download da tese em pdf - Pós-Graduação em Ciência Animal nos ...

More documents

Recommendations

Info

e ferrocianeto de potássio a 0,8% e 5 mM de CaCl2 no mesmo tampão durante 1 h à temperatura ambiente. As células foram então raspadas, desidratadas numa série de soluções de acetona e embebidas em resina Polybed. Cortes finos foram corados com acetato de uranila e citrato de chumbo e observadas em um microscópio eletrônico de transmissão Zeiss EM109. Análise estatística Os resultados são expressos em média ± desvio-padrão. One-way ANOVA seguido pelo pós-teste de Student-Newmann-Keuls para determinar as diferenças estatísticas entre os grupos que diferem em apenas um parâmetro. Teste t de Student foi utilizado para as comparações entre dois grupos. Valores de p
Curvas de dose-resposta Os efeitos tóxicos de ETA e F32 obtidos a partir de folhas de P. juliflora sobre a viabilidade das células foram avaliados por teste MTT, que mede a redução do sal de tetrazólio (MTT) a formazan de cor púrpura pelas enzimas desidrogenases de células vivas. Depois de vinte e quatro horas de exposição a 1,5 - 45 µg/ml de ETA ou F32 em co-culturas de neurónios/ células gliais foi visualizada uma diminuição dose-dependente da atividade das desidrogenases (Figura 2). As concentrações inibitórias médias (valores de EC50) foram 31,07 µg/mL (ETA) e 7,36 µg /mL (F32). Para tornar possível a análise de alterações morfológicas e ultraestruturais, utilizaram-se doses subtóxica (1,5 µg/mL e 3 µg/mL) para a realização dos demais testes. Efeito dos alcaloides sobre morfologia das células da glia e neuronal. Para investigar os efeitos dos alcaloides da P. juliflora sobre a morfologia celular, coloração de Rosenfeld e imunocitoquímicas para GFAP, βIII-tubulina e OX- 42 foram realizadas em co-culturas de neurônios/células gliais. A coloração de Rosenfeld nas células em condições controle revelou neurônios homogeneamente distribuídos ao longo da monocamada densa de astrócitos, com estes apresentando um fenótipo plano/poligonal (Fig. 3 A). Em culturas expostas a 1,5 µg/mL de ETA, a rede de neuritos foi mantida, mas alguns astrócitos apresentaram vacuolização citoplasmática (Fig. 3 B). No entanto, em culturas expostas a 3 µg/ml de ETA, a proporção de astrócitos com vacuolização citoplasmática aumentou significativamente (Fig. 3 C e G), com a redução da integridade da rede de neuritos, alguns astrócitos gigantes também foram observados. A exposição de células a 1,5 µg/mL de F32 foi suficiente para perturbar a monocamada de astrócitos e a rede de neuritos. Vacuolização citoplasmática intensa nos astrócitos e vacúolos em neurites também foram observadas (Fig. 3 D, E e H). Estes efeitos foram amplificados em culturas tratadas com 3 µg/mL de F32 (Fig. 3 F e H), no entanto, nesta concentração adotada não foi possível quantificar os astrócitos em processo de vacuolização, devido a pouca quantidade de células aderentes nesta condição de tratamento. Culturas analisadas por imunocitoquímica para a GFAP, proteína do citoesqueleto de astrócitos, mostraram uma monocamada de células grandes com 24
Page 1 and 2: UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA ESCOL
Page 3 and 4: FICHA CATALOGRÁFICA SILVA, Victor
Page 5 and 6: A Fidelina Maria da Silva, minha av
Page 7 and 8: Aos colegas do Laboratório de Neur
Page 9 and 10: SUMÁRIO LISTA DE ABREVIATÚRAS x L
Page 11 and 12: NO - Óxido Nitrico PBS - Tampão f
Page 13 and 14: Figura 2 - Análise de alterações
Page 15 and 16: SILVA, Victor Diogenes Amaral da. C
Page 17 and 18: de neurotoxicidade de alcaloides pi
Page 19 and 20: evapotranspiração potencial no pe
Page 21 and 22: (juliprosopina) foram determinadas
Page 23 and 24: metanólico, 3 a 300 µg/mL da uma
Page 25 and 26: astrócitos também representam o c
Page 27 and 28: Por outro lado, estudos in vitro t
Page 29 and 30: 3. ARTIGO CIENTÍFICO I Alcaloides
Page 31 and 32: 3.1. Introdução Espécies do gên
Page 33 and 34: em seguida, filtrado, e o resíduo
Page 35 and 36: densidade óptica de cada amostra f
Page 37: proteínas totais, preparada confor
Page 41 and 42: e núcleos. No entanto, as células
Page 43 and 44: a degradação intracelular de prot
Page 45 and 46: cerebral induzido por estresse (DIM
Page 47 and 48: 3.6 Referências AHMAD, A.; ALI KHA
Page 49 and 50: GEBICKE-HAERTER, P.J. Microglia in
Page 51 and 52: O’CALLAGHAN, J.P. Assessment of n
Page 53 and 54: SAMOYLENKO, V., ASHFAQ ,M.K., JACOB
Page 55 and 56: Juliprosina Juliprosopina Figura 1
Page 57 and 58: G H Vacuolização em Astrócitos (
Page 59 and 60: Figura 5 - Análise do efeito dos a
Page 61 and 62: 0 1,5 3 ETA (µg/mL) 0 1,5 3 F32 (
Page 63 and 64: 4. ARTIGO CIENTÍFICO II Autofagia
Page 65 and 66: 4.1. Introdução Prosopis juliflor
Page 67 and 68: cultura da glia. As células neuron
Page 69 and 70: 50 mM, pH: 7,4; NaCl 150 mM, 1% NP4
Page 71 and 72: Verificou-se que a exposição à 3
Page 73 and 74: É sabido que intoxicação de anim
Page 75 and 76: 4.6 Referencias AHMAD, V.U. Natural
Page 77 and 78: DEGTYAREV, M , DE MAZIÈRE, A. , OR
Page 79 and 80: SILVA, A.M.M.; SILVA, A.R.; PINHEIR
Page 81 and 82: Figura 1 - Níveis de ATP por lumin
Page 83 and 84: 29 KDa 17 KDa Cont. Pró-caspase 3
Page 85 and 86: A B % de cálulas viáveis % de cé
Page 87 and 88: 5. CONSIDERAÇÕES FINAIS Os estudo
Page 89 and 90:
AL-SHAKH-HAMED, W. M. A.; AL-JAMMAS
Page 91 and 92:
CÁ-CERES, A.; MENÉNDEZ, H.; MÉND
Page 93 and 94:
LIN, K. Akt inhibition promotes aut
Page 95 and 96:
1a, and IL-6 in mixed glia cultures
Page 97 and 98:
LIMA, P.C.F.; SILVA, M.A. Ocorrênc
Page 99 and 100:
Oliveira, A.S.; Pereira, R.A.; Lima
Page 101 and 102:
ROOHL, C.; ARMBRUST, E.; KOLBE, k.;
Page 103 and 104:
and NO release in primary glial cel
Page 105 and 106:
TARDY, M. Astrocyte et Homeostasie.
Page 107 and 108:
7. PRODUÇÃO BIBLIOGRAFICA 7.1. Re
Page 109:
8. ANEXOS A C Anexo 1: Em (A): alga
show all

download da tese em pdf - Pós-Graduação em Ciência Animal nos ...

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

Delete template?

Save as template?