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S30 42. Jahrestagung der Deutschen Diabetes-Gesellschaft | Hamburg, 16. – 19. Mai 2007 P93 Studie zur induzierten Wundheilung durch Applikation expandierter autologer Knochenmark-Stammzellen bei Diabetikern mit Ischämie-bedingten chronischen Gewebesulzera der unteren Gliedmaße Kirana S 1 , Stratmann B 1 , Lammers D 1 , Minartz P 1 , Quast T 1 , Negrean M 1 , Stirban A 1 , Petrule S 1 , Gastens M 2 , Goetting C 2 , Prohaska W 2 , Körperich H 3 , Kleesiek K 2 , Tschöpe D 1 1 Herz- und Diabeteszentrum NRW, Diabeteszentrum, Bad Oeynhausen, Germany, 2 Herz- und Diabeteszentrum NRW, Institut für Laboratoriums- und Transfusionsmedizin, Bad Oeynhausen, Germany, 3 Herz- und Diabeteszentrum NRW, Institut für Radiologie, Nuklearmedizin und Molekulare Bildgebung, Bad Oeynhausen, Germany Fragestellung: Die periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK) spielt bei der Pathogenese eines diabetischen Fußsyndroms (DFS), das zu einer Majoramputation führt, eine entscheidende Rolle. Interventive und operative Revaskularisation ermöglichen eine signifikante Senkung der Rate der Majoramputationen. Leider können diese Therapieverfahren nur bei etwa 60% aller Patienten mit einer kritischen Ischämie durchgeführt werden. Die Applikation expandierter autologer Knochenmarkstammzellen stellt möglicherweise eine neue Therapieoption bei nicht-revaskularisierbarer pAVK dar. Methoden: Bisher wurden 9 DFS Patienten mit kritischer Extremitätenischämie ohne Revaskularisationsmöglichkeit (chirurgischer oder interventioneller Eingriff) in die Studie eingeschlossen. Es wurden jeweils 40 ml Knochenmark entnommen. Nach Aufbereitung des Aspirates wurden die Knochenmarkstammzellen (KM) oder die expandierten Knochenmarkstammzellen und Progenitorzellen (TRC) intramuskulär am ipsilateralen M. Gastrocnemius oder intraarteriell in die ipsilaterale A. femoralis superficialis injiziert. Ergebnisse: Tendenziell zeigte sich in den Verumgruppen im Verlauf eine Verbesserung der Mikrozirkulation (reaktive Hyperämie, gemessen durch Laser Doppler (LD) Diagnostik und kernspintomographisch durch Blood Oxygen Level Dependency (BOLD-MRT)) sowie die als primäres Prüfziel definierte komplette Abheilung der Wunde in weniger als 50 Wochen, unabhängig von der Applikationsmethode. Bisher sind keine relevanten therapiebedingten Komplikationen aufgetreten und keine Majoramputationen durchgeführt worden. Schlussfolgerung: Die Therapie mit autologen Knochenmarkstammzellen bei DFS Patienten mit kritischer Extremitätenischämie, unabhängig von der Applikationsmethode, ist eine komplikationsarme Therapie. Die Ergebnisse nach 1 Jahr deuten auf eine tendenzielle Verbesserung der Mikrozirkulation hin und zeigen eine vollständige Abheilung der Fußläsion. P94 Depression und Typ 2 Diabetes bei Hausarztpatienten: Ergebnisse der DETECT Studie Dirmaier J 1 , Watzke B 1 , Koch U 1 , Wittchen HU 2 , Schulz H 1 1 Universitätsklinikum Hamburg-Eppendorf, Institut und Poliklinik für Medizinische Psychologie, Hamburg, Germany, 2 Technische Universität Dresden, Institut für Klinische