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2006; SILVA et al, 2007). No entanto ainda não se sabia quais os alcaloides estão
presentes na fração F32 e ainda se estes são capazes de induzir in vitro aquelas
lesões neuro-histológicas e ultraestruturais visualizadas em animais intoxicados pelo
consumo da P. juliflora (TABOSA et al, 2000a; TABOSA et al, 2006; CÂMARA et al,
2009).
Vacuolização neuronal não é um achado específico de intoxicação por P.
juliflora e ocorre em outras doenças de herbívoros provocadas pela ingestão plantas
do gênero Solanum (PIENAAR et al., 1976, MENZIES et al. 1979, BOURKE 1997,
PORTER et al. 2003), Swainsona, Oxytropis, Astragalus (SUMMERS et al., 1995) e
Ipomoea (VAN DER LUGT., 2002). Muitas dessas plantas, a exemplo de Solanum
fastigiatum, induzem vacúolos no citoplasma de neurônios como resultado do
acúmulo de substratos não metabolizados em lisossomos, que caracteriza a doença
de depósito lisossomal (DSL). Outras, como a P. juliflora, ainda que induzam a
formação de vacúolos, estes últimos ainda não foram caracterizados, o que poderia
constituir uma informação importante para a compreensão do mecanismo de ação
dos compostos tóxicos destas plantas.
Este estudo complementa os estudos in vitro anteriores do nosso grupo, que
sugerem os alcaloides como os agentes tóxicos da intoxicação animal por P.
juliflora. Nós caracterizamos os alcaloides presentes na fração mais bioativa (F32)
obtida de folhas da P. juliflora, e estudamos in vitro as alterações morfológicas e
ultraestruturais induzidas por esta fração e o extrato alcaloidal (ETA) em modelo de
co-cultura primária de neurônios/células gliais.
3.2. Materiais e métodos
Extração e caracterização de alcaloides
Folhas de P. juliflora foram colhidas em Salvador (BA) na Escola de Medicina
Veterinária e Zootecnia da Universidade Federal da Bahia (UFBA). O extrato
alcaloidal foi obtido através do método ácido/base de extração, tal como descrito por
OTT-LONGONI et al. (1980), com pequenas modificações (SILVA et al, 2007). As
folhas foram secas em estufa a 50° C. Para eliminar componentes não-polares o
material seco e triturado (874 g) sofreu três extrações com hexano (2,0 L/kg) durante
48 h à temperatura ambiente, cada extração, com agitação ocasional. O extrato foi,
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