Memoria 2009 - FundaciÃ³n General de la Universidad de AlcalÃ¡

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FUNDACIÓN GENERAL DE LA UNIVERSIDAD DE ALCALÁ / MEMORIA 2009 FUNDACIÓN GENERAL DE LA UNIVERSIDAD DE ALCALÁ / MEMORIA 2009 Por último, como consecuencia de este Proyecto, se está desarrollando una Tesis Doctoral que en la actualidad se encuentra en estado de escritura para su lectura en la Universidad de Alcalá en un futuro próximo. PROYECTO DE INVESTIGACIÓN REALIZADO CON EL DR. LUIS GUIJARRO, INVESTIGADOR PRINCIPAL 1.- Mecanismo de toxicidad de la azatioprina. Papel de la autofagia induce la muerte celular pero produce la autofagia. Como hemos dicho en la introducción, la autofagia es un proceso homeostático celular que permite la degradación de proteínas y orgánulos. Este proceso está caracterizado por la fusión de los autofagosomas y lisosomas formando los llamados autofagolisosomas. Hemos mostrado que Aza aumenta la fragmentación de la proteína LC3 en los fragmentos LC3-I y LC3-II, lo cual es marcador bioquímico de la formación de los autofagosomas. En paralelo hemos estudiado y observado que Aza produce un incremento de la actividad lisosomal (detectada por tinción con naranja de acridina). Ambas observaciones sugieren que Aza induce autofagia en células HepG2. Además nuestros resultados muestran que la proteína P70S6K está claramente involucrada en el proceso autofágico inducido por Aza. - 98 - La azatioprina (Aza) es un inmunosupresor ampliamente utilizado en trasplantes y en enfermedades autoinmunes. Alrededor de un 5% de los pacientes tratados con Aza muestran hepatotoxicidad. Este efecto adverso ha sido asociado con una reducción de: i) los niveles intracelulares de glutation (GSH), ii) la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) y iii) la activación de las quinasas del estrés que producen necrosis o apoptosis, dependiendo del modelo de hepatotoxicidad estudiado. Sin embargo, no existen datos sobre el efecto de Aza en la autofagia. Nuestro estudio ha sido diseñado para caracterizar este punto y el mecanismo molecular involucrado. La autofagia es un proceso celular, en eucariotas, que se caracteriza por la acumulación de vacuolas, llamadas autofagosomas, en el citoplasma de las células; y que constituye un mecanismo degradativo o de auto digestión de proteínas u orgánulos anómalos que podrían conllevar la aparición de algunas enfermedades. A primera vista no parece lógico que un proceso de auto digestión pueda ser beneficioso para la célula, pero en caso de falta de nutrientes o de acción de agentes dañinos, la célula se ve obligada a utilizar sus propios recursos para sobrevivir. Así por ejemplo, en la vida diaria, en los periodos de ayuno entre las comidas la autofagia se activa en el hígado para mantener sus funciones metabólicas. Existen tres tipos de autofagia: la micro autofagia, la macro autofagia y la autofagia mediada por chaperonas. La micro autofagia es la autofagia selectiva y con control, en la cual la célula selecciona los componentes anómalos y los digiere ordenadamente en los lisosomas (orgánulos donde existe un pH muy ácido). Este tipo de autofagia sería protector de la célula. La macro autofagia es el tipo de autofagia que se lleva a cabo sin control ya que se fagocitan los componentes celulares de forma no selectiva. Este proceso puede llevar a la célula a su muerte. El tercer tipo de autofagia es la mediada por chaperonas en la cual se reconocen proteínas con una secuencia concreta de aminoácidos, las cuales son transportadas al lumen lisosomal para su degradación. El 30% de las proteínas celulares presentan esta secuencia de aminoácidos. PROYECTO DE INVESTIGACIÓN REALIZADO CON LA DRA. CARMEN BURGALETA INVESTIGADORA PRINCIPAL 1.-Evaluación de los Autoanalizadores SYSMEX XE-2100 y CELL-DYN SAPPHIRE. Estudio Comparativo. ANTECEDENTES: La aparición de equipos que combinan la tecnología habitual para medir parámetros hematológicos mediante impedancia, con histoquímica y citometría ha permitido mejorar la capacidad de resolución y fiabilidad de los analizadores, asi como aumentar sus aplicaciones para analizar parámetros hematimétricos, incluyendo análisis de progenitores hemopoyeticos, reticulocitos, eritroblastos etc. Ello, permite establecer diferencias entre las prestaciones de los equipos de última generación, siendo de gran interés el conocimiento y valoración de estas aplicaciones, así como el análisis del cumplimiento de las recomendaciones de Standarizacion Internacional. OBJETIVOS: 1. Evaluar las prestaciones del autoanalizador Sysmex XE-2100 Y Cell-Dyn Sapphire según el protocolo recomendado por el“International Council for Standardization in Haematology (ICSH) 1 y las normas del “Nacional Committe for Clinical Laboratory Standards” (NCCLS) 2 de EEUU. 2. Llevar a cabo un estudio intercomparativo de ambos sistemas de Auto analizadores, analizando: Linealidad, precisión, arrastre, comparación general de parámetros normales y extremos. - 99 - El estudio de la autofagia y de su regulación podría ser de vital importancia para esclarecer por qué algunas terapias en el cáncer, como la radiación o la quimioterapia, no obtienen resultados adecuados porque se produce resistencia en los pacientes; en nuestro caso en el hepatocarcinoma. 3. Evaluar la exactitud del recuento de eritroblastos mediante dos auto analizadores Sysmex XE-2100 y Cell-Dyn Sapphire y compararlos con el recuento realizado por microscopía óptica. Resultados y conclusiones 4. Evaluar la utilidad de la cuantificación de células inmaduras (Progenitores hematopoyéticos) proporcionadas por el Sysmex XE-2100 frente a las CD34 evaluadas mediante citometría de flujo. Previamente, en nuestro laboratorio, hemos mostrado que el tratamiento de las células HepG2 con Aza y BSO (butionine sulfoximine; un inhibidor de la síntesis de GSH) induce celular debida a la disminución de los niveles de GSH y al estrés oxidativo. Sin embargo, en ausencia de BSO, las células HepG2 permanecen resistentes al efecto de Aza. 5. Evaluar la correlación de las tecnologías de impedancia, óptica e inmunológica para el recuento de plaquetas. Secundariamente analizar el impacto de este análisis en la transfusión de plaquetas de pacientes con trombocitopenia En este estudio hemos demostrado que el tratamiento de estas células con Aza no PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN
FUNDACIÓN GENERAL DE LA UNIVERSIDAD DE ALCALÁ / MEMORIA 2009 FUNDACIÓN GENERAL DE LA UNIVERSIDAD DE ALCALÁ / MEMORIA 2009 Comunicación de Resultados presentados hasta ahora como consecuencia del estUdio: 1. Lopez Rubio, Jacob I, Ruiz P, Almeria R, Blazquez R, Perez Calvo C, Burgaleta C. Deteccion automatizada de eritroblastos. Comparacion Del Sysmex XE 2100, Cell- Din saohire y microscopia óptica. XLVIII Reunión Nacional de la AEHH y XXII Congreso de la SETH. Haematologica 2006;91 (Ext 2):54. 2. 3. 4. López Rubio M, Magro E, Pascual T, Garcia Suárez J, Gil Fernandez JJ, Calero MA, Martín Guerrero Y, Perez Calvo C, Burgaleta C. Accuracy of platelet counting by haematology analysers and its potential impact on the transfusion decisionmaking process.14 th Congress of the European Hematology Association. Berlin, June 4-7, 2009. Hematologica 2009;94(s2): 316 López Rubio M, Magro E, Pascual T, Garcia Suárez J, Gil Fernandez JJ, Calero MA, Martín Guerrero Y, Burgaleta C. Recuento de plaquetas por distintas tecnologías y su implicación en la decisión de transfusión de plaquetas en pacientes con trombocitopenia severa.LI Reunión nacional de la AEHH y XXV Congreso Nacional de la SETH. Haematologica 2009;94(Ext 2):132 H. Magro, J. J. Gil-Fernández, J. García-Suárez, M. Callejas, Y. Martín, T Pascual, M. López-Rubio. Comparative effect of filgrastrim vs. pegfilgrastrim after chemotherapy on high grade non Hodgkin lymphoma.14 h Annual meeting European Haematologya association.Hematologica 2009;94(s2 (Berlin 2009). 2.- ALMA BANDA 7 Desarrollo y fabricación de amplificadores criogénicos para equipar los receptores de la Banda 7 del interferómetro ALMA (Atacama Large Millimeter Array) 1 . El proyecto ALMA se desarrolla en dos fases: pre-producción y producción. La primera consiste en fabricar y equipar 8 de las 50 antenas de las que constaba inicialmente el interferómetro (posteriormente se incorporaron 16 antenas japonesas). La pre-producción de los amplificadores de la Banda 7 se realizó mediante un contrato entre FGUA (OAN) y ESO (junio de 2005) para el desarrollo de 10 prototipos y fabricación de 32 unidades de pre-producción de los amplificadores, y un subcontrato entre FGUA y la empresa Tecnologías de las Telecomunicaciones y de la Información (TTI) para fabricar 29 de esas 32 unidades (los prototipos y restantes unidades de preproducción se hicieron en el CDT). Esta fase está terminada y todos los amplificadores entregados. El proyecto ALMA está ahora en su fase de Producción en lo que se refiere a los amplificadores de la Banda 7. 3.- ALMA BANDA 9 - 100 - PROYECTOS REALIZADOS EN COLABORACIÓN CON EL INS- TITUTO GEOGRÁFICO NACIONAL 1.- AGENCIA ESPACIAL Desarrollo y fabricación de amplificadores criogénicos para equipar los receptores de la Banda 9 del interferómetro ALMA (Atacama Large Millimeter Array). Durante 2009 se entregaron 30 de los 100 amplificadores previstos en el contrato (unidades número 67 a 96), todas ellas fabricadas en el Centro de Desarrollos Tecnológicos (ver ilustración). - 101 - Contrato con el European Space Operations Centre (ESOC), de la Agencia Espacial Europea (ESA), para mejorar la tecnología existente en Europa de dispositivos semiconductores de fosfuro de Indio (InP) y fabricar una serie de dispositivos HEMT InP para amplificadores criogénicos. Dicha investigación se realiza en colaboración con el Laboratorio de Campos Electromagnéticos y Electrónica de Microondas del Instituto Federal de Tecnología de Zurich (ETHZ), en Suiza. Esta actividad es continuación de la desarrollada entre 2004 y 2006. En esta ocasión se trata de perfeccionar la tecnología puesta a punto en el período 2004-2006 y extenderla a la fabricación de transistores en una banda de frecuencias más alta (Ka, entre 25,5 y 32.3 GHz). Además de un mínimo de 100 transistores optimizados para funcionar a temperaturas criogénicas dentro de esa banda, se prevé fabricar 4 amplificadores de demostración de sus prestaciones. 4.- PROYECTO SKADS En octubre de 2009 se recibieron los primeros transistores fabricados con éxito por ETHZ. Estos transistores adoptan una gran variedad de configuraciones con objeto de poder elegir entre ellas las que den mejores prestaciones. Se han hecho algunas medidas de ruido con transistores montados en amplificadores a 6 GHz y a 22 GHz, obteniéndose resultados muy prometedores. Se está en fase de análisis de estos resultados para seleccionar de entre todas las configuraciones recibidas aquellas con mejores características de ruido y centrarse en la mejora de las mismas durante la siguiente fase del proyecto. Durante el año 2009 se han seleccionado los diseños definitivos del prototipo de amplificador diferencial de bajo ruido, la antena y la red de alimentación de un array de antenas en el rango de frecuencias de 300 Mhz a 1 GHz y doble polarización. Basándose en estos prototipos se ha realizado el diseño completo del array, en el que se incluye la integración de todos ellos en un único sistema de 1m 2 de área total (FIDA3: FG-IGN Differential Active Antenna Array). 1- ALMA es un proyecto conjunto entre EEUU, Canadá, Japón y Europa para construir el mayor interferómetro de ondas milimétricas del mundo, que se está empezando a instalar en el desierto de Atacama (Andes chilenos). La parte europea de ALMA es gestionada por la Organización Europea para la Investigación Astronómica en el Hemisferio Sur (ESO). PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN PROYECTOS DE INVESTIGACIÓN
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