Mecanismos de transporte de nitrato, amonio y fosfato y ...

Lourdes Rubio II. Material y Métodos
Fluka nº 71732), 89,5 % de 2-nitrofenil octil eter (o-NPOE, Fluka nº 73732) y 0,5
% de tetrafenil borato de sodio (Fluka nº 72018).
El principal ión que interfiere en la medida de Na + con microelectrodos de
Na + es el K + , siendo el coeficiente de selectividad del ionóforo de Na + utilizado
respecto a K + Pot
del orden de milésimas (K NaK 0,005; Carden et al., 2001). Por
tanto, puesto que la presencia de K + podría interferir en la medida de Na + ,se
recomienda que la calibración de los microelectrodos de Na + se haga en presencia
de concentraciones fisiológicas de K + (Carden et al., 2001).
Los microelectrodos de Na + se calibraron por el método de disoluciones
mezcladas que contenían NaCl en un rango de 1 a 500 mM, en presencia de 96
mM KCl y tamponadas a pH 7,3 (10 mM MOPS-Bis Tris Propano). La señal
emitida por el microelectrodo de Na + (E) viene determinada, en mV, por el
potencial de Nernst para el Na + (ecuación 6):
E = RT
zF ln[Na + ] e
[Na + ] i
(ecuación 6)
donde R es la constante de los gases (8,31 J K -1 mol -1 ), T es la temperatura
absoluta, z es la carga (+1), F la constante de Faraday (96,5 J mol -1 mV -1 )ylos
subíndices “e”, “i” se refieren a la concentración de Na + en la solución de
calibración y en el electrolito (interior del microelectrodo), respectivamente. Por
ser fija la concentración de Na + del electrolito (500 mM NaCl) la ecuación
anterior puede rescribirse como:
E = E 0 -S log [Na + ] e (ecuación 7)
donde E 0 es el potencial del electrodo cuando la [Na + ] e =1MyS es la pendiente
en mV por cambio en un orden de magnitud de la concentración externa de Na + (1
unidad de pNa).
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