Enzygnost* Anti-HBc monoclonal - Medcorp

Erforderliche GeräteBEP ® II: Zur automatischen Durchführung der Reagenzien-Dosierung und der WaschschritteBEP ® III: Zur automatischen Testabarbeitung nach der Probendosierung sowie AuswertungBEP ® 2000: Zur vollautomatischen Testabarbeitung sowie AuswertungPipetten: Kolbenhubpipetten: 25, 100 und 1000 µlInkubator: Bedecktes Wasserbad (+37 ± 1 °C) oder vergleichbare InkubationsmethodenAlle zur Testdurchführung eingesetzten Geräte müssen validiert sein.UntersuchungsmaterialZur Untersuchung können Einzelproben (Human-Seren oder -EDTA/Heparin/Citrat-Plasmen)verwendet werden, welche nach Standard-Labortechniken entnommen wurden. Die Proben sollenmaximal 3 Tage bei +2 bis +8 °C gelagert werden. Zur längeren Lagerung sind die Probeneinzufrieren.TestdurchführungTestdurchführung mit BEP ® II1. Ansatzschema: Benötigte Anzahl der Auftragsstellen feststellen (Anzahl der zu untersuchendenProben plus 6 Vertiefungen für Kontrollen). Für die Testdurchführung nicht benötigte Riegeldem Halterahmen entnehmen und für die spätere Verwendung lagern (siehe Tabelle 1).2. Proben-Dosierung: In 4 Vertiefungen je 25 µl negative, in eine Vertiefung 25 µl positiveKontrolle, in die folgenden Vertiefungen je 25 µl unverdünnte Probe und am Ende der Seriebzw. Testplatte noch einmal 25 µl positive Kontrolle dosieren und die nachfolgende Konjugat-Dosierung (siehe Punkt 3.) baldmöglichst, max. 15 min nach Beendigung der Proben-Dosierunganschließen.Alternativ zu oben aufgeführtem Pipettierschema ist es auch erlaubt, die positive Kontrollezweimal zu Beginn der Testreihe aufzutragen.Pipettierschema: In 4 Vertiefungen je 25 µl negative und in 2 Vertiefungen je 25 µl positiveKontrolle einfüllen; in die folgenden Vertiefungen je 25 µl unverdünnte Proben dosieren.3. Konjugat-Dosierung: In jede Vertiefung 100 µl der Konjugat-Gebrauchsverdünnung einfüllen,mit Folie abkleben und sofort in den Inkubator stellen.4. Inkubation: 60 min ± 5 min bei +37 °C ± 1 °C inkubieren, Waschvorgang unmittelbar anschließen.5. Waschen: Folie abziehen, alle Vertiefungen absaugen und mit je ca. 0,3 ml Waschlösung 4mal waschen.6. Substrat-Dosierung: In jede Vertiefung 100 µl der Chromogen-Gebrauchslösung einfüllen,Platte mit neuer Folie abkleben.7. Substrat-Inkubation: 30 min ± 2 min bei +18 bis +25 °C lichtgeschützt inkubieren.8. Stoppreaktion: Folie entfernen. Je Vertiefung 100 µl Stopplösung POD zugeben, dabeiden gleichen Zeittakt wie bei Punkt 6. einhalten.9. Messung: Innerhalb einer Stunde bei 450 nm photometrieren.Die Verwendung eines Photometers mit zwei Wellenlängen (Meß- und Referenzstrahl) ist empfehlenswert.Die Extinktionsmessung der Kontroll- und Patientenproben erfolgt bei 450 nm, als Wellenlängeder Referenzmessung wird 650 nm (ggfs. zwischen 615 und 690 nm) empfohlen.Testdurchführung mit BEP ® IIIBei der Abarbeitung mit BEP ® III müssen die Testplatten einschließlich der Probendosierung(Punkt 1 und 2 der „Testduchführung BEP ® II“) vorbereitet werden. Unmittelbar im Anschlußdaran werden die Testplatten offen, d. h. nicht mit Folie abgeklebt, in den BEP ® III eingegeben.Dabei ist zu beachten, dass teilbestückte Testplatten mit „Wasserriegeln“ auf mindestens halbeTestplatten (6 Testriegel) zu ergänzen sind.Die anschließende Testabarbeitung erfolgt vollautomatisch(siehe BEP ® III-Bedienungsanleitung).Die in der BEP ® III Software eingestellten Inkubationszeiten können auf Grund der technischenRahmenbedingungen (Gerätetaktung) von denen der BEP ® II Prozessierung abweichen, sindjedoch in der Kombination BEP ® III/Enzygnost* validiert worden.OUWE G13 C0541 (879) CS/R 13