THESE DE DOCTORAT DE L'UNIVERSITE PARIS 6 Capucine ...

More documents

Recommendations

Info

2 c’est 3,4 millions de pb, 1 base = 300g/mol, et 1µg correspond à 300 000 cellules. Comme ça tu l’auras à portée de main!! Et au fait, la cafetière est pour toi, je sais que tu l’aimes tant. Je voudrais dire un grand merci à Anne Rübenstrunk, ancienne thésarde du laboratoire. Je te remercie pour tout ce que tu m’as appris à mes débuts, merci aussi pour ton soutien, ton amitié, ta confiance et notre travail en équipe sur ton système de régulation. Je voudrais remercier toute l’équipe de Michel Popoff de l’Insitut Pasteur avec qui j’ai collaboré. Merci tout particulièrement à Yannick Pereira et Maria Manich qui m’ont accueillie au sein de leur laboratoire pour les tests de neutralisation. Je vous remercie mille fois tous les deux pour votre aide. Merci Yannick pour ton soutien tout au long de ma thèse et bonne chance pour la suite! Merci Maria pour tes injections impeccables et pour nos discussions bien agréables. Un grand merci à Rachel Carton et Nathalie Ausseur qui m’ont bien aidées sur les dosages ELISA pendant leurs stages BTS. Merci Rachel pour tes manips impeccables et l’entrain que tu as mis à les réaliser. Merci à Myriam Mezrahi et Elodie Litzler pour leur travail sur les toxines B et E lors de leur stage de <strong>DE</strong>A. J’ai été ravie de travailler avec vous pendant ces quelques mois. Merci à Gabrielle Valin qui a fait un énorme travail sur le système de régulation. Je voudrais remercier Michel Bureau avec qui j’ai travaillé sur l’imagerie optique. Merci Michel pour cette collaboration fructueuse, merci pour ton aide et surtout Michel : soit positif! Je voudrais également remercier Michel Bessodes qui m’a aidé à réaliser la toute petite réaction chimique de ma thèse, à savoir la synthèse de la tyramide-biotine. Je remercie enfin Jean-Michel Caillaud (Société Biodoxis) avec qui j’ai été ravie de collaborer et qui a réalisé et analysé l’étude histologique sur les coupes de muscles de souris, merci aussi à Hervé Volland (CEA) qui m’a gracieusement donné 12 anticorps monoclonaux contre le FcBoNTA, et merci enfin à Chantal Martin qui nous a bien aidés sur l’expérience avec les lapins. Je tiens à remercier Emmanuelle Fabre qui m’a soutenue pendant cette rédaction de thèse. Je suis de tout coeur avec toi pour la suite et je te souhaite bonne chance! Je tiens à remercier Jeanne Chain avec qui j’ai été ravie de créer l’exposé «Bullons ensemble!» au Palais de la Découverte. J’en profite pour remercier l’ensemble du Département Chimie du Palais de la Découverte au sein duquel j’ai réalisé mon monitorat. Merci à tous pour votre bonne humeur et votre enthousiasme. Je tiens enfin à remercier l’ensemble du laboratoire : les chimistes, les physico-chimistes, les biologistes, l’équipe administrative et l’équipe d’entretien. Un grand merci enfin à mon papa, à Romain (et Tiffany), Julien et Pauline, mes grands-parents, et toute ma famille pour leur soutien au quotidien. Merci à Erika, bonne chance pour la fin! Merci enfin à Benoît, qui sera ravi que je le cite! Merci aussi à ses parents qui nous ont préparé de bons petits plats pendant cette période de rédaction.
Table des matières Liste des abréviations 9 Introduction 11 1 Introduction au transfert de gène . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 1.1 Principe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 1.2 Les stratégies . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 1.3 Les cellules cibles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 1.4 Les barrières au transfert de gène . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13 1.5 Les vecteurs viraux . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 1.6 Les vecteurs non viraux . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16 2 Electrotransfert . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 2.1 Historique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 2.2 Mécanisme de l’électrotransfert à l’échelle de la cellule . . . . . . . . . . . 21 2.3 Mécanisme de l’électrotransfert in vivo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 24 2.4 Réalisation pratique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 25 2.5 Tissus cibles . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 29 3 Applications thérapeutiques de l’électrotransfert . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 3.1 Sécrétion ectopique de protéines . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 3.2 Maladies musculaires . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33 3.3 Production d’anticorps par immunisation génétique . . . . . . . . . . . . . 34 3.4 Cancers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35 3.5 Electrotransfert comme un outil . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 35 4 Régulation temporelle de l’expression des gènes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 4.1 Une large étendue d’applications . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 36 4.2 Stratégies de régulation de l’expression d’un gène . . . . . . . . . . . . . . 37 4.3 Régulation par neutralisation du gène ou de son ARN messager . . . . . . 38 4.4 Régulation par un contrôle de l’initiation de la transcription . . . . . . . . 43 5 Description du projet de thèse . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 50 3
