Thése finale - Université Mentouri de Constantine

courant. L’inconvénient est la difficulté de maintenir les stocks de phages biologiquement
actifs et les souches de contrôle tests (Avril et Donnio, 1998).
1.5. Le bactériocinotype :
Tout comme la lysotypie, il s’agit là d’une technique lourde réalisée dans les
laboratoires de référence. Beaucoup d'auteurs recommandent le typage de la K.p via
bactériocines. La bactériocynotypie étudie la sensibilité à des bactériocines.
Les bactériocines sont des substances bactéricides communément des protéines
produites par des bactéries pour inhiber la croissance d'autres bactéries, souvent membres des
mêmes espèces (Grimont et al., 2007). La synthèse des bactériocines n'est pas assez fréquente
chez K.p ce qui fait de cette technique la méthode de choix pour le bactériocynotype des
organismes appartenant à ce genre (Birge, 1994; Podschun et Ullmann, 2000)
1.6. L’éléctrophorèse des protéines et immunoblotting :
Les variations de structure des protéines totales ou des protéines de surface bactériennes
peuvent-être analysées par l’éléctrophorèse en gel de polyacrylamide après dénaturation des
constituants bactériens par le lauryl sulfate de sodium dodecyl sulfate (SDS-Page). Les
protéines sont ensuite détectées dans le gel soit directement par coloration, soit indirectement
par immuno-blot. L’avantage de cette technique est de pouvoir typer toutes les bactéries, mais
son inconvénient, surtout lorsqu’elle n’est pas suivie d’immunoblotting, est de donner parfois
trop de bandes ce qui a pour conséquence une lecture et une interprétation difficiles (Avril et
Donnio, 1998).
2. Les marqueurs génotypiques
C’est l’analyse de l’ADN total, chromosomique ou extra chromosomique.
2.1. Etude du polymorphisme enzymatique par méthode éléctrophorétique ou
Multilocus Enzyme Electrophorésis (MEE) :
Cette méthode consiste à séparer les protéines par migration en gel puis à détecter
chaque enzyme par son activité vis à vis de son substrat spécifique. Pour chaque enzyme
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