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Cryptococcal Antigen Latex Agglutination System (CALAS®)

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3. Transférer 0,25 mL du mélange du tube 1 dans le tube 2 et homogénéiser.<br />

Poursuivre la procédure de dilution jusqu’au tube marqué “5”. Transférer 0,25 mL<br />

du 5 ème tube dans un tube vide au cas où des dilutions subséquentes sont<br />

nécessaires.<br />

Tube<br />

marqué<br />

1 2 3 4 5<br />

Echantillons traités à la pronase 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64<br />

Echantillons non traités à la<br />

pronase<br />

1:2 1:4 1:8 1:16 1:32<br />

4. Etiqueter des cartes de test pour y déposer les deux séries de tests de titration<br />

avec le réactif Détection latex et le Contrôle latex.<br />

5. En commençant par le tube marqué “4”, transférer 25 µL de la dilution sur<br />

chacun des cercles marqués.<br />

6. Répéter l’étape 5 pour les tubes marqués “3” à “1”. Cette procédure permet de<br />

n’utiliser qu’un seul cône pour déposer les 4 dilutions sur les cartes de test.<br />

7. Ajouter une goutte de réactif Détection latex dans chaque cercle de la série<br />

Détection <strong>Latex</strong>.<br />

8. Ajouter une goutte de réactif Contrôle latex dans chaque cercle de la série<br />

Contrôle <strong>Latex</strong>.<br />

9. En utilisant une extrémité propre du bâtonnet d’application, mélanger doucement<br />

le contenu de chaque cercle.<br />

10. Agiter la carte manuellement, ou la placer sur un agitateur à 125 ± 25 rpm<br />

pendant 5 minutes.<br />

11. Lire les résultats immédiatement et les évaluer à l’aide de l’échelle graduée de<br />

négatif à 4+. Se reporter à la photographie de référence des réactions pour<br />

effectuer des comparaisons.<br />

39

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