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morfologia plana/poligonal, com estas proteínas distribuídas ao longo dos corpos
celulares (Fig. 4). No entanto, mudanças na morfologia dos astrócitos foram apenas
observados em culturas tratadas com 3 µg/mL de F32. Nestas condições, os
astrócitos remanescentes apresentaram finos e multipolares filamentos positivos
para GFAP (Fig. 4 C), sugerindo a ativação de astrócitos. Análises por western blot
revelaram que os níveis de GFAP em condições controle e culturas tratadas com 1,5
- 3 µg/mL de ETA e 1,5 µg/mL de F32 permaneceram semelhantes, como
determinado por uma banda imunorreativa de 49kDa. No entanto, em culturas
expostas a 3 µg/mL de F32, uma mudança no padrão de migração da GFAP foi
observada. A GFAP apareceu como uma banda de proteína prolongada de pesos
moleculares muito semelhantes, sugerindo uma degradação desta proteína (Fig. 4
C).
As análises realizadas por imunocitoquímica para βIII-tubulina revelaram que
os neurônios exibiram polimerização disfuncional desta proteína em culturas
tratadas com 3 µg/mL de F32, quando comparadas com células em condições
controle que apresentaram a expressão desta proteína por todo o corpo celular e
neuritos (Fig. 5).
Poucas células microgliais ativadas marcadas para OX-42 (1,3%) apareceram
como pequenas células redondas, de cor preta em condições de controle (Fig. 6 A).
No entanto, a exposição a 1,5 - 3 µg/mL de ETA ou F32 aumentou a proporção de
células microgliais OX-42-positivas em até cinco vezes (Fig. 6 BE). Em condições
controle, o sobrenadante do meio de culturas tratadas com veículo DMSO (0,1%)
mostraram níveis baixos de nitrito: 35,5 ± 4,5 pg/mL. O sobrenadante do meio de
culturas tratadas com 1,5 µg/mL de ETA, 3 µg/mL de ETA ou 1,5 µg/mL de F32
apresentaram níveis semelhantes de nitrito, com valores de 31,3 ± 6,3; 34,7 ± 4,3 e
36,1 ± 3,6, respectivamente (Fig. 7). No entanto, a exposição das células a 3 µg/mL
de F32 induziu um aumento significativo no nível de nitrito em meio de cultura, para
44,9 ± 4,8 pg/mL (Fig. 7 B).
Análise ultraestrutural do citoplasma
A análise ultraestrutural revelou que as células em condições controle (DMSO
a 0,1%) (Fig. 8 A) apresentaram uma morfologia normal do citoplasma, mitocôndrias
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