Psychologie und Psychotherapie, Dresden, Germany Hintergrund: In der Behandlung von Patienten mit Typ 2 Diabetes in der allgemeinärztlichen Versorgung treten als Folge eines hohen Anteils an Patienten mit Depression verschiedene Problembereiche zutage: Häufig wird die Depression nicht erkannt, nicht adäquat behandelt und führt zu Beeinträchtigungen im Alltag sowie zu Komplikationen im Rahmen der somatischen Behandlung. Studien weisen u.a. darauf hin, dass Depressivität zu Beeinträchtigungen der Compliance führen kann. Eine Analyse der Zusammenhänge zwischen Depression und Typ 2 Diabetes kann Erkenntnisse für eine Optimierung der Versorgung liefern, insbesondere da in der hausärztlichen Versorgung in Deutschland hierzu bislang nur wenige Befunde vorliegen. Ziele: Es soll untersucht werden, in welchem Umfang sich Depression negativ auf verschiedene Faktoren der Compliance auswirkt und welche weiteren Variablen ebenfalls zu Beeinträchtigungen der Compliance führen. Als weiterführende Fragestellung wird geprüft, in welchem Ausmaß ein Zusammenhang zwischen Depression und der Kontrolle des Blutzuckers besteht und ob dieser Zusammenhang durch Faktoren der Compliance moderiert wird. Methode: Die Analysen basieren auf Daten einer vom Institut für Klinische Psychologie und Psychotherapie der Technischen Universität Dresden in Zusammenarbeit mit dem Max-Planck-Institut für Psychiatrie München durchgeführten bundesweiten versorgungsepidemiologischen Stichtags-Studie (DETECT-Studie; www.detect-studie.de). In Rahmen einer Querschnittsstudie wurde von 55.518 Patienten mittels eines Diabetologie & Stoffwechsel 2007; 2: S1–S136 Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York · ISSN 1861-9002 Arztbogens u.a. das Diagnose- und Behandlungsprofil von 3.188 Allgemeinärzten dokumentiert. Gleichzeitig haben alle 55.518 Patienten einen Fragebogen u. a. zu ihren soziodemographischen Daten und ihrem Gesundheitszustand ausgefüllt. Ergebnisse: Bei insgesamt 6585 (11,9%) der Patienten wurde von ärztlicher Seite ein gesicherter Typ 2 Diabetes diagnostiziert. Bei gleichzeitiger Depressivität zeigen sich signifikant erhöhte Odds Ratios (OR) sowohl für Non-Compliance bezüglich der Einnahme von Medikamenten wie auch für Non-Compliance hinsichtlich Aspekten der gesundheitsfördernden Lebensführung. Ebenso zeigt sich eine signifikant erhöhte OR für eine schlechtere Kontrolle des Blutzuckers (erhoben über das HbA1c, Laborwerte aus Akte). In weiteren Analysen ließ sich kein signifikanter Moderatoreffekt der Compliance begzüglich des Zusammenhangs zwischen Depressivität und der Blutzuckerkontrolle nachweisen. Schlussfolgerungen: Depressivität bei Typ 2 Diabetes Patienten in der primärärztlichen Versorgung ist verbunden mit Problemen bezüglich der Umsetzung von ärztlichen Behandlungsempfehlungen und es bestehen zudem Zusammenhänge mit einer schlechteren Blutzuckerkontrolle. Die Notwendigkeit einer u. a. stärker psychologisch orientierten Behandlung für eine Verbesserung der Versorgung dieser Patientengruppe wird dadurch unterstrichen. *Förderung: unrestricted educational grant der Pfizer GmbH, Karlsruhe