Skript

MIKROSKOPISCHE GRÖßENMESSUNG VON HEFEZELLEN
In der Mikrobiologie gebräuchliche Längenmaße:
1 μ = Mikrometer (Mikron) = 10 -3 mm
1 nm = Nanometer (Millimikron) = 10 -6 mm
1 Ä = Angström = 10 -7 mm
Einige Größenbeispiele:
Pflanzenzelle ca.
∅ 50 μ
Saccharomyces cerevisiae 4-8 x 5-10,5 μ
Staphylococcus albus ∅ 1 μ
Serratia marcescens 0,5-1,0 x 0,5 μ
Tabakmosaik-Virus 300 x 15 nm
Poliomyelitis-Virus ∅ 28 nm
Serumalbumin
∅ 5,6 nm
Größenmessungen an mikroskopischen Objekten unter dem Mikroskop sind mit
Hilfe eines Okularmikrometers möglich. Ein Okularmikrometer ist ein Glasplättchen
mit einer in 100 Teilstriche geteilten Skala, die in einem Meßokular anstelle der
Gesichtsfeldblende angebracht ist. Mit dieser Skala des Okulars wird wie mit einem
Lineal ausgemessen, wie vielen Skalenteilen die Länge einer Hefezelle entspricht.
Für jede Kombination von Objektiv und Okular muß berechnet werden, welche
absoluten Länge ein Skalenteil des Okularmikrometers entspricht. Dafür wird als
„echter Maßstab“ ein Objektmikrometer benutzt. Dies ist eine Skala von genau 2
mm Länge, die in 200 Teile unterteilt ist.
Durchführung:
1. Das Okular wird durch ein Meßokular ersetzt. Nach Einschaltung der
Beleuchtung wird das Meßokular durch Drehen der oberen Linse auf das
Okularmikrometer scharf eingestellt. Für die Eichung und das Messen der
Hefezellen wird ein Objektiv mit 40-facher Vergrößerung verwendet.
2. Eichung des Okularmikrometers: Der das Objektmikrometer enthaltende
Objektträger wird auf den Objekttisch des Mikroskops gelegt und die Skala in den
Strahlengang des Mikroskops gebracht. Mit Grob- und Feintrieb wird die Skala des
Objektmikrometers scharf eingestellt. Nun werden durch vorsichtiges Verschieben
des Objektmikrometers und durch Drehen des Meßokulars die beiden Skalen so
verschoben, daß sie parallel und dicht nebeneinander erscheinen (siehe Abb. A). In
dem Beispiel entsprechen 100 Skalenteilen des Okularmikrometers 38 Skalenteilen
(= 0,38 mm) des Objektmikrometers. Ein Skalenteil des Okularmikrometers
entspricht also 0,0038 mm = 3,8 μ. Dieser Wert für 1 Skalenteil des
Okularmikrometers heißt Mikrometerwert. Für die folgenden Messungen muß die
Anzahl der Skalenwerte, die das zu messende Objekt einnimmt, mit dem
Mikrometerwert multipliziert werden.
3. Es wird eine Hefesuspension der Verdünnungsstufe 10 -2 hergestellt. Dazu wird 1
g Bäckerhefe in 100 ml dest. Wasser suspendiert.
4. Von dieser Suspension wird mit einem Glasstab ein kleiner Tropfen auf einen
Objektträger getupft und mit einem Deckglas abgedeckt.
5. Das Hefepräparat wird im Mikroskop eingestellt und entsprechend Abb. B mit
dem Okularmikrometer ausgemessen, beziehungsweise bei Zwischenwerten
geschätzt wie vielen Skalenteilen Länge und Breite einer Hefezelle entsprechen.
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