(A) (B)

105Annexe 4 - Systèmes enzymatiques et réactifs de révélationSystèmesRéactifs de révélationenzymatiquesAAT 40 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 10 mg pyridoxal-5-phosphate, 80 mg acideaspartique, 160 mg acide ketoglutarique, 80 mg fast Blue BBADH 5 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 0,5 ml MgCI2, 1 ml Ethanol (95°C), 1 ml NAD, 1ml MTT, 0,5 ml PMS, 2 ml agar.AK 5 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0;50 mg glucose, 1 ml MgCI2, 1 ml NAD, 0,5 mlNADP, 10 mg ADP, 15 mg Pyruvate, 6 1Glucose-6-phosphate dehydrogenase(1,7 unités), 5 1Hexokinase (1,7 unités), 1 ml MTT, 0,5 ml PMS, 2 ml agar.CK 5 ml Tris-HCI,(0,2~) pH 8,0; 50 mg glucose, 1 ml MgCI2, 1 ml NAD, 0,5 mlNADP, 10 mg ADP, 15 mg Phosphocreatine, 15 mg Pyruvate, 6 1Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités), 5 1Hexokinase (1,7 unités), 1 ml MTT, 0,5ml PMS, 2 ml agar.ESTERASES 50 ml tampon acetate, 1 ml 4-FBPFHGPI5 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 0,5 NADP 1%, 20 mg Fructose 1,6 diphosphate,60 mg MgS04, Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités), 51Phosphoglucose-Isomerase (1,7 unités), 1 ml MTT, 0,5 ml PMS, 10 ml agar.4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml NAD, 200 mg acide fumarique, 15 mgPyruvate, 0,5 ml NBT, 0,5 ml PMS, 10 microl Malate dehydrogenase, 10 mlagar.4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml MgCI2, 1 ml NAD, 0,5 ml NADP, 10 mgFrctose-6-phosphate, Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités), 0,5 mlNBT, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, 10 ml agar.G6PDH 3 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml MgCI2, 1 ml NADP, 60 mg acide-6-phosphogluconique, 15 mg Pyruvate, 0,5 ml NBT, 0,5 ml PMS, 10 ml agar.G3PDH 4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml NAD, D, L-glycerophosphate, 15 mgPyruvate, 0,5 ml NBT, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, 10 ml agar.IDHP 3 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml NAD, 0,5 ml MgCI2, , 0,5 ml NADP, 2 mlacide isocitrique, 0,5 ml NBT, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, 10ml agar.LDH 20 ml Tris-HCl (0,2 M); 1 ml NAD, 6 ml acide lactique, 0,5 ml NBT, 0,5 ml PMS.MDH 35 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 0,5 ml MgCI2, 2 ml NAD,5 ml acide malique, 15mg Pyruvate, 1 ml NBT, 0,5 ml PMS, 1 ml MTT.MPI 4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 30 mg mannose-6-phosphate, 1 ml NAD, 1,5 mlNADP, 15 mg Pyruvate, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, 5 1Phosphoglucose-Isomerase(1,7 unités), Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités), 1°ml agar.PGIPGMPTSOD4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml MgCI2, 1 ml NAD, 0,5 ml NADP, 0,5 mlNBT, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités),10ml agar.4 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8,0; 1 ml MgCI2, 1 ml NAD, 0,5 ml NADP, 200 mgglucose-l-phosphate, Glucose-6-phosphate dehydrogenase (1,7 unités), 0,5 mlNBT, 0,5 ml PMS, 0,5 ml MTT, 10ml agar. -40 ml de bleu de Coomassie40 ml Tris-HCl (0,2 M) pH 8; 0,5 ml MgCI2, 1 ml NAD, 1 ml NBT, 0,5 ml PMSB. ADEPO-GOURENE Mémoire de Thèse