Enzygnost* Anti-HBs II - Medcorp

Enzygnost * anti-HBs II
Settori d’impiego
Metodo immunoenzimatico per l’identificazione qualitativa e la determinazione quantitativa degli
anticorpi contro l’antigene di superficie dell’epatite B nel siero e nel plasma.
L’esecuzione del test immunoenzimatico avviene su processore ELISA BEP ® II, BEP ® III e BEP ®
2000. Il test è stato sviluppato per l’analisi di campioni singoli e non per pool di campioni. Il
prodotto deve essere impiegato solo per scopi diagnostici in vitro.
Significato diagnostica
Come l’antigene di superficie dell’epatite B (HBsAg), anche l’anticorpo anti-HBs diretto contro la
proteina di superficie è un parametro importante per la diagnosi di infezione da virus dell’epatite
B (HBV) 1, 2 .
Durante il periodo di incubazione e nella fase acuta dell’infezione da HBV, gli anticorpi anti-
HBsAg non sono evidenziabili. Gli anticorpi anti-HBs, che danno l’immunità, compaiono nel 90%
dei casi solo nella tarda convalescenza circa 3 o 4 mesi dopo l’insorgenza della malattia, quando
l’HBsAg circolante non è più evidenziabile 3, 4 .
Questa sieroconversione, cioè il passaggio dell’anti-HBs da negativo a positivo, rappresenta un
parametro molto attendibile per la diagnosi di una infezione da HBV pregressa, tanto più che
circa il 10% dei pazienti con infezione acuta, per i quali l’HBsAg nella fase iniziale non è
rilevabile, diventa successivamente anti-HBs positiva. L’identificazione dell’anti-HBs è adatto
anche per la diagnosi delle infezioni subcliniche da HBV 3, 4 .
La dimostrazione degli anticorpi anti-HBs indica una esposizione precedente con questo
antigene a causa di una infezione da HBV o in seguito a vaccinazione, ed è perciò importante
nelle seguenti ricerche:
a) valutazione della convalescenza, e in una certa misura, anche prognosi per pazienti con
infezione da HBV (controllo del decorso)
b) ricerca sierologica nel contesto dei programmi di vaccinazione (screening e controllo dello
stato di immunizzazione)
c) studi epidemiologici
Oltre alla identificazione qualitativa dell’anti-HBs, la determinazione quantitativa dell’anti-HBs
risulta rilevante dal punto di vista dell’immunizzazione attiva. Secondo le raccomandazioni del
WHO, si può presumere una protezione contro l’infezione in seguito a vaccinazione se nel siero
o nel plasma può essere riscontrata una concentrazione di anti-HBs superiore a 10 UI/L. Si
raccomanda di eseguire in tempo le vaccinazioni di richiamo per garantire che i valori non siano
al di sotto di questo limite 5, 6, 7 .
Pazienti con una concentrazione di anticorpi anti-HBs < 100 UI/L dopo il completamento della
vaccinazione di base, richiedono una vaccinazione di richiamo entro un anno. (Raccomandazioni della
Commissione Permanente per le Vaccinazioni dell’Istituto Robert Koch in Germania, ottobre 1995).
La necessità di una determinazione quantitativa risulta ulteriormente importante perché la
durata dell’immunità è proporzionale ai livelli di anti-HBs presenti.
Principio del metodo
L’Enzygnost * anti-HBs II è un test ad una fase secondo il metodo sandwich. L’antigene utilizzato
per la fase solida ed il coniugato è costituito da HBsAg umano.
L’HBsAg marcato con perossidasi si lega agli anticorpi specifici anti-HBs presenti nel campione
in esame. Questi si legano all’HBsAg legato alla superficie della piastra per microtitolazione
(sandwich fra antigeni).
Dopo l’eliminazione tramite lavaggio delle componenti non legate si determina l’attività
enzimatica del coniugato. La reazione enzimatica del substrato e del cromogeno produce una
colorazione blu. La reazione viene interrotta con l’aggiunta della soluzione bloccante POD ed il
colore vira al giallo. L’intensità del colore è proporzionale alla concentrazione degli anticorpi nel
campione. I risultati vengono quantificati mediante calcolo con il metodo α o per confronto con
una curva standard.
OQNE G11 C0541 (906) H/R 34 Edizione Febbraio 2004