad (4 pulgadas) de florisíl activado, agregar 0.5 pulgadas de sulfato de sodio. Prehumedecer la columna
con 40 a 50 ml de éter de petróleo. Colocar el concentrador con un matraz volumétrico o graduado bajo la
columna para recibir el eluato.
Transferir el extracto a la columna, a una velocidad de 5 ml/minuto. Enjuagar el contenedor con dos
porciones de éter de petróleo. Transferir los enjuagues a la columna y enjuagar las paredes con pequeñas
porciones de éter de petróleo.
Eluir la columna con 200 ml de una mezcla al 6% de éter etílico/éter de petróleo a una velocidad de 5
ml/minuto.
Cambiar el concentrador y eluir con 200 ml de una mezlca al 15% de éter etílico/éter de petroleo.
Cambiar el concentrador y eluir con 200 ml de mezcla al 50% de éter etílico/ éter de petróleo.
Agregar perlas de ebullición a cada concentrador y concentrar cada eluato a un volumen definido.
Cuando el volumen sea menor de 5 ml es necesario usar una columna micro -Snyder durante la
evaporación final. Los eluato están listos para ser inyectados en el cromatógrafo de gases.
20.6 Identificación de analitos.
Identificar un componente de la muestra por comparación de su tiempo de retención con el tiempo de
retención de un cromatograma de referencia. Si el tiempo de retención de un compuesto desconocido
corresponde dentro de los límites al tiempo de retención de un compuesto estandar, entonces la identificación
es considerada positiva.
Los márgenes del tiempo de retención usados para identificaciones deben estar basados en medidas
variables del tiempo de retención actual de estándares durante el transcurso de un día.
Tres veces la desviación estándar de un tiempo de retención puede usarse para calcular un tamaño de
margen sugerido para un compuesto. Sin embargo, la experiencia de el analista debe ser lo más importante
de la interpretación de cromatogramas.
La identificación requiere un juicio experto, cuando los componentes son resueltos cromatográficamente.
Cuando los picos C G representan obviamente más de un componente en la muestra (por ejemplo: pico ancho
con hombro (s) o un valle entre dos o más máximos) o cualquier duda en la identificación de un pico en un
cromatograma, son necesarias técnicas alternas apropiadas, para que ayuden a la confirmación de la
identificación del pico. Por ejemplo: más identificaciones positivas pueden hacerse por el uso de un detector
alternativo que opera con un principio químico/físico diferente del que originalmente es usado; tal como
espectrometría de masas o el uso de una segunda columna cromatográfica.
Apéndice B
1 Determinación de bacterias coliformes totales y coliformes fecales (método de filtración por membrana)
1.1 Fundamento
Este método se basa en la filtración de una muestra para concentrar células viables sobre la superficie de
una membrana y transferirlas a un medio de cultivo apropiado, para posteriormente contar el número de
unidades formadoras de colonias (UFC) desarrolladas después de la incubación.
1.2 Material
Autoclave con termómetro y manómetro, capaz de alcanzar temperaturas de esterilización
Material para envolver esterilizable (papel kraft, bolsas de polímero resistentes al calor, otros)
Membranas para filtración estériles con poro de 0,45 y colchoncillo absorbente de 47 mm de diámetro
Sistema de filtración
Bomba de vacío (20-27 pulgadas Hg), tubería y aditamentos herméticos para mantener el vacío
Matraz Kitazato
Cajas Petri desechables o de vidrio estériles de 50 x 90 mm
Marcador indeleble o equivalente
Pinzas de acero inoxidable
Propipeta de 50 ml de capacidad
Botellas de borosilicato con capacidad de 150 ml y tapa de rosca