et al
et al
et al
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
(pimaricin) จาก S. nat<strong>al</strong>ensis (Aparicio <strong>et</strong> <strong>al</strong>., 2000), ไทรโคมัยซิน (trichomycin) จาก S.<br />
hachijoensis (Hosoya <strong>et</strong> <strong>al</strong>., 1952) รวมทั้งไรโมซิดินจาก<br />
S. rimosus (Davisson <strong>et</strong> <strong>al</strong>.,<br />
1951)<br />
การตรวจหาสารออกฤทธิ์ตานเชื้อรา<br />
การตรวจหาสารตานเชื้อราเบื้องตน<br />
สามารถทําโดยใชวิธีทางจุลชีววิทยา ทดสอบสาร<br />
ตัวอยางในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อรา<br />
เรียกวา วิธีการแพรผานวุน<br />
(agar diffusion<br />
m<strong>et</strong>hod) ทําโดยการเพาะเชื้อราบนจานอาหารแข็ง<br />
ซึ่งนิยมใช<br />
Candida หรือ Saccharomyces<br />
จากนั้นนําสารตัวอยางใสลงบนผิวอาหารใหแพรเขาสูเจล<br />
ซึ่งอาจทําไดหลายวิธี<br />
เชน การวางทอ<br />
ทรงกระบอกบนผิวของจานอาหารแลวเติมสารละลายของสารที่ตองการทดสอบลงไป<br />
การเจาะ<br />
อาหารแข็งออกเปนทรงกระบอกแลวเติมสารละลายลงไป หรือการวางแผนกระดาษกลม (paper<br />
disk) ที่ชุมดวยสารละลายบนอาหารแข็ง<br />
(Brewer and Platt, 1967; Tanaka, 1992)<br />
การตรวจสอบสารตานเชื้อราในกลุมโพลีอีน<br />
สามารถใชวิธีทางเคมี ไดแก thin-layer<br />
chromatography (TLC) และสเปกโทรเมทรี (spectrom<strong>et</strong>ry) โดยการสกัดสารโพลีอีนจากเซลล<br />
หรืออาหารเลี้ยงเชื้อดวยบิวทานอล<br />
(n-butanol) หรือเมธานอล จากนั้นจึงนําไปทํา<br />
TLC หรือวัด<br />
การดูดแสงเปรียบเทียบกับสารมาตรฐาน (Brewer and Platt, 1967; Tanaka, 1992)<br />
การแยกสารในกลุมโพลีอีนโดย<br />
TLC สามารถใชตัวพา (mobile phase) ไดหลายชนิด<br />
เชน คลอโรฟอรม:เมธานอล (85:15), บิวทานอล:กรดอะซีติก:น้ํา<br />
(4:1:5) และบิวทานอล:<br />
เอธานอล:น้ํา<br />
(1:1:1) (Pandey and Rinehart, 1977; Pandey <strong>et</strong> <strong>al</strong>., 1982) เปนตน สามารถ<br />
ตรวจสอบจุดของสารที่แยกไดหลายวิธี<br />
เชน ตรวจสอบภายใตแสงอัลตราไวโอเลต, การรมดวยไอ<br />
ของไอโอดีน (iodine vapor), การพนดวยกรดซัลฟูริก (sulfuric acid spray) และการพนดวยนิน<br />
ไฮดริน (ninhydrin spray) เปนตน หรืออาจนําไปทําไบโอออโทกราฟ (bioautography) โดยการ<br />
การเททับแผนเคลือบดวยอาหารที่มีเชื้อรา<br />
เพื่อตรวจสอบไดอีกดวย<br />
(Lomovskaya <strong>et</strong> <strong>al</strong>., 1997;<br />
Campelo and Gil, 2002)<br />
คาการดูดแสงของสารโพลีอีนมีลักษณะเฉพาะ โดยจะมีความยาวคลื่นที่ใหคาการดูดแสง<br />
สูงสุด (λmax) 3 หรือ 4 ตําแหนง (Tanaka, 1992) ซึ่งสารที่มีจํานวนพันธะคูเทากันจะมีการดูด<br />
แสงที่ความยาวคลื่นใกลเคียงกัน<br />
โดยสามารถสรุปการดูดแสงของโพลีอีนทั่วไปไดดังตารางที่<br />
1<br />
17