an die TU-Dresden (Prof. Wittchen) P95 Ang-2 Defizienz verursacht retinale Gefäßmalformation Feng Y 1 , vom Hagen F 1 , Schreiter K 2 , Heiser C 3 , Schilling L 3 , Deutsch U 4 , Hammes HP 1 1 V. Medizinische Klinik, Universitätsklinikum Mannheim, Universität Heidelberg, Mannheim, Germany, 2 DeveloGen AG., Göttingen, Germany, 3 Neurochirurgische Klinik, Universitätsklinikum Mannheim, Universität Heidelberg, Mannheim, Germany, 4 Theodor Kocher Institut, Universität Bern, Bern, Switzerland Ziel: Ang-2 spielt sowohl in der physiologischen als auch in der pathologischen Angiogenese eine wichtige Rolle. Leider sind die genauen Funktionen von Ang-2 in der normalen Gefäßentwicklung bisher noch nicht klar. Diese Studie untersuchte den genauen Defekt des retinalen Gefäßnetzes bei Deletion von Ang-2 (Ang2LacZ Maus). Methoden: Die Experimente wurden an homozygoten Ang2LacZ und Wildtyp Mäusen im 2. Lebensmonat durchgeführt. Die Histologie der Retina erfolgte durch PAS Färbung der Paraffinschnitte. Die Entwicklung der retinalen Gefäße wurde in Retinadigestionspräparaten analysiert. Die Expression von Ang-2 in den Retinagefäßen der Ang2lacZ Mäuse wurde durch die Färbung des Reporter-Gens detektiert. Die retinale Regulation von Ang-1 und VEGF mRNA wurde durch quantitative PCR gemessen. Mittels Hypoxyprobe wurde die Hypoxie in der Retina analysiert. Die Aktivierung von Müllerzellen wurde durch Immunfluoreszenz-Färbung mit dem zellspezifisch Marker GFAP bestimmt. Ergebnisse: Im Vergleich zu den Wildtypen hatten die homozygoten Ang2LacZ Mäuse präretinale Gefäße, während in der Peripherie die intraretinalen Gefäße fehlten. Diese war mit einer retinalen Atrophie assoziiert. In der Retinadigestion offenbarte sich ein stark reduziertes Auswachsen sowohl der Arteriolen als auch der Venolen. Morphologisch waren die Malformationen durch starke Schlängelung als auch durch Mikroaneurysmen charakterisiert. Ang-2 war in den Mikroaneurysmen und in den Endothelzellen auf einigen Sprossen exprimiert. Die Expression von Ang-1 mRNA war um 45% reduziert, während die VEGF Expression um 126% erhöht war. In der Peripherie waren Hypoxie und Gliareaktion (GFAP) nachweisbar. Schlussfolgerung: Die Daten unserer Studie zeigten 1. die Abhängigkeit einer ungestörten, vollständigen Gefäßentwicklung von Ang-2, 2. den antagonistischen Effekt von Ang-1 und Ang-2 in der Gefäßentwicklung, 3. die Hypoxie-induzierte VEGF Expression und Glia-Aktivierung und 4. eine mögliche Ang-2 Expression in den Endothelzellen unter Hypoxie in der Ang-2 defizienten Retina. P96 Unterschiedliche Anämieprävalenz bei niereninsuffizienten Diabetikern mit und ohne Albuminurie Karakalpakis I 1 , Hasslacher C 1 1 St. Josefskrankenhaus Heidelberg, Innere Medizin, Heidelberg, Germany Einleitung: Diabetiker mit eingeschränkter Nierenfunktion, d. h. Kreatinin-Clearance < 90 ml/min, weisen eine erhöhte cardiovasculäre Mortalität und Morbidität auf. Ein Risikofaktor ist dabei die schon bei geringer
Nierenfunktionseinschränkung nachweisbare Anämie. Da die Genese der Nephropathie bei Diabetikern unterschiedlich sein kann (mit Albuminurie = vorwiegend diabetisch, ohne Albuminurie = vorwiegend ischämisch bedingt) untersuchten wir die Prävalenz der Anämie bei Diabetikern mit und ohne Albuminurie. Methodik: Bei 227 Diabetikern (39 Typ 1 und 188 Typ 2 Diabetiker) mit eingeschränkter Nierenfunktion (100 Männer, 127 Frauen),die sich in den Jahren 2000 bis 2003 ambulant vorgestellt haben, wurden folgende Parameter untersucht: a) Hämoglobinspiegel (Hb) und die Prävalenz einer Anämie (Def.: bei Männern Hb< 13 g/dl, bei Frauen < 12 g/dl) b) errechnete Kreatinin-Clearance nach Cockgroft (CCL), c) Albuminausscheidung im Urin, d) Stoffwechseleinstellung (HbA1c), e) Gabe von ACE-Hemmern bzw. AT-Blocker. Ergebnisse: Von den 227 Pat. wiesen 60 eine Albuminurie, 167 keine erhöhte Albuminausscheidung auf. Zwischen beiden Gruppen bestand kein signifikanter Unterschied hinsichtlich Alter, durchschnittlicher Krea-Clearance und HbA1c. Pat. ohne Alb. wiesen einen höheren Anteil an Frauen (61,7% vs. 40%) auf, hatten eine kürzere Diabetesdauer (13,9 vs. 17,3 Jahre) und nahmen seltener ACE-Hemmer/AT-Blocker ein (48,5% vs. 60%). Bei Pat. mit Alb.urie betrug der mittlere Hb-wert 13,02 g/dl, bei den Männern 13,49 g/dl, bei den Frauen 12,31 g/dl. Bei den Pat. ohne Alb.urie betrug der mittlere Hb-Wert 13,65 g/dl (Männer 14,21 g/dl, Frauen 13,3 g/dl). Die Anämieprävalenz lag bei den Pat. mit Alb.urie bei 35% (30,6% bei den Männern, 41,7% bei den Frauen), bei den Pat. ohne Alb.urie bei 10,2% (9,38 g% bei den Männern, 10,68% bei den Frauen). Mit abnehmender Nierenfunktion nahm die Anämieprävalenz in beiden Gruppen zu: 27,5% bei den Pat. mit Alb. und 8,51% bei den Pat. ohne Alb. bei CCL 60 – 89 ml/min, 47,06% bei den Pat. mit Alb. und 18,52% bei den Pat. ohne Alb. bei CCL 30 – 59 ml/min.. Dabei nahm erwartungsgemäß der mittlere Hb-spiegel ab: 13,17 g/dl bei den Pat. mit Alb. und 13,71 g/dl bei den Pat. ohne Alb. bei CCL 60 – 89 ml/min, 12,78 g/dl bei den Pat. mit Alb. und 13,32 g/dl bei den Pat. ohne Alb. bei CCL 30 – 59 ml/min..Bezüglich der Güte der Stoffwechseleinstellung und der Einnahme von ACE-Hemmern/AT-Blocker bestand zw. Pat. mit und ohne Anämie kein signifikanter Unterschied. Schlussfolgerung: Die Studie zeigt, dass der überwiegende Anteil der Diabetiker mit eingeschränkter Nierenfunktion keine Albuminurie aufwies, was für einen hohen Anteil an hypertensiv-ischämischer Nierenschädigung spricht. Die unterschiedliche Genese der Nierenfunktionsstörung ist mit einer unterschiedllichen Anämieprävalenz assoziert, möglicherw. spielt eine unterschiedliche Ausprägung tubulärer Schädigungen eine Rolle. Die Befunde unterstreichen die Heterogenität der Nephropathie bei Diabetikern. P97 Charakterisierung einer neuen transgenen Ratten Linie mit retinaler Vasoregression Stock O 1 , Pfister F 1 , Tanimoto N 2 , Hoffmann S 3 , Seeliger M 2 , Gretz N 3 , Feng Y 1 , Hammes HP 1 1 V. Medizinische Klinik, Universitätsklinikum Mannheim, Universität Heidelberg., Mannheim, Germany, 2 Abteilung II, Augenklinik der Universität Tübingen., Tübingen, Germany, 3 ZMF, Universitätsklinikum Mannheim, Universität Heidelberg, Mannheim, Germany Ziel: Unsere Vorarbeiten zeigen, dass das mutierte Zillien-assozierte Gen retinale Degeneration hervorruft. Unsere Studie charakterisierte diese neue transgene Ratten-Linie (TGR) in Bezug auf retinale Neurodegeneration und Vasoregression. Methoden: Die Studie wurde bei TGR und SD Ratten in den Lebensmonaten 1, 2, 3, 5 und 7 durchgeführt. Morphologische ¾nderungen wurden mit PAS gefärbten Paraffinschnitten analysiert. Die Vasoregression wurde anhand von Retinadegestionspräparaten festgestellt. Durch Elektroretinogramm (ERG) wurde Netzhautfunktion ermittelt. Ergebnisse: Die Analysen der morphologischen ¾nderungen zeigten, dass die Zellzahl und die Dicke der äußeren Körnerschicht (ONL) die Retinadegeneration in diesem Model gut darstellten. Sowohl die Zellzahl als auch die Dicke der ONL reduzierte sich signifikant in den SD Ratten während des Alterungsprozesses von 1. bis 7. Monat. Im Vergleich zu den SD Ratten hatten die TGR Rattenretinae im 1. Monat nicht nur eine geringere Zellzahl (31% Reduktion) in der ONL, sondern auch eine verminderte Dicke (24%) der ONL. Zu diesem Zeitpunkt zeigten SD und TGR Ratten die gleichen Antworten im ERG. Die Zellzahl der ONL in den TGR Ratten nahm im 2. Lebensmonat signifikant ab und auch eine geringere Antwort im ERG wurde beobachtet. Die Retinadicke der TGR Ratten im 3. Lebensmonat zeigte eine stärkere Degeneration im Vergleich zu den SD Ratten. Außerdem fehlte eine Antwort im ERG. Diese Defekte verstärkten sich nach 3, 5 und 7 Monaten. Im 1. Lebensmonat zeigten die Retinae von SD und TGR Ratten keinen Unterschied in Bezug auf azelluläre Kapillare (Vasoregression). Im 2. Lebensmonat gab es in den TGR Rattenretinae signifikant vermehrte azel- 42. Jahrestagung der Deutschen Diabetes-Gesellschaft | Hamburg, 16. – 19. Mai 2007 luläre Kapillare (100%). Ebenso wie bei der Zellzahl und Dicke verstärkte sich die Signifikanz der Bildung der azellulären Kapillaren zu den Zeitpunkten 3, 5 und 7 Monaten. Schlussfolgerung: Diese transgenen Ratten zeigen eine signifikante primäre Neurodegeneration und sekundäre Vasoregression und eine entsprechende retinale Funktionsstörung bereits im 2. Lebensmonat. Folgeerkrankungen 3 P98 Verminderte Glyoxalase-1 Aktivität in Patienten mit schmerzhaften diabetischen Neuropathie Konrade I 1 , Skapare E 1 , Dambrova M 1 , Lejnieks A 1 , Stoyanov SB 2 , Haag GM 2 , Humpert PM 2 , Nawroth PP 2 , Bierhaus A 2 1 Stradins Universität Riga, Riga, Latvia, 2 Universität Heidelberg, Medizinische Klinik I, Heidelberg, Germany Ziele: Die Akkumulation von Advanced Glycation Endproducts (AGEs) im Gewebe von Patienten mit Diabetes mellitus (DM) gilt als eine mögliche Ursache für die Entstehung diabetischer Spätschäden. Da zahlreiche AGEs aus Dicarbonylverbindungen wie Methylglyoxal (MG) gebildet werden können, stellt das intrazelluläre Glyoxalasesystem, das MG und andere a-Oxoaldehyde detoxifizieren kann, einen wichtigen Abwehrmechanismus dar. In eigenen Vorarbeiten konnten wir nachweisen, dass Hyperglykämie die Glyoxalase-1 (GO-1)- Transkription, Expression und Aktivität in vitro und in experimentellen Diabetes-Modellen mindert und das Schmerzempfinden insbesondere in frühen Phasen der diabetischen Neuropathie steigert. Daher untersuchten wir das Ausmaß der GO-1-Aktivität in Patienten mit Diabetes Typ-1 und Typ-2 und schmerzhafter diabetischer Polyeuropathie. Methoden: GO-1-Aktivität wurde in Patienten mit Typ1-DM (n = 13, Frauen 7, Alter 37 € 9, HbA1c: 8,6 € 1,8%, Nichtraucher) und Typ 2- DM (n = 25, 15 Frauen, Alter 54 € 10,7, HbA1c: 8,16 € 1,6%, Nichtraucher) mit bestätigter sensomotorischer Polyneuropathie (klinisch-neurologisch und elektroneurometrisch), sowie in einer Kontrollgruppe ohne DM (n = 18, Frauen 12, Alter 49 € 9, HbA1c: 4,9 € 0,4%, Nichtraucher) untersucht. GO-1-Aktivität wurde im Vollblut mittels eines spektrophotometrischem Enzym-Assays untersucht; daneben wurden metabolische Standart-Parameter und neuropathischer Schmerz mit einer 0 – 10 Punkte-Skala bestimmt. Werte > 4 Punkte wurden als Symptomatik einer mäßigen schmerzhaften Neuropathie definiert. Ergebnisse: Die GO-1 Aktivität der Typ 1-DM-Patienten korreliert (R2 = 0,31) mit aktuellen Nüchtern-Blutglukose-Werten, aber nicht mit dem HbA1c-Wert, der Diabetes-Dauer, dem BMI oder dem Lipidstatus. In den Subgruppen der Typ 1- und Typ 2- DM-Patienten mit schmerzhafter Polyneuropathie (n = 7 und n = 12 respektiv) wurden deutlich niedrigere GO-1 Aktivität als in den Subgruppen ohne schmerzhaften diabetische Polyneuropathie gefunden: Median 6,31 € 1,12 mmol/min/ml vs. 8,23 € 1,2 mmol/min/ml; p = 0,023 bei Typ 1-Diabetikern und 6,91 € 1,01 mmol/min/ml vs. 7,92 € 1,1 mmol/min/ml; p = 0,024 bei Typ 2-Diabetikern. Patienten ohne schmerzhafte diabetische Polyneuropathie weisen die gleiche GO-1 Aktivität wie die nicht diabetische Kontrollgruppe auf (7,73 € 1,1 mmol/min/ml vs. 8,07 € 1,18 mmol/min/ml; p = 0,96). Zusammenfassung: Patienten mit schmerzhafter Polyneuropathie weisen erniedrigte Spiegel des detoxifizierenden Enzyms GO-1 auf. Dies ist ein erster Hinweis, dass das Ausmaß der GO-1- Aktivität einen möglichen Marker für die schmerzhafte diabetische Neuropathie darstellen könnte. P99 RAGE-dependent glyoxalase-1 impairment mediates functional deficits in diabetic neuropathy Stoyanov SB 1 , Konrade I 1 , Haag GM 1 , Lukic IK 1 , Humpert PM 1 , Rabbani N 2 , Thornalley P 2 , Nawroth PP 1 , Bierhaus A 1 1 UniversitätsKlinikum Heidelberg, Innere Medizin I, Heidelberg, Germany, 2 University of Warwick, Warwick Medical school, Warwick, United Kingdom Introduction: Glycation of proteins, nucleotides and phospholipids contributes to the development of late diabetic complications at least in part via interaction with their cellular receptor RAGE. Reactive intermediates of AGE formation such as glyoxal, methylglyoxal (MG) and other dicarbonyl compounds are detoxified by the glyoxalase-system. Since RAGE-/– mice are partly protected from late diabetic complications including diabetic neuropathy (DN), we studied the expression of the AGE-detoxifying enzyme glyoxalase-1 (GO1) in peripheral nerves Diabetologie & Stoffwechsel 2007; 2: S1–S136 Georg Thieme Verlag KG Stuttgart · New York · ISSN 1861-9002 S31
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