Cryptococcal Antigen Latex Agglutination System (CALAS®)

4. Mettre une goutte (25 µL) de Contrôle Anticorps et de Contrôle Négatif sur les
cercles appropriés.
5. Mettre une goutte (25 µL) d’échantillon du patient sur chacun des deux cercles
marqués.
6. En tenant le flacon de Détection Latex verticalement, faire tomber une goutte
(25 µL) de réactif sur chacun des cercles marqués.
7. De manière analogue, ajouter une goutte (25 µL) de Contrôle Latex sur chacun
des cercles marqués.
8. En utilisant des bâtonnets d’application différents, mélanger le contenu des
cercles.
9. Agiter la plaque manuellement ou placer la plaque sur un agitateur à 125 ± 25
rpm pendant 5 minutes.
10. Lire les résultats immédiatement et les évaluer à l’aide de l’échelle graduée de
négatif à 4+. Se reporter à la photographie de référence des réactions pour
effectuer des comparaisons.
11. Les degrés d’intensité de la réaction sont les suivants:
Négatif (-) = suspension fine de particules sans agrégats visibles
(1+) = fines granulations sur un fond laiteux
(2+) = agrégats petits mais définis sur un fond légèrement trouble
(3+) = petits et grands agrégats sur un fond clair
(4+) = grands agrégats sur un fond très clair
Titration:
Les échantillons de patients ayant un degré 2+ ou supérieur soit avec le réactif
Détection Latex soit avec le réactif Contrôle Latex devront être titrés avec les deux
réactifs.
Préparer des dilutions sérielles en double des échantillons comme suit:
1. Transférer 0,25 mL de diluant échantillons dans chaque tube d’un série de 5
tubes marqués 1 à 5. Les tubes sont ensuite placés sur un portoir.
2. A l’aide d’une pipette propre, ajouter 0,25 mL d’échantillon patient dans le tube
marqué “1” et homogénéiser.
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