Page 1: THESE DE DOCTORAT DE L’UNIVERSITE
Page 6 and 7: 4 Table des matières Matériel et
Page 8 and 9: 6 Table des matières 2.2 Choix de
Page 10 and 11: 8 Table des matières 4.4.5 Etude d
Page 12 and 13: 10 Liste des abréviations gag grou
Page 14 and 15: 12 Introduction Maladies cardiovasc
Page 16 and 17: 14 Introduction aux dégradations m
Page 18 and 19: 16 Introduction actuellement testé
Page 20 and 21: 18 Introduction + + + + Tête catio
Page 22 and 23: 20 Introduction les sources de cavi
Page 24 and 25: 22 Introduction La différence de p
Page 26 and 27: 24 Introduction 2.3 Mécanisme de l
Page 28 and 29: 26 Introduction Choix des électrod
Page 30 and 31: 28 Introduction Un autre facteur de
Page 32 and 33: 30 Introduction tissu espèce gène
Page 34 and 35: 32 Introduction - c’est un tissu
Page 36 and 37: 34 Introduction 3.3 Production d’
Page 38 and 39: 36 Introduction Etude d’expressio
Page 40 and 41: 38 Introduction 4.3 Régulation par
Page 42 and 43: 40 Introduction bloquant physiqueme
Page 44 and 45: 42 Introduction Approche Descriptio
Page 46 and 47: 44 Introduction - inductibilité :
Page 48 and 49: 46 Introduction tet tetO 7 CMVmin r
Page 50 and 51: 48 Introduction NH2 terminale du r
Page 52 and 53: 50 Introduction p65 FRAP r FKBP12 C
Page 54 and 55:
52 Matériel et Méthodes Le plasmi
Page 56 and 57:
54 Matériel et Méthodes Le plasmi
Page 58 and 59:
56 Matériel et Méthodes vecteur 0
Page 60 and 61:
58 Matériel et Méthodes 2 Microbi
Page 62 and 63:
60 Matériel et Méthodes 1 à 2 he
Page 64 and 65:
62 Matériel et Méthodes Gène Fra
Page 66 and 67:
64 Matériel et Méthodes de l’ea
Page 68 and 69:
66 Matériel et Méthodes Deux lipo
Page 70 and 71:
68 Matériel et Méthodes la diluti
Page 72 and 73:
70 Matériel et Méthodes ambiante.
Page 74 and 75:
72 Matériel et Méthodes Préparat
Page 76 and 77:
74 Matériel et Méthodes 6.4 Trans
Page 78 and 79:
76 Matériel et Méthodes 7 Imageri
Page 81 and 82:
1 Suivi du transfert de gène par i
Page 83 and 84:
1.4. Signaux optiques 81 1.4 Signau
Page 85 and 86:
1.4. Signaux optiques 83 Fig. 1.3 -
Page 87 and 88:
1.6. Première mise au point : effe
Page 89 and 90:
1.7. Deuxième mise au point : éle
Page 91 and 92:
1.7. Deuxième mise au point : éle
Page 93:
1.8. Conclusion et perspectives 91
Page 96 and 97:
94 Chapitre 2. Système de régulat
Page 98 and 99:
Page 100 and 101:
Page 102 and 103:
100 Chapitre 2. Système de régula
Page 104 and 105:
Page 106 and 107:
Page 108 and 109:
Page 110 and 111:
Page 112 and 113:
Page 114 and 115:
Page 116 and 117:
Page 118 and 119:
Page 120 and 121:
Page 122 and 123:
Page 124 and 125:
Page 126 and 127:
124 Chapitre 3. Obtention d’antis
Page 128 and 129:
Page 130 and 131:
Page 132 and 133:
Page 134 and 135:
Page 136 and 137:
Page 138 and 139:
Page 140 and 141:
Page 142 and 143:
Page 144 and 145:
Page 146 and 147:
Page 148 and 149:
Page 150 and 151:
Page 152 and 153:
Page 154 and 155:
Page 156 and 157:
Page 158 and 159:
Page 160 and 161:
Page 162 and 163:
Page 164 and 165:
Page 166 and 167:
Page 168 and 169:
Page 170 and 171:
168 Chapitre 4. Etude de l’état
Page 172 and 173:
Page 174 and 175:
Page 176 and 177:
Page 178 and 179:
Page 180 and 181:
Page 182 and 183:
Page 184 and 185:
Page 186 and 187:
Page 188 and 189:
Page 190 and 191:
Page 193 and 194:
Conclusion Le transfert de gène a
Page 195:
long terme en analysant l’état d
Page 198 and 199:
196 Bibliographie [19] N. K. Green
Page 200 and 201:
198 Bibliographie [67] J. Teissie e
Page 202 and 203:
200 Bibliographie [107] M. J. Molna
Page 204 and 205:
202 Bibliographie [153] J. J. Drabi
Page 206 and 207:
204 Bibliographie [193] M. Dupuis,
Page 208 and 209:
206 Bibliographie [239] M. Gossen e
Page 210 and 211:
208 Bibliographie [284] H. Madry et
Page 212 and 213:
210 Bibliographie [329] C. A. Torre
Page 214 and 215:
212 Bibliographie [374] J. F. Coste
Page 218:
Résumé Transfert de gène in vivo
show all

THESE DE DOCTORAT DE L'UNIVERSITE PARIS 6 Capucine ...

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?