n. 80 Aprile 2013

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si è eliminato l’eccesso di acqua dalle capsule, che sono poi state
posizionate verticalmente. Dopo circa 18 ore si sono individuati
e trapiantati alcuni singoli conidi germinanti di Alternaria al fine
di ottenere delle colture in purezza su WA.
Trascorsi 7 giorni, si sono prelevati dei dischetti di substrato con
il fungo in crescita, poi posizionati su foglie di cv Abate Fétel
precedentemente disinfettate in ipoclorito e lavate sotto acqua
corrente. Le foglie sono state poste in camera umida ed incubate
nelle stesse condizioni cicliche di luce e temperatura descritte
in precedenza. Dopo 6-7 giorni, sia le foglie su cui erano stati
posizionati i dischetti con gli isolati da frutto sia quelle su cui
erano stati posizionati i dischetti con gli isolati da foglia hanno
dato origine a macchie necrotiche (fig. 3). Da queste ultime si è
reisolata costantemente Alternaria sp. Al contrario, nelle foglie
su cui erano stati posizionati, come controllo negativo, dischetti
di WA sterile, non si è osservata alcuna necrosi.
Figura 3: Test di patogenicità
Biosaggio con filtrati colturali
Per verificare la capacità dei funghi di produrre tossine fitotossiche
sono stati allestiti alcuni filtrati colturali. Più precisamente,
4-5 dischetti di WA sono stati inseriti all’interno di beute contenenti
100 ml di substrato liquido CZAPEK, sterilizzato previamente
in autoclave per 21 minuti a 120 °C.
Per questa prova sono stati utilizzati 2 isolati monosporici provenienti
da foglia e 2 provenienti da frutto, gli stessi utilizzati per
la prova di patogenicità.
Trascorse tre settimane il substrato liquido nel quale era cresciuto
il fungo è stato filtrato su carta da filtro Ederol e successivamente
su microfiltro Pall Acrodisc; 30 µl di questo filtrato sono
stati inoculati nella pagina inferiore di alcune foglie di pero,
precedentemente lesionate con una lancetta metallica. Le foglie
sono state quindi poste in camera umida a 25 °C.
L’osservazione dei sintomi è stata effettuata a cadenza giornaliera
nei 4 giorni successivi.
Il biosaggio ha dato esito positivo per quanto riguarda sia gli isolati
provenienti da frutto che quelli provenienti da foglia, con una
manifestazione leggermente più marcata nel caso degli isolati
provenienti da foglia (fig. 4).
Conclusioni
Le osservazioni ed i test effettuati inducono ad ipotizzare che
in Piemonte si sia differenziato un ceppo di Alternaria sp. (verosimilmente
A. alternata) in grado di colpire la cultivar di pero
Abate Fètel mediante la produzione di una tossina ospite – specifica.
Questa situazione, nuova per il territorio nazionale, presenta
molte analogie con quella manifestatasi per la prima volta
in Alto Adige su melo a partire dagli anni ’90 per l’azione di un
ceppo ospite specifico di A. alternata (Gobber et al., 2004). Sarà
interessante verificare nei prossimi anni l’andamento del fenomeno
sul territorio piemontese e la sua eventuale diffusione alle
regioni limitrofe.
Figura 4: Biosaggio con filtrati colturali
Si ringraziano per la collaborazione prestata le aziende agricole Rosso
Mario (Centallo), Supertino Francesco e Rubiolo Gianni (Savigliano)
nonché i tecnici Giampiero Sabena (Agenzia 4A) e Daniele Martino
(Lagnasco Frutta)
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