Enzygnost* Anti-HBc monoclonal - Medcorp

Matériel nécessaireBEP ® II : pour la distribution automatique des réactifs et l’automatisation des étapes delavageBEP ® III : pour l’automatisation du test après la distribution des échantillons et del’exploitation des résultatsBEP ® 2000 : pour l’entière automatisation du test et de l’exploitation des résultatsPipettes : pipettes à embout de 25, 100 et 1000 µl.Incubateur : bain-marie couvert (+37 ± 1 °C) ou méthode d’incubation équivalenteTout le matériel utilisé pour la réalisation du test doit être validé.Echantillons à testerUtiliser des échantillons (sérums humains ou plasmas citratés, héparinés ou prélevés sur EDTA)obtenus selon les techniques standard des laboratoires. Les échantillons peuvent êtreconservés 3 jours maximum à +2/+8 °C. Pour une conservation plus longue, les congeler.Réalisation du testRéalisation du test sur le BEP ® II1. Schéma de distribution: déterminer le nombre de cupules nécessaires (nombred‘échantillons à tester + 6 cupules pour les contrôles). Sortir du cadre les barrettes inutiles etles conserver pour un test futur (cf. Tableau 1).2. Distribution des contrôles et échantillons: distribuer 25 µl de contrôle négatif dans les 4premières cupules, 25 µl de contrôle positif dans la cupule 5, 25 µl de chacun deséchantillons non dilués dans les cupules suivantes, puis de nouveau 25 µl de contrôle positifà la fin de la série ou de la plaque. Enchaîner ensuite le plus rapidement possible, mais auplus tard dans les 15 min, la distribution du conjugué (cf. point 3).Comme alternative au schéma de pipetage indiqué ci-dessus, on peut également déposer lecontrôle positif deux fois en début de série.Schéma de pipetage : distribuer 25 µl de contrôle négatif dans 4 cupules, 25 µl de contrôlepositif dans 2 cupules, puis 25 µl de chacun des échantillons non dilués dans les cupulessuivantes.3. Distribution du conjugué: ajouter dans chaque cupule 100 µl du conjugué à la dilutiond‘emploi, recouvrir la plaque d‘une feuille adhésive et la placer immédiatement dansl‘incubateur.4. Incubation: laisser incuber 60 ± 2 min à +37 °C ± 1 °C, et enchaîner immédiatement leprocessus de lavage.5. Lavage: retirer la feuille adhésive, aspirer le contenu de toutes les cupules, et distribuer danschacune d’elles env. 0,3 ml de Solution de lavage; faire 4 lavages.6. Distribution du substrat: ajouter dans chaque cupule 100 µl de la solution d’emploi duchromogène, et couvrir la plaque d’une nouvelle feuille adhésive.7. Incubation du substrat: laisser incuber 30 ± 2 minutes à +18/+25 °C a l’abri de la lumière.8. Arrêt de la réaction: retirer la feuille adhésive et ajouter dans chaque cupule 100 µl deSolution d’arrêt POD en respectant le même rythme qu’en 6.9. Mesure: faire une mesure photométrique dans l’heure qui suit a 450 nm.Il est recommandé d’utiliser un photomètre avec deux longueurs d’onde (une de mesure et unede référence).La mesure de la densité optique des contrôles et des échantillons de patients se fait à 450 nm.La longueur d’onde de référence doit être de 650 nm (éventuellement comprise entre 615 à 690nm).Réalisation du test sur le BEP ® IIIPour une utilisation sur le BEP ® III, les plaques-tests doivent être préparées jusqu’y compris ladistribution des échantillons (points 1 et 2 du paragraphe « Réalisation du test sur le BEP ® II »).Immédiatement après cette étape, placer la plaque ouverte, c’est-à-dire non recouverte d’unefeuille adhésive, dans le BEP ® III. Si la plaque n’est pas totalement utilisée, la compléter aumoins pour moitié (6 barrettes) avec des barrettes remplies d’eau. La suite du test est ensuiteeffectuée entièrement automatiquement (cf. Manuel d’utilisation du BEP ® III).OUWE G13 C0541 (879) CS/R 21