Untersuchungen zur Anwendbarkeit und Validität von In-vitro ...

II Ergebnisse und Diskussion 131
Während 19 der 54 mit der Fluoreszenzmethode erhaltenen IC50-Werte (ca. 35 %)
mit denen der LC/MS-Methoden übereinstimmten, lagen 39 % der fluorimetrisch
bestimmten IC50-Werte niedriger und 24 % höher als die Werte der
Referenzmethoden. Lediglich der IC50-Wert für den Ginkgo-Extrakt und CYP3A4
(Ethoxyresorufin) konnte aufgrund einer Zunahme der Fluoreszenzintensität
(Anhang VI.2) mit steigender Extraktkonzentration nicht bestimmt werden. Am
meisten übereinstimmende IC50-Werte zeigten die Extrakte aus Orthosiphonblättern,
Salbeiblättern und Schöllkraut. Die IC50-Werte der Ginkgoblätter dagegen stimmten
nur für CYP2C8 überein. Im Gegensatz zu den schwach inhibitorisch aktiven
Pflanzenextrakten resultierten jedoch für alle stark inhibitorisch aktiven
Pflanzenextrakte lediglich geringe bis moderate Abweichungen der IC50-Werte. Die
Gründe hierfür werden unter II.5.4 ausführlich dargelegt.
5.2.3 Zusammenfassung der Ergebnisse
Sowohl die fluorimetrisch bestimmten IC50-Werte der inhibitorisch schwach als auch
stark aktiven Pflanzenextrakte zeigten im Vergleich zur Referenzmethode
Abweichungen. 46 bzw. 39 % der IC50-Werte der Pflanzenextrakte mit geringer bzw.
starker inhibitorischer Aktivität lagen niedriger als die Referenzwerte (Tab. 21), wobei
überwiegend eine 2- bis 4-fache Abweichung resultierte (Tab. 19, Tab. 20). Bei den
inhibitorisch schwach aktiven Pflanzenextrakten lagen etwa 10 % der IC50-Werte
sogar um das 4- bis 8-fache niedriger. Bei etwa 23 bzw. 24 % der inhibitorisch
schwach bzw. stark aktiven Pflanzenextrakte wurden im Vergleich zur
Referenzmethode fast ausschließlich um den Faktor 2-4 höhere IC50-Werte für die
inhibitorisch schwach bzw. stark aktiven Pflanzenextrakte bestimmt (Tab. 21). Eine
Übereinstimmung der IC50-Werte war bei lediglich 22 % der schwachen Inhibitoren
und bei 35 % der starken Inhibitoren zu beobachten, so dass eine relativ schwache
Korrelation der mit LC/MS und Fluoreszenz erhaltenen IC50-Werte bestand. Diese
Tatsache lässt vermuten, dass Quenching- und Eigenfluoreszenz-Effekte der
Pflanzenextrakte die Ergebnisse der inhibitorischen Aktivität bei Mikrotiterplattenbasierten
Fluoreszenz-Methoden beeinflussen.