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Cuadro 9. Resumen de la evaluación de la calidad de la postlarva usando procedimientosdel Nivel 2.CRITERIO OBSERVACIONES EVALUACIÓNDE LACALIDADOpacidad muscularDeformidadesDispersión de tamaños(CV)Contenido intestinalColor delhepatopáncreasCondición delhepatopáncreasFouling epibionteMecanizaciónDesarrollo branquialPeristalsis intestinalBaculovirusRelaciónmúsculo/intestino«Bolitas» (célulasdesprendidas delhepatopánceas yintestino)Test de estrésMúsculo opaco en la cola de laPLDeformidades en miembros ycabezaCálculo del CV del tamaño de lapostlarvaGrado de contenido del tractodigestivoColoración relativa delhepatopáncreasPUNTUA-CIÓN10% 010% 025% 0Lleno 10Moderado 5Vacío 0Oscuro 10Pálido 5Transparente 0Cantidad relativa de vacuolas Abundante 10lipídicas Moderado 5Grado de fouling por epibiontes 10% 0Melanización del cuerpo o10% 0Grado de ramificación de laslamelas branquialesNinguno 0Completo 10Intermedio 5Ligero 0Movimiento del músculoAlto 10intestinal Bajo 5Observación diaria (2-4x) de Ausente (0%) 10MysisModerado 5(10%) 0Comparación de la proporción >3:1 10entre los grosores del músculo y 1-3:1 5del intestino 3 0Si < 75%, se recomienda otrotest>75% 1056
«Bolitas» (células desprendidas del hepatopáncreas e intestino)Referirse a la pág. 51.Test de estrésAl cosechar, o una vez que la postlarva alcanza el PL10, se puede llevar a cabo un test de estrés.Existen varios tests de estrés, y el método más común es el de situar una muestra seleccionadaaleatoriamente de unos 300 animales en un vaso de precipitado con agua de 0 ‰ de salinidad,dejarlos durante 30 minutos, y luego, devolverlos al agua de 35 ‰ (o ambiental) durante otros 30minutos. Seguidamente a esto, se efectúa un recuento de los supervivientes y se calcula elporcentaje de los individuos que han resistido. Los tests de estrés no se deben realizar cuando laspostlarvas están mudando, ya que éstas se encuentran excesivamente estresadas durante estaetapa. Algunos laboratorios de postlarvas han usado 100 ppm de formalina durante 30 minutoscomo test de estrés, con resultados igualmente satisfactorios.Evaluación de la calidad de las postlarvas usando procedimientos de Nivel 3Las evaluaciones de Nivel 3 se deben llevar a cabo en un número de postlarvas determinadoestadísticamente (normalmente 150 en una población de > 10 000) por cada tanque (con elobjeto de proporcionar un resultado con un 95% de nivel de confianza para una prevalencia del2%) usando técnicas PCR para la detección de patógenos virales importantes. Este test tiene queser realizado, de acuerdo a los protocolos estándares, por laboratorios de postlarvas dediagnóstico competentes, siguiendo las normas para la recogida, preservación y transporte de lasmuestras. Una discusión más detallada del muestreo para la detección de enfermedades, seencuentra en OIE (2003).El único resultado aceptable para cualquiera de estos patógenos virales es el negativo (el cual sepuntúa con un 10 –ver Cuadro 10), donde ambos, los controles negativos y positivos han dadosimultáneamente los resultados esperados. Todos los lotes con resultado positivo deben serdestruidos.Cuadro 10. Resumen de la evaluación de la calidad de las postlarvas usandoprocedimientos de Nivel 3.ANÁLISIS OBSERVACIONES DETERMINACIÓN PUNTUACIÓNCUALITATIVAPCR WSSV/YHV Negativa 10IHHNV Negativa 10TSV Negativa 10Evaluación de riesgos para la siembraSe debe usar una cuadro que resuma los tres niveles de calidad de las postlarvas y lapuntuación obtenida, para determinar el destino de las PLAl igual que en la evaluación de la calidad de las larvas, se debe realizar una tabla resumen de lostres niveles de calidad de las postlarvas y de los puntos del sistema empleado (usando algunos o57
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