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Avaliação do potencial herbicida de compostos secundários na germinação de sementes de plantas daninhas encontradas em pastagens

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Artigo<br />

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL HERBICIDA DE<br />

COMPOSTOS SECUNDÁRIOS NA GERMINAÇÃO<br />

DE SEMENTES DE PLANTAS DANINHAS<br />

ENCONTRADAS EM PASTAGENS<br />

Re s u m o<br />

Neste trabalho procurou-se avaliar o <strong>potencial</strong> <strong>herbicida</strong> <strong>de</strong> algumas classes <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong><br />

<strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção <strong>de</strong> <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong>. Os <strong>compostos</strong> escolhi<strong>do</strong>s para<br />

tal estu<strong>do</strong> foram: alcalói<strong>de</strong>s (atropi<strong>na</strong> e cinconidi<strong>na</strong>), áci<strong>do</strong>s fenólicos (áci<strong>do</strong>s clorogênico, cafeico,<br />

ferúlico, p-anísico), áci<strong>do</strong>s carboxílicos (áci<strong>do</strong>s oxálico, maleico, malônico, tartárico, málico, aspártico,<br />

cítrico), flavonói<strong>de</strong>s (genisteí<strong>na</strong>, <strong>na</strong>ringeni<strong>na</strong>, camferol, querceti<strong>na</strong>) e poliami<strong>na</strong>s (diaminobutano<br />

e diaminopentano). A escolha <strong>de</strong> tais <strong>compostos</strong> se <strong>de</strong>u com base <strong>na</strong> alta ocorrência <strong>de</strong>stes <strong>em</strong> fenômenos<br />

alelopáticos reporta<strong>do</strong>s <strong>em</strong> literatura. Como <strong>plantas</strong> receptoras (<strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong>) foram<br />

utilizadas aquelas com maior freqüência <strong>de</strong> ocorrência <strong>em</strong> áreas <strong>de</strong> <strong>pastagens</strong> da região Amazônica<br />

causan<strong>do</strong> gran<strong>de</strong> perda <strong>na</strong> produtivida<strong>de</strong>: Cassia tora (mata-pasto), Mimosa pudica (malícia) e Cássia<br />

occi<strong>de</strong>ntalis (fe<strong>de</strong>goso). O bioensaio foi <strong>de</strong>senvolvi<strong>do</strong> <strong>em</strong> câmara <strong>de</strong> germi<strong>na</strong>ção à t<strong>em</strong>peratura<br />

constante 25 0 C e fotoperío<strong>do</strong> <strong>de</strong> 12 horas, sen<strong>do</strong> monitora<strong>do</strong> durante 15 dias. Os resulta<strong>do</strong>s<br />

obti<strong>do</strong>s mostraram que alcalói<strong>de</strong>s e poliami<strong>na</strong>s foram os mais eficientes <strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção<br />

das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong>. As <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> Mimosa pudica (malícia) foram mais sensíveis à<br />

ação <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> <strong>do</strong> que as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> Cassia occi<strong>de</strong>ntalis (fe<strong>de</strong>goso), o que <strong>de</strong>monstrou certa<br />

especificida<strong>de</strong> <strong>do</strong>s mesmos. Efeitos sinergísticos entre os <strong>compostos</strong> estuda<strong>do</strong>s também foram observa<strong>do</strong>s<br />

mediante o aumento da porcentag<strong>em</strong> <strong>de</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> ao utilizar a<br />

mistura <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> nos bioensaios. Assim, os <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> estuda<strong>do</strong>s apresentaram<br />

proprieda<strong>de</strong>s <strong>herbicida</strong>s que, após estu<strong>do</strong>s, po<strong>de</strong>rão ser utiliza<strong>do</strong>s como <strong>herbicida</strong>s <strong>na</strong>turais.<br />

Sonia <strong>do</strong>s Santos 1* e<br />

Maria Olímpia <strong>de</strong> Oliveira<br />

Rezen<strong>de</strong> 2<br />

¹Centro Universitário<br />

da Fundação Educacio<strong>na</strong>l<br />

<strong>de</strong> Guaxupé<br />

²Instituto <strong>de</strong> Química<br />

<strong>de</strong> São Carlos - USP<br />

*Autora para correspondência:<br />

Av. Do<strong>na</strong> Floria<strong>na</strong>, 463<br />

CEP: 37800-000. Guaxupé. MG<br />

E-mail: sosant@<strong>em</strong>ail.fun<strong>de</strong>g.br<br />

Palavras-chave: <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong>, <strong>herbicida</strong>s e <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong><br />

Su m m a r y<br />

In this paper we evaluated the herbici<strong>de</strong> potential of the some secondary compounds on the germi<strong>na</strong>tion<br />

of some common weed pests, which are actually becoming a real probl<strong>em</strong> in pastures in<br />

Brazil. The compounds studied were: alkaloids (atropine e cinchonidine), phenolic acids ( clorogenic,<br />

cafeic, pherulic, p-anisic acids), carboxilics acids (oxalic, maleic, malonic, tartaric, malic, aspartic and<br />

citric acids), flavonoids (genistein, <strong>na</strong>ringenin, ka<strong>em</strong>pferol, quercetin) and the poliamines (diaminobutane<br />

and diaminopentane). These compounds were choosen because of their high occurrence in<br />

allelopathic phenomenon reported in literature. Seeds of the weeds: Mimosa pudica, Cassia occi<strong>de</strong>ntalis,<br />

and Cassia tora, known as “malícia”, “fe<strong>de</strong>goso” and “mata-pasto” were chosen because they are<br />

a common probl<strong>em</strong> in pastures. The bioassays were incubated at 25°C with 12 hours of photoperiod<br />

and the germi<strong>na</strong>tion process was monitored during 15 days. Alkaloids and poliamines were the<br />

most efficient ones in the inhibition of the weed seeds germi<strong>na</strong>tion. Seeds of Mimosa pudica was the<br />

more affected by the compounds than seeds of Cassia occi<strong>de</strong>ntalis, which proves the specificity of the<br />

secondary compounds studied. Sinergistic effect were too observed. So, the secondary compounds<br />

studied presents herbici<strong>de</strong> properties, which after having been studied properly, can serve in the<br />

future like <strong>na</strong>tural herbici<strong>de</strong>s.<br />

Keywords: secondary compounds, herbici<strong>de</strong>s and weeds<br />

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In t r o d u ç ã o<br />

A carne bovi<strong>na</strong> é consi<strong>de</strong>rada um produto <strong>de</strong> gran<strong>de</strong> importância<br />

<strong>na</strong> dieta huma<strong>na</strong>, ten<strong>do</strong> sua produção como prioritária<br />

<strong>em</strong> quase to<strong>do</strong>s os países.<br />

O Brasil, <strong>em</strong> termos quantitativos, possui o quarto rebanho<br />

<strong>do</strong> mun<strong>do</strong>. Apesar da gran<strong>de</strong> <strong>potencial</strong>ida<strong>de</strong> para produção<br />

a baixo custo, a ativida<strong>de</strong> pecuária <strong>em</strong> nosso país não t<strong>em</strong><br />

acompanha<strong>do</strong> o crescimento populacio<strong>na</strong>l.<br />

Vários fatores têm limita<strong>do</strong> um maior <strong>de</strong>senvolvimento<br />

da bovinocultura e <strong>de</strong>ntre eles <strong>de</strong>stacam-se: conhecimento<br />

precário da ecologia e <strong>do</strong> valor nutritivo <strong>de</strong> forrageiras,<br />

limitada tecnologia, falta <strong>de</strong> conhecimento das <strong>de</strong>ficiências<br />

<strong>do</strong> solo, má qualida<strong>de</strong> das <strong>pastagens</strong>, incluin<strong>do</strong> aí o aparecimento<br />

<strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> as quais causam consi<strong>de</strong>ráveis<br />

perdas refletin<strong>do</strong> <strong>na</strong> redução da produtivida<strong>de</strong> e<br />

qualida<strong>de</strong> <strong>do</strong> produto, afetan<strong>do</strong>, <strong>de</strong>sta forma, o merca<strong>do</strong><br />

consumi<strong>do</strong>r (1).<br />

Com o intuito <strong>de</strong> elimi<strong>na</strong>r tais ervas <strong>daninhas</strong>, insetos<br />

e outras pragas, os cria<strong>do</strong>res utilizam vários agroquímicos<br />

sintéticos.<br />

Os agroquímicos, também conheci<strong>do</strong>s como pesticidas,<br />

agrotóxicos e <strong>de</strong>fensivos agrícolas, são <strong>compostos</strong> utiliza<strong>do</strong>s<br />

para controlar ou erradicar, <strong>de</strong> maneira geralmente específica,<br />

as <strong>do</strong>enças e pragas <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> e animais e os vetores<br />

transmissores <strong>de</strong> <strong>do</strong>enças no hom<strong>em</strong> (2)<br />

Muitos pesticidas são altamente tóxicos ao hom<strong>em</strong> e a<br />

outros animais, seja por exposição direta, seja por acumulação<br />

no organismo através da ingestão <strong>de</strong> alimentos contami<strong>na</strong><strong>do</strong>s<br />

(3-5).<br />

Além <strong>de</strong> probl<strong>em</strong>as ambientais e da toxici<strong>de</strong>z <strong>de</strong>sses <strong>compostos</strong><br />

ao hom<strong>em</strong>, muitos sist<strong>em</strong>as agrícolas têm apresenta<strong>do</strong><br />

redução expressiva no po<strong>de</strong>r <strong>de</strong> controle <strong>do</strong>s <strong>herbicida</strong>s<br />

sintéticos (6).<br />

O perigo para a saú<strong>de</strong> huma<strong>na</strong> e para o ambiente proveniente<br />

<strong>do</strong> uso <strong>do</strong>s <strong>herbicida</strong>s que atualmente estão disponíveis<br />

no merca<strong>do</strong>, além <strong>do</strong> surgimento <strong>de</strong> novas <strong>plantas</strong><br />

resistentes, são probl<strong>em</strong>as reais resultan<strong>do</strong> um crescente<br />

interesse <strong>em</strong> se encontrar alter<strong>na</strong>tivas que busqu<strong>em</strong> o <strong>de</strong>senvolvimento<br />

<strong>de</strong> novos <strong>compostos</strong>, os quais possam assegurar<br />

aumento <strong>na</strong> produtivida<strong>de</strong> agrícola com base <strong>na</strong> sustentabilida<strong>de</strong><br />

a longo prazo.<br />

Neste senti<strong>do</strong>, a alelopatia po<strong>de</strong> ser <strong>de</strong> gran<strong>de</strong> importância,<br />

pois possibilita a i<strong>de</strong>ntificação <strong>de</strong> <strong>compostos</strong>, os quais po<strong>de</strong>rão<br />

servir como base para a produção <strong>de</strong> <strong>herbicida</strong>s mais<br />

específicos e menos prejudiciais ao ambