índice - Revista Sobrape

R. Periodontia - 18(2):71-76
DISCUSSÃO
A busca por uma solução que promova a descalcificação
de tecido mineralizado em curto espaço de tempo e preserve
os componentes celulares, é ainda um desafio para os
profissionais da área.
Nenhuma das substâncias descalcificadoras avaliadas
neste estudo pode ser considerada como “ideal” já que as
soluções de ácido nítrico e Biodec-R não foram capazes de
preservar o núcleo de grande número de células e a solução
de EDTA necessitou de longo período de tempo (135 dias)
para descalcificar as amostras.
A solução de EDTA possibilitou a preservação de 100%
dos núcleos celulares, concordando com os achados de
Junqueira & Junqueira, 1983; Rode et al., 1996; Michalany,
1998. Entretanto o período de tempo necessário para a
descalcificação das amostras foi muito longo (135 dias) o
que, em determinados casos, dificulta sua utilização
(Sanderson et al., 1995; Mattuella et al., 2007). Embora diversas
patologias que se desenvolvem no tecido mineralizado
exijam protocolos de tratamento eficientes e que se estabeleçam
rapidamente, muitas vezes, os mesmos só podem ser
determinados após o diagnóstico histopatológico das lesões.
Em decorrência do EDTA preservar a morfologia tecidual,
vários autores utilizaram esta solução, em diferentes concentrações,
em seus experimentos (Vongsavan et al., 1990;
Hume & Keat, 1990; Sano et al.,1992; Hellstrom & Nillson,
1992; Rode et al., 1996; Kaneco et al., 1998), conseguindo
mínimo prejuízo da morfologia tecidual. Adicionalmente, o
EDTA, quando utilizado para descalcificar amostras que serão
analisadas em microscopia eletrônica de transmissão,
também apresenta comportamento satisfatório (Madden &
Henson, 1997).
Para melhorar o tempo de descalcificação promovido pelo
EDTA, pesquisadores têm associado seu uso com microondas,
obtendo bons resultados com relação não só a redução
do tempo de descalcificação, mas também da conservação
tecidual (Vongsavan et al., 1990; Hellstrom & Nillson,
1992; Rode et al., 1996; Madden & Henson, 1997; Laboux
et al., 2004).
O ácido nítrico a 5%, apesar de muito utilizado devido
ao reduzido tempo necessário para a descalcificação (Kayhan
& Algun, 2003), não preserva, como observado neste estudo,
de forma apropriada, a morfologia celular (Walsh et al.,
1993, Yamamoto-Fukud et al., 2000, Shibata et al., 2000).
O ácido clorídrico e o ácido fórmico, agentes também
bastante utilizados no processo da descalcificação, apresentam
desempenho interessante. Embora o ácido clorídrico não
seja capaz de preservar adequadamente a estrutura celular,
apresenta satisfatório tempo de descalcificação. Já o ácido
fórmico, proporciona bons resultados com relação a preservação
da morfologia tecidual, mas o tempo necessário para
a descalcificação é excessivamene longo (Yamamoto-Fukud
et al., 2000, Shibata et al., 2000).
A mistura de dois ou mais agentes descalcificadores como
ácido fórmico e ácido pícrico (Método de Lillie), ácido fórmico
e ácido nítrico (Método de Cajal), citados por Behmer et al.,
1976; e ácido fórmico e ácido clorídrico (Biodec-R), tem sido
utilizada por diversos profissionais, porém, nesse estudo, o
Biodec-R não foi efetivo na preservação do núcleo de expressivo
número de células.
O processamento histológico, desde a fixação até a obtenção
das lâminas, representa uma agressão ao espécime
que será analisado. Adicionalmente a este fato, ainda existe
consenso sobre o uso de um protocolo de descalcificação,
o que dificulta a comparação dos resultados de diferentes
pesquisas.
Diante dos argumentos levantados, o estabelecimento
de um protocolo de descalcificação ainda merece ser mais
estudado para tornar possível a determinação de um padrão
ideal de processamento histológico capaz de
descalcificar o tecido mineralizado em curto espaço de
tempo e que, ao mesmo tempo, preserve as estruturas
celulares..
CONCLUSÃO
Embora o ácido nítrico a 5% e o Biodec-R tenham promovido
a descalcificação dos blocos mandibulares em curto
espaço de tempo, somente as peças descalcificadas com a
solução de EDTA a 7% evidenciaram alta preservação dos
núcleos das células.
ABSTRACT
The aim of this study was to assess the applicability of
three different decalcification solutions (EDTA at 7%, nitric
acid at 5% and Biodec-R solution) on desmineralized tissue,
considering the decalcification time and nuclear integrity. Use
was made of 15 Wistar rats divided into three groups (A, B,
C) of five animals. After being sacrificed, their mandibles were
removed and desiccated, thus obtaining two mandibular
blocks from each animal. The tissues were stored in 10%
formal for 48 hours for fixation. For the decalcification stage,
group A was kept in EDTA, group B in nitric acid and group
C in Biodec-R solution. The respective decalcification times
were recorded. Afterwards, the tissues were processed in
accordance with the routine histologic protocol, thereby
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