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Cryptococcal Antigen Latex Agglutination System (CALAS®)

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PREPARATION DES ECHANTILLONS<br />

A. Liquide céphalo-rachidien (LCR) (Nous ne recommandons pas de prétraiter en<br />

routine les échantillons de LCR à la pronase. Cependant des données récentes<br />

14<br />

suggèrent que le traitement à la pronase d’échantillons de LCR peut être utile<br />

pour certains échantillons).<br />

1. Prélever aseptiquement les échantillons en suivant les procédures<br />

appropriées.<br />

2. Centrifuger à 1000 xg pendant 15 minutes pour assurer l’élimination des<br />

globules blancs et d’autres structures diverses.<br />

3. Aspirer avec précaution le LCR dans un conditionnement stérile et sceller.<br />

4. L’échantillon peut être traité immédiatement, réfrigéré, conservé par<br />

congélation à -20 C ou en ajoutant du thimérosal pour arriver à une<br />

concentration finale de 0,01%.<br />

5. Nous recommandons d'inactiver le LCR en le plaçant dans un bain<br />

d'eau bouillante pendant 5 minutes, avant chaque test. 7 Ceci permet<br />

de limiter les interférences non spécifiques.<br />

6. Laisser refroidir 3-4 minutes avant de tester.<br />

B. Sérum (Il est recommandé de prétraiter tous les échantillons de sérum à la<br />

pronase comme décrit ci-dessous):<br />

1. Prélever aseptiquement le sang total en suivant les procédures<br />

appropriées. L’échantillon ne doit pas contenir d’anticoagulants qui<br />

invalide le test.<br />

2. Laisser coaguler le sang pendant 10 minutes ou plus à température<br />

ambiante dans un tube de prélèvement.<br />

3. Centrifuger à 1000 xg pendant 15 minutes.<br />

4. Aspirer avec précaution le sérum dans un conditionnement stérile et<br />

sceller.<br />

5. L’échantillon peut être traité immédiatement, réfrigéré, conservé par<br />

congélation à -20 C ou en ajoutant du thimérosal pour arriver à une<br />

concentration finale de 0,01%.<br />

6. Mélanger 200 µL de sérum à 200 µL de solution de pronase.<br />

36

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