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PROTOKOLL: Nährstoffbedarf von Aspergillus niger Abgabetermin: ________ Name : __________________ Versuchsbeginn : __________________ Versuchsende: ________ Beschreibung des Pilzwachstums : Mycel : + - Sporenbildung : + - CZAPEK-DOX-LÖSUNG: MYCEL SPORENBILDUNG vollständig mit Spurenelementlsg. vollständig ohne Saccharose ohne N ohne K ohne PO 4 ohne Mg ohne Fe ohne Na ohne SO 4 31
NACHWEIS DER WIRKUNG VON HEMMSTOFFEN AUF DAS WACHSTUM VON MIKROORGANISMEN Viele Stoffe verhindern das Wachstum von Mikroorganismen. Der Wirkungsmechanismus ist teilweise unspezifisch oder wenig bekannt. Bei vielen Hemmstoffen bestehen jedoch Vorstellungen über die Wirkungsweise. Wirkungsweise und Beispiele für antimikrobiell wirksame Mittel: I. Zerstörung oder Veränderung der Zellstruktur a) Zerstörung wichtiger Zellbestandteile (z.B. Eiweißdenaturierung durch Alkohol) b) Zerstörung der Zellwand (z.B. durch Lysozym) c) Störung der Funktion der Cytoplasmamembran z.B. durch Phenol und Kresole, kationische Detergentien (z.B. Cetylpyridiniumchlorid), anionische Detergentien (z.B. Seife, Na-tetradecylsulfat), Antibiotica (z.B. Polymyxin E), manche Farbstoffe usw. d) Verbindungen von Nukleinsäuren z.B. mit basischen Farbstoffen wie Akriflavin, Gentianaviolett II. Störung des Energiestoffwechsels a) Reaktion mit Proteinen und Enzymaktivierung durch Schwermetalle b) Reaktion mit der prosthetischen Gruppe von Enzymen z.B. Cyanid c) Competitive Hemmung durch CO d) Verhinderung der oxidativen Phosphorylierung z.B. durch 2,4-Dinitrophenol III. Störung von Biosynthese und Wachstum a) Verhinderung der normalen Proteinsynthese z.B. durch Aminosäureanaloge wie 5-Methyltryptophan, p-Fluorphenylalanin b) Verhinderung der normalen Nukleinsäuresynthese z.B. durch Purin- und Pyrimidinanaloge wie 6-Mercaptopurin, 5-Bromuracil, Mitomycin C (ein Antibiotikum, das die DNS-Synthese stört) c) Hemmung der Coenzymsynthese z.B. durch Sulfanilamid d) Hemmung der Zellwandsynthese z.B. durch Penicillin Um die Wirkung einer Substanz auf das Wachstum von Mikroorganismen zu prüfen, werden für die qualitative Untersuchung die auxanographische Methode, für die quantitative Untersuchung die Hemmstoff-Verdünnungsreihe angewendet. Das Prinzip beider Methoden, die in vielfacher Hinsicht variiert werden können, soll unter Verwendung von Saccharomyces cerevisiae und Bacillus sp. demonstriert werden. 32
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