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qual é convertido para formazan insolúvel de cor púrpura pela clivagem do anel de
tetrazólio pela enzima succinato desidrogenase no interior da mitocôndria de células
saudáveis (MOSMAN, 1983, SHEARMAN et al., 1995). Evidências mais recentes
sugerem que a redução de MTT pode também ser mediada por succinato, NADH ou
NADPH como substrato no interior das células e fora da mitocôndria (Berridge e Tan,
1993). Observou-se pelo teste de MTT, que após 24 h de exposição a baixas
concentrações de alcaloides da F32 e ETA (3 µg/mL), estas não foram suficientes
para reduzir a atividade de desidrogenases no sistema de cultura adotado. No
entanto, esta concentração subtóxica induziu distúrbios mitocondriais visualizados
por microscopia eletrônica. Pelo teste MTT, apenas concentrações mais elevadas de
F32 (7,5 µg/ml) e ETA (30 µg/ml) demonstraram induzir redução da atividade da
succinato desidrogenase.
Vacuolização citoplasmática após a exposição a uma variedade de produtos
químicos e substâncias bioativas tem sido extensivamente relatada (para revisão ver
AKI et al., 2012). Observou-se também, após coloração com Rosenfeld, que a
exposição de neurônios e células gliais aos alcaloides induziu em astrócitos
mudanças estruturais e vacuolização dose-dependente do citoplasma. Além disso,
uma perturbação na rede de neuritos e vacuolização intensa em neuritos foram
observadas. No campo da patologia celular, deteriorações celulares caracterizadas
por vacuolização citoplasmática são chamadas degenerações vacuolares (COTRAN
et al., 1999), e a vacuolização induzida por alcaloides de P. juliflora em co-cultura de
neurônios/células gliais podem ser um tipo de degeneração vacuolar. Semelhantes
alterações morfológicas em células do sistema nervoso central foram relatadas em
ingestão experimental e espontânea de P. juliflora por bovinos. Tabosa et al. (2006)
e Câmara et al. (2009) observaram gliose, vacuolização e perda neuronal em
núcleos motor do nervo trigêmeo e outros núcleos de nervos cranianos como as
principais lesões histológicas após intoxicação P. juliflora.
Autolisossomos não são vacúolos verdadeiros, que às vezes se expandem
para encher o citoplasma e, portanto, muitas vezes são referidos como vacúolos
autofágicos, que podem ser observados sob microscopia de fase (AKI et al., 2012).
A análise ultraestrutural sugere a formação de vacúolos autofágico nas células
tratadas durante 24 h com 3 µg/mL de F32. A autofagia é um processo pelo qual há
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