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nuevas tecnologías derivadas del área de la biología molecular, en particular de la "polymerase chain reaction"
(PCR). Combinando el potencial de la micromanipulación y de la criopeservación se pueden alcanzar unas
perspectivas muy interesantes en el campo de la reproducción animal mediante la constitución de bancos
genéticos de embriones con sexo predeterminado (Thibier y Nibart, 1995). En este sentido, recientemente
hemos obtenido un buen porcentaje de supervivencia in vitro en- embriones de ovino en estadio de blasíocisto
respecto al de mórula precompacta y compacta tras la retirada, mediante aspiración, de 2-6 células y
subsiguiente vitrificación (Tabla 2; Naitana et al, 1995b). Estos resultados ponen en evidencia que la
integridad de la zona pelúcida no parece ser un factor determinante sobre la viabilidad de embriones tras la
vitrificación, confirmando resultados anteriores obtenidos en embriones bovinos tras congelación (Niemann et
al., 1987; Picard et al., 1988). Un posterior periodo de cultivo in vitro tras la biopsia permite la restauración
del embrión y en particular un aumento del número de células, mejorando así el porcentaje de supervivencia in
vitro de embriones vitrificados entonces.
Tabla 2. Vitalidad in vitro de embriones de ovino manipulados/vitrificados y
manipulados/cultivados/vitrificados en distintos estadios dedesarrollo
Estadio de
desarrollo
Mórula
precompacta
Mórula
compacta
Blastocisto
Manipulados/ Extr.
/vitrificados (%)
28 6
(21,4)b
26 10
(38,4)b
26 19
(73,l)a
Manipulados/ Vitrif. tras Extr.
/cultivados cultivo tiempo (%)
(%)
31 19(61,3)a 15
48-56h (78,9)c
30 18 (60,0)a 14
24-36h (77,8)a
34 30 (88,2)b 24
6-8h (80,0)
3b. Transferencia directa
La transferencia directa del contenido de la pajuela en el tracto genital de la hembra receptora podría
suponer una gran ventaja en la aplicación de la vitrificación a nivel práctico. Esta técnica, que evita los pasos
necesarios para la eliminación del crioprotector, permite un ahorro dé tiempo y de material (placas, pipetas,
microscopio), e incluso, al no ser necesario el manejo del embrión, reduce las posibilidades de contaminación.
Así, en un protocolo reciente y utilizando una solución de vitrificación constituida por glicerol 3,4 mol y etilén
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