Enzygnost* Anti-HBs II - Medcorp

Estabilidad y almacenaje
Todos los componentes del envase combinado Enzygnost * Anti-HBs II aún cerrados, conservados
a una temperatura entre +2 y +8°C, son utilizables hasta las fechas de vencimiento dadas en las
etiquetas.
La estabilidad y las condiciones de almacenamiento de los envases ya abiertos o de los
reactivos ya diluidos, listos para el uso, se pueden tomar de la Tabla 1 del apéndice.
Equipo necesario:
BEP ® II: Para el desarrollo automático de la dosificación de reactivos y de las etapas de lavado
BEP ® III: Para la realización completamente automática del test después de la distribución de
las muestras, así como para la evaluación.
BEP ® 2000: Para la realización y valoración completamente automática del test.
Pipetas: Pipetas a émbolo 25, 100 y 1000 µl
Incubadora: Baño de agua cubierto (+37 ± 1°C) u otros métodos de incubación similares
Todos los instrumentos utilizados para el desarrollo del test deben estar validados.
Material a investigar
Para la investigación se pueden utilizar muestras aisladas (sueros humanos o plasma con
EDTA/heparina/citrato), las cuales hayan sido tomadas según las técnicas estándar de
laboratorio. Las muestras se pueden almacenar máximo 3 días entre 2 y 8°C. Para tiempos más
largos de almacenamiento las muestras se deben congelar.
Procedimiento
Realización del test usando el BEP ® II
1. Esquema de distribución: Determinar el número necesario de pocillos de la placa (= cantidad
de muestras a investigar + 6 pocillos para los controles).
2. Distribución de las muestras:
Prueba cualitativa/Prueba cuantitativa (método - α) :
Pipetear en cada uno de los 4 primeros pocillos (A1 hasta D1) 100 µl del suero anti-HBs,
negativo, en el pocillo siguiente (E1) 100 µl de suero 100 anti-HBs y en cada uno de los otros
pocillos 100 µl de la muestra. Al final de la serie o de la placa de prueba pipetear una vez más
100 µl del suero 100 anti-HBs.
La etapa de pipeteo debe efectuarse a buen paso dentro de un plazo máximo de 15 min. por
placa de prueba.
Importante: Es improcedente pipetear primero el suero 100 anti-HBs en las dos
posiciones designadas para éste y a continuación «introducir» las muestras entre ellas.
Prueba cuantitativa (de la serie de diluciones del estándar):
Colocar en cada uno de 4 pocillos 100 µl de suero Anti-HBs, negativo y a continuación, en
cada uno de 2 pocillos, 100 µl de suero Anti-HBs de las diluciones que contienen 100, 50, 25,
10 y 5 UI/l. En cada uno de los pocillos siguientes pipetear 100 µl de la muestra
(eventualmente, si es necesario, prediluida).
La distribución del conjugado debe seguir inmediatamente después de la distribución de las
muestras
3. Distribución del conjugado:
Agregar en cada pocillo 25 µl del conjugado HBsAg/POD (anti-HBs II).
Cubrir con lámina adhesiva y colocar inmediatamente después de terminada la distribución
del conjugado en el incubador.
4. Incubación: Incubar durante 60 ± 2 min. a +37 ± 1°C; lavar de inmediato.
5. Lavado: Retirar la lámina adhesiva, aspirar el contenido de todos los pocillos y lavar 4 veces
usando cada vez aprox. 0,3 ml de solución de lavado. Después de terminar la fase de lavado,
seguir inmediatamente con la siguiente dosificación de reactivos para evitar la desecación .
6. Distribución del sustrato: Pipetear en cada pocillo 100 µl de solución de uso del cromógeno
y cubrir la placa con una nueva lámina adhesiva.
OQNE G11 C0541 (906) H/R 48