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Untersuchungen zur Anwendbarkeit und Validität von In-vitro ...

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IV INHALTSVERZEICHNIS<br />

III Zusammenfassung.................................................................................. 181<br />

IV Summary.................................................................................................. 185<br />

V Material <strong>und</strong> Methoden ............................................................................ 189<br />

1 Material ........................................................................................................... 189<br />

1.1 Technische Geräte................................................................................... 189<br />

1.2 Verbrauchsmaterialen .............................................................................. 189<br />

1.3 Chemikalien ............................................................................................. 190<br />

1.4 Pflanzliche Arzneidrogen ......................................................................... 191<br />

1.5 Cytochrom-P450-Enzyme (CYP-Enzyme) ............................................... 192<br />

2 Methoden ........................................................................................................ 193<br />

2.1 Herstellung der Pflanzenextrakte ............................................................. 193<br />

2.2 Herstellung der <strong>In</strong>kubationspuffer ............................................................ 194<br />

2.3 HPLC-basierte <strong>In</strong>-<strong>vitro</strong>-Assays ................................................................. 195<br />

2.3.1 Stammlösungen.................................................................................. 195<br />

2.3.2 LC/MS-basierte <strong>In</strong>-<strong>vitro</strong>-Assays .......................................................... 197<br />

2.3.3 LC/Fluoreszenz-basierte <strong>In</strong>-<strong>vitro</strong>-Assays ............................................ 207<br />

2.4 Mikrotiterplatten-basierte Fluoreszenz-Assays......................................... 209<br />

2.4.1 Stammlösungen.................................................................................. 209<br />

2.4.2 <strong>In</strong>-<strong>vitro</strong>-Assays.................................................................................... 211<br />

2.5 Bestimmung der inhibitorischen Aktivität.................................................. 213<br />

2.6 Untersuchung der Quenching- <strong>und</strong> Eigenfluoreszenz-Effekte ................. 216<br />

2.6.1 Bestimmung der Quenching- <strong>und</strong> Eigenfluoreszenz-Effekte .............. 216<br />

2.6.2 Bestimmung der Eigenfluoreszenz ..................................................... 217<br />

VI Anhang................................................................................................... 219<br />

VII Abkürzungsverzeichnis........................................................................ 231<br />

VIII Veröffentlichungen ............................................................................... 233<br />

IX Literaturverzeichnis .............................................................................. 237

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