ABI real-time PCRææ¯è®²åº§(.pdf)
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标 准 品<br />
●<br />
目 的 : 生 成 标 准 曲 线 , 建 立 CT 值 与 浓 度 之 间 的 线 性 关 系<br />
● 要 求 :<br />
– 浓 度 已 知<br />
– 5 点 以 上<br />
– 标 准 品 与 待 测 样 品 的 PCR 效 率 一 致 , 且 接 近 100%<br />
• 仪 器 质 量 一 致<br />
• 试 剂 质 量 一 致 : 模 板 纯 度 、 引 物 和 探 针 的 Tm 值 、 酶 活 性 、 缓 冲 液 成 分<br />
• 反 应 条 件 一 致 : 循 环 参 数 相 同 、 同 一 次 实 验<br />
● 不 要 求 :<br />
– 不 要 求 标 准 品 与 目 标 基 因 使 用 相 同 的 DNA<br />
– 可 以 相 同 , 也 可 以 不 同<br />
C T = - k lgX 0 + b<br />
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