Enzygnost* Anti-HBs II - Medcorp

Untersuchungsmaterial
Zur Untersuchung können Einzelproben (Human-Seren oder -EDTA/Heparin/Citrat-Plasmen) verwendet
werden, welche nach Standard-Labortechniken entnommen wurden. Die Proben sollen
maximal 3 Tage bei 2 - 8 °C gelagert werden. Zur längeren Lagerung sind die Proben einzufrieren.
Testdurchführung
Testdurchführung mit BEP ® II
1. Ansatzschema: Benötigte Anzahl der Vertiefungen feststellen (= Anzahl der zu untersuchenden
Proben plus 6 Vertiefungen für die Kontrollen).
2. Proben-Dosierung:
Qualitativer Test/Quantitativer Test (α - Methode):
In 4 Vertiefungen (A1 bis D1) je 100 µl Anti-HBs-Serum, negativ, in eine Vertiefung (E1) 100 µl
Anti-HBs-Serum 100, in die folgenden Vertiefungen je 100 µl Probe und am Ende der Serie
bzw. Testplatte noch einmal 100 µl Anti-HBs-Serum 100 einpipettieren.
Die Pipettiervorgänge müssen zügig innerhalb von 15 min pro Testplatte durchgeführt werden.
Wichtig: Es ist unzulässig, zunächst das Anti-HBs-Serum 100 in die beiden vorgesehenen
Positionen zu pipettieren und anschließend die Proben "dazwischenzuschieben".
Quantitativer Test (Standardreihe):
In 4 Vertiefungen je 100 µl Anti-HBs-Serum, negativ und anschließend in jeweils 2 Vertiefungen
je 100 µl des Anti-HBS-Serums entsprechend 100, 50, 25, 10 und 5 IU/l pipettieren. In die
folgenden Vertiefungen je 100 µl Probe (evtl. nach Bedarf vorverdünnt) dosieren.
Die Konjugat-Dosierung unmittelbar nach Beendigung der Proben-Dosierung anschließen.
3. Konjugat-Dosierung: In jede Vertiefung 25 µl des HBsAg/POD-Konjugates (Anti-HBs II) einfüllen.
Anschließend mit Folie abkleben und die Platte unmittelbar nach Beendigung der
Konjugat-Dosierung in den Inkubator stellen.
4. Inkubation: 60 ± 2 min bei 37 ± 1 °C inkubieren, Waschvorgang unmittelbar anschließen.
5. Waschen: Folie abziehen, alle Vertiefungen aussaugen und mit je ca. 0,3 ml Waschlösung
4mal waschen. Nach Abschluß der Waschschritte die Substrat-Dosierung sofort anschließen,
um ein Eintrocknen zu vermeiden.
6. Substrat-Dosierung: In jede Vertiefung 100 µl der Chromogen-Gebrauchslösung einfüllen,
Platte mit neuer Folie abkleben.
7. Substrat-Inkubation: 30 ± 2 min bei +15 bis +25 °C lichtgeschützt inkubieren.
8. Stoppreaktion: Die Folie entfernen. Je Vertiefung 100 µl Stopplösung POD zugeben, dabei
den gleichen Zeittakt wie bei Punkt 6. einhalten.
9. Messung: Innerhalb einer Stunde bei 450 nm photometrieren. Als Wellenlänge der Referenzmessung
wird 650 nm (ggf. zwischen 615 und 690 nm) empfohlen.
Testdurchführung mit BEP ® III
Bei der Abarbeitung mit BEP ® III müssen die Testplatten einschließlich der Probendosierung
(Punkt 1 und 2 der "Testduchführung BEP ® II") vorbereitet werden. Unmittelbar im Anschluss
daran werden die Testplatten offen, d. h. nicht mit Folie abgeklebt, in den BEP ® III eingegeben.
Dabei ist zu beachten, dass teilbestückte Testplatten mit "Wasserriegeln" auf mindestens halbe
Testplatten (6 Testriegel) zu ergänzen sind.Die anschließende Testabarbeitung erfolgt vollautomatisch
(siehe BEP ® III-Bedienungsanleitung).
Die in der BEP ® III Software eingestellten Inkubationszeiten können auf Grund der technischen
Rahmenbedingungen (Gerätetaktung) von denen der BEP ® II Prozessierung abweichen, sind
jedoch in der Kombination BEP ® III/Enzygnost * validiert worden.
Testdurchführung mit BEP ® 2000
Die Probendosierung und anschließende Testabarbeitung erfolgt vollautomatisch im Gerät (siehe
BEP ® 2000-Bedienungsanleitung).
OQNE G11 C0541 (906) H/R 16