Diagnostik im Dialog - Roche Diagnostics

Mamma- und Magenkarzinomen, als
Vorrausetzung für eine HerceptinT-Therapie
bei entsprechendem Tumortyp, war
der Einstieg in die Personalisierte Medizin.
Heute erfolgt bereits bei verschiedenen
Krankheitsbildern eine individualisierte
Therapie, abhängig davon, welche
spezifischen Moleküle exprimiert werden.
Die qualitative, die semiquantitative und
die quantitative Erhebung immunhistochemischer
Parameter ist von erheblicher
therapeutischer Bedeutung. Daher war es
erforderlich, die Sensitivität und Spezifität
der Immunhistochemie zu erhöhen.
Halbautomatischen Geräten folgte die
flächenhafte Einführung geschlossener,
vollautomatisierter Systeme. Dadurch
wurden mögliche Qualitätsabweichungen
im Rahmen der technischen Bearbeitung
eliminiert. Die Entwicklung immunhistochemischer
Systeme mit kontinuierlicher
Probenzuführung folgte den Anforderungen
an moderne histopathologische
Labors: schnelle und präzise Bearbeitung
bei laufend neuem Probeneingang.
Ein Problem bei der Quantifizierung
immunhistochemischer Befunde stellt
nach wie vor die Inter- und Intra observervariabilität
dar. Diese beeinträchtigt z.T.
erheblich die Ergebnisqualität im Rahmen
der Targettherapie, da die exakte
quantitative Aussage zur Expression der
individuellen diagnostischen Targets Voraussetzung
für eine optimale Therapie ist.
Computergestützte morphometrische
Analysesysteme (z.B. Ventana Image Analysis
System / VIAS) minimieren subjektive
Fehler. Sie liefern individuelle Quantifizierungsverfahren
und unterstützen
unter anderem
O die präzise Evaluierung des
HER2 / neu-Status
O die qualitative und quantitative Beurteilung
des Hormonrezeptorstatus
O die exakte Bestimmung der Proliferationsrate
litätsmanagement. Dazu gehört z.B. die
stetige Nachverfolgbarkeit aller verwendeten
Reagenzien, einschließlich Haltbarkeitskontrollen.
Ventana BenchMark Ultra: Automatische
Bearbeitung von bis zu 30 Proben gleichzeitig
Neue Entwicklungen in der Molekularpathologie
Seit mehr als 10 Jahren ergänzt die
molekularpathologische Diagnostik das
methodische Spektrum. Im Wesentlichen
haben zwei Methoden Einzug in
den diagnostischen Alltag gehalten: die
Polymerase-Ketten-Reaktion (PCR) und
die in-situ-Hybridisierung. Unter Nutzung
sogenannter Bio-Chips oder -Strips
werden beide Methoden kombiniert. Die
Hybridisierung von PCR-Produkten auf
Bio-Chips ermöglicht
O die Subtypisierung von Erregern –
eine wichtige Information für die
optimale Therapiewahl
O Nukleinsäuresequenzen bis zum
einzelnen DNA-Basenaustausch kostengünstig
zu identifizieren, ohne aufwendige
Sequenzierung
Die Detektion von in-situ-Hybridisierungsprodukten
erforderte in der
Vergangenheit fluoreszenmikroskopische
Techniken. Neuere Entwicklungen
ermöglichen die Identifizierung mittels
konventioneller Lichtmikroskopie auf
Basis histochemischer Techniken. Neben
den klassischen histochemischen Detektionsverfahren
wie Peroxidase- oder alkalische
Phospahatase-Technik, kommt auch
die Immunogold-Silber-Technik (SISH)
in der diagnostischen Routine zum
Tragen. Der Pathologe kann jetzt einen
molekularpathologischen Test präzise
Die Einbindung der beschriebenen Analysenmethoden
in Pathologie-Informationssysteme
bildet eine wesentliche Basis
für das Qualitätsmanagement in großen
Pathologie-Einheiten. Effiziente Workflowlösungen
sparen durch die automatisierte,
papierlose Dokumentation
manuelle Arbeitsschritte und erfüllen die
Anforderungen an ein zeitgemäßes Quaauswerten,
ohne seinen Arbeitsplatz – das
Lichtmikroskop – zu verlassen. Das spart
Arztarbeitszeit.
ISH-Techniken erlauben nicht nur die
Detektion von Genamplifikationen sondern
auch von Translokationsereignissen.
Dafür werden simultan zwei Hybridisierungen
mit unterschiedlichen Reaktionsprodukten
durchgeführt, wobei entweder
Split-Sonden oder Fusionssonden eingesetzt
werden. Diese Methoden spielen z.B.
in der Lymphomdiagnostik aber auch in
der Beurteilung spezifischer Translokationen
in Weichgewebstumoren eine
Rolle.
Eine ganz aktuelle Innovation in der
Molekularpathologie stellen massenspektrometrische
Methoden dar. Erste
Publikationen zeigen die Anwendungsmöglichkeit
bei Gewebeschnitten. In den
vergangenen Jahren wurden bereits die
Voraussetzungen für die Durchführung
der MALDI-TOF-Massenspektrometrie*
am Paraffinschnitt geschaffen. Der neueste
Zweig dieser Entwicklung ist das
„MALDI-TOF-Imaging“. Dies gestattet
nicht nur Aussagen zum Proteom, sondern
auch spezifische Masse / Ladungsverhältnisse
bestimmten Lokalisationen
im Schnitt zuzuordnen und deren
Quantität darzustellen. Die potenziellen
Anwendungsgebiete in der Pathologie
sind vielfältig, z.B.:
O Objektivierung und Präzisierung der
Diagnose von Tumoren
O objektives Tumor-Grading
O Quantifizierung verschiedener Biomarker
O Detektion von Metaboliten im
Gewebe
O präzise Diagnose von therapierelevanten
Amyloidsubtypen
O exakte Einordnung des zeitlichen
Ablaufs degenerativer Prozesse, da
bei akuten Entzündungszuständen
oder nach Traumata andere Moleküle
exprimiert werden als in der chronischen
Phase pathologischer Reaktionen
Die Methode „in-situ-Proteomics“ wird
in der Zukunft individuelle Interpretationsmöglichkeiten
in der histopathologischen
Diagnostik ergänzen und zur weiteren
Objektivierung und Präzisierung
histopathologischer Diagnosen beitragen.
Ausgabe 30 • 10/2010 5