Skript

MAßNAHMEN ZUR ABTÖTUNG ODER ENTFERNUNG VON
MIKROORGANISMEN
Je nach Anwendungsbereich werden folgende Begriffe benutzt:
Sterilisation, Tyndallisation, Pasteurisieren, Kurzzeiterhitzen, Hocherhitzen,
Entkeimung, Desinfektion.
Wenn im folgenden die wichtigsten Sterilisationsmethoden beschrieben werden, so
bedeutet das keineswegs, daß bei deren Anwendung in jedem Fall eine absolute
Keimfreiheit erreicht wird. Die Methode richtet sich stets nach den Bedingungen, die
man an den Versuch stellt. Für viele Zwecke genügt eine Teilentkeimung, z.B. die
Abtötung der vegetativen Zellen.
1. Sterilisation:
Definition: Sterilisation heißt Abtötung oder Inaktivierung der Organismen
durch Heißluft, feuchte Hitze, Bestrahlung und chemische Mittel.
1.1 Das Abflammen ist die häufigste Schnellsterilisationsmethode für Impfösen,
Pinzetten u.ä.
1.2 Heißluftsterilisation:
Die Sterilisation durch trockene Heißluft wird für hitzeunempfindliche
Gegenstände wie Glas angewendet. Die Gefäße werden mit Alufolie o.ä.
verschlossen. Um eine Reinfektion zu verhindern, werden Pipetten in
Pipettenbüchsen sterilisiert. Minimale Sterilisationszeit: 90 min bei 180°C
1.3 Sterilisation durch feuchte Hitze:
Sterilisation durch feuchte Hitze wird für Nährlösungen, Textilien u.ä.
angewendet. Sie kann erfolgen im strömenden, gesättigten luftfreien
Wasserdampf, im offenen oder geschlossenem System unter Druck, wenn
die Temperatur über dem Siedepunkt liegen soll.
Die vegetativen Zellen von Bakterien und Pilzen werden bei einer
Temperatur von 60°C innerhalb von 5-10 min abgetötet. Sporen dagegen
bei 120°C innerhalb von 20 min.
1.3.1 Fraktionierte Sterilisation (Tyndallisation)
Definition: Tyndallisation heißt fraktioniertes Erhitzen an drei
aufeinanderfolgenden Tagen je 30 min bei 100°C. In der Zwischenzeit
werden die Lösungen bebrütet. Eventuell vorhandene Sporen keimen aus
und werden beim darauf folgenden Erhitzen abgetötet. Diese Methode kann
für Substrate (z.B. Nährmedien) angewendet werden, in denen Sporen
auskeimen können.
Teilentkeimung durch Hitze:
1.3.2 Pasteurisieren: 5-10 min bei 75°C
1.3.3 Kurzzeiterhitzen: 20 sec bei 71-74°C
1.3.4 Hocherhitzen: 2-5 sec bei 85-87°C
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