Bedeutung des Lymphotoxin-β-Rezeptors für die Bildung von ...

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ERGEBNISSE B-Lymphozyten an den Gesamtlymphozyten war mit etwa 70 Prozent bei den Transplantaten genauso hoch wie bei den Kontrollen (Abbildung 10A). Innerhalb der B- Lymphozyten zeigte sich die Subpopulation der MZ-B-Zellen bei den Transplantaten mit 5 Prozent gegenüber den Kontrolltieren mit 8 % nur leicht erniedrigt. Der Gesamtanteil der IgD negativen B-Zellen war hingegen bei transplantiertem und nativem Milzgewebe mit etwa 11 Prozent gleich hoch (Abbildung 10B). Für die T-Lymphozyten bestand ein sehr ähnliches Bild. Der Anteil an den Gesamtlymphozyten betrug bei den Milztransplantaten ebenso wie bei den Kontrollmilzen etwa 23 Prozent. Gleiches ergab sich auch für CD8- und CD4-T-Zellen, deren Anteil in Transplantaten und Kontrollen identisch war (Abbildung 10A). Bei näherer Untersuchung der CD4-T-Zellen waren die Gedächtniszellen mit jeweils etwa 24 Prozent gleich stark vertreten, während von den regulatorischen CD4-T-Zellen in den Transplantaten 40 Prozent weniger als in den nativen Milzen anzutreffen waren (Abbildung 10B). Natürliche Killerzellen waren in beiden Versuchsgruppen zu 2,7 Prozent vorhanden, aber NK-T-Zellen kamen in nativen Milzen etwa doppelt so häufig vor wie in den Transplantaten. Allerdings war dies die kleinste Subpopulation und erreichte maximal 1,5 Prozent Anteil an den Gesamtlymphozyten (Abbildung 10A). Neben der Analyse der Subpopulationen wurde die Expression der Adhäsionsmoleküle L-Selektin, ICAM-1, α 4 β 7 sowie CD44 auf T-und B-Lymphozyten untersucht. Darüber hinaus wurde der Anteil der T-Zellen bestimmt, der für den Aktivierungsmarker CD69 positiv war und wie viele B-Zellen MHC-Klasse II (MHCII) exprimierten. In Abbildung 11 ist zu sehen, dass weder für T- noch B-Lymphozyten irgendwelche Unterschiede in der Expression der beschriebenen Moleküle gefunden wurden. Etwa 65 Prozent der T-Zellen waren sowohl bei den WT-Transplantaten als auch bei den WT-Kontrollen positiv für L-Selektin. ICAM-1 und CD44 wurden auf ca. 80 Prozent der T-Zellen von Kontrollmilzen und Transplantaten exprimiert (Abbildung 11A). Integrin α 4 β 7 wurde in beiden Versuchsgruppen auf etwa 30 %, der Aktivierungsmarker CD69 auf jeweils 10 Prozent der T-Lymphozyten gefunden. Die Untersuchung der B- Lymphozyten ergab ebenfalls keine Unterschiede zwischen den Versuchsgruppen (Abbildung 11B). Allerdings waren bei den Kontrolltieren deutlich mehr B-Zellen positiv für L-Selektin. Die hohe Standardabweichung (beide 10 Prozent) und die geringe Anzahl der Transplantate (n = 3) ließ hier keinen signifikanten Unterschied erkennen. Die anderen untersuchten Oberflächenmoleküle konnten sowohl in der nativen Milz als auch im Transplantat durchgängig auf über 90 Prozent der B Lymphozyten nachgewiesen werden. 37
ERGEBNISSE A) Prozent von Lymphozyten 100 80 60 30 25 20 15 10 WT-Kontrolle WT WT B) 5 0 35 B-Zellen T-Zellen CD8-T-Zellen CD4-T-Zellen NK-Zellen NK-T-Zellen ** 35 Prozent von TCRβ + /CD4 + - Zellen 30 25 20 15 10 5 * * 30 25 20 15 10 5 Prozent von IgM + - Zellen 0 CD4-memory CD4-regulator IgD negativ MZ-B-Zellen 0 Abbildung 10: Lymphozyten-Subpopulationen von nativen WT-Milzen und Milztransplantaten A) Prozentuale Anteile der Subpopulationen an den Gesamtlymphozyten in nativen WT-Milzen (WT-Kontrolle) und Milztransplantaten 8 Wochen nach der Transplantation in splenektomierte WT-Tiere (WT WT). B) Prozentuale Anteile der CD45RB – memory und CD25+ regulatorischen CD4-T- Zellen, sowie der IgD negativen und CD21+CD23 – Marginal Zonen B-Zellen bei den in A) genannten Versuchsgruppen. Mittelwerte und Standardabweichungen von n = 7 bzw. 4 Tieren; * = p < 0,05, ** = p < 0,01. 38
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