Untersuchungen zur Anwendbarkeit und Validität von In-vitro ...
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82 II Ergebnisse <strong>und</strong> Diskussion<br />
Zustände z. B. S0 <strong>und</strong> S1 naturgemäß sehr ähnlich ist, lässt sich der<br />
Spiegelcharakter des Absorptions- <strong>und</strong> des Emissionsspektrums begründen. 176 Die<br />
typisch breiten Emissionsbanden basieren wie auch in der Absorptionsspektroskopie<br />
darauf, dass sich die Gesamtenergie, die in Form <strong>von</strong> Licht unterschiedlicher<br />
Wellenlänge frei wird, aus der Summe der elektronischen, vibratorischen <strong>und</strong><br />
rotatorischen Beiträgen zusammensetzt. Die Differenz zwischen dem Maximum der<br />
Anregungs- <strong>und</strong> Emissionswellenlänge wird als Stokessche Verschiebung (Stokes<br />
shift) bezeichnet.<br />
S 2<br />
S 1<br />
S 0<br />
Absorption <strong>von</strong> Licht<br />
(Erzeugung angeregter Zustände)<br />
Emission <strong>von</strong> Licht (Fluoreszenz)<br />
Strahlungslose Deaktivierung<br />
aktivierter Zustände<br />
Energieniveaus mit verschiedenen<br />
Schwingungsniveaus<br />
S 0 Gr<strong>und</strong>zustand<br />
S 1 erster angeregter Zustand<br />
S 2 zweiter angeregter Zustand<br />
Abb. 33 Prinzip der Fluoreszenz anhand des Jablonski-Termschemas (modifiziert nach Rücker et al.,<br />
1992 177 ).<br />
Wechseln die Elektronen vom niedrigsten Energieniveau des angeregten Zustandes<br />
S1 unter Spinumkehr in einen energetisch niedriger liegenden Triplett-Zustand<br />
(intersystem crossing) <strong>und</strong> fallen dann unter Lichtemission wieder in den Singulett-<br />
Gr<strong>und</strong>zustand S0 <strong>zur</strong>ück, spricht man <strong>von</strong> Phosphoreszenz. Fluoreszenz <strong>und</strong><br />
Phosphoreszenz werden aufgr<strong>und</strong> der Ausstrahlung <strong>von</strong> Licht unter dem Oberbegriff<br />
Lumineszenz zusammengefasst.<br />
Fluoreszenz tritt nur während oder unmittelbar nach der Anregung des<br />
Elektronensystems auf. Die Emission <strong>von</strong> Fluoreszenzlicht ist aufgr<strong>und</strong> der<br />
Schnelligkeit des ohne Spin-Umkehr verlaufenden Elektronenübergangs (10 -7 -10 -9 s;<br />
S1 zu S0) im Prinzip mit der Lichteinstrahlung beendet, da die Absorption eines