Bedeutung des Lymphotoxin-β-Rezeptors für die Bildung von ...

ERGEBNISSE
Obschon der Antikörper gegen den kongenen Marker CD45.1 trotz der
Blockierungsschritte im Färbeprotokoll eine leichte unspezifische Bindung zeigte
(Abbildung 16, links), konnten dennoch die kongenen Zellen eindeutig identifiziert werden
(Abbildung 16, Mitte). Dabei stellte sich heraus, dass 8 Wochen nach der Transplantation
nur noch Leukozyten des Empfängers im Regenerat zu finden waren (Abbildung 16,
rechts). Dieses Resultat belegt, dass die Präsenz von Marginalzonen-B-Zellen im
Transplantat von WT LTβR -/- nicht auf dem Überleben der eingebrachten Zellen
beruhte, sondern tatsächlich eine Neubildung dieser Zellen im Knockout-Tier
stattgefunden hatte.
3.2.3. Kompartimente und Keimzentren sind abhängig von LTβR in der Milz
Nachfolgend sollte immunhistologisch geklärt werden, ob und inwieweit die strukturellen
und die damit verbundenen funktionalen Defizite in der Milz von LTβR -/- -Tieren durch die
Expression des Rezeptors im adulten Tier beseitigt werden konnten (Abbildung 17). Der
Nachweis von FDCs in WT LTβR -/- -Transplantaten zeigte, dass für WT-Kontrollen
typische Strukturen, die in LTβR -/- -Tieren fehlen, durch LTβR-Expression wieder
hergestellt werden können (Abbildung 17, oben). In der Milz von WT-Tieren waren Rote
und Weiße Pulpa deutlich durch die Marginalzone und die metallophilen Makrophagen
voneinander getrennt. Innerhalb der Weißen Pulpa konnten PALS und Follikel klar
unterschieden werden und nach Stimulation mit Schaferythrozyten (SRBCs) bildeten sich
in den Follikeln gut erkennbare Keimzentren (Abbildung 17, unten links). Bei LTβR -/- -
Tieren konnten Bereiche mit Anhäufungen von Lymphozyten von mehr unstrukturierten
Bereichen unterschieden werden, die als Weiße und Rote Pulpa bezeichnet wurden. Es gab
jedoch keine Abgrenzung durch eine Marginalzone mit metallophilen Makrophagen, die
völlig fehlten. T- und B-Lymphozyten waren stark durchmischt anstatt in Kompartimenten
organisiert zu sein (Abbildung 17, unten Mitte). Die Stimulation mit SRBCs führte zu
keinen erkennbaren Anzeichen von Keimzentren. Im Transplantat von WT LTβR -/-
waren Weiße und Rote Pulpa dagegen deutlich voneinander getrennt und die metallophilen
Makrophagen waren klar an deren Grenze nachzuweisen (Abbildung 17, unten rechts). T-
und B-Zellen waren innerhalb der Weißen Pulpa in PALS und Follikel organisiert und
nach Injektion von SRBCs hatten sich Keimzentren gebildet, die in Größe und Position mit
denen der WT-Kontrollen vergleichbar waren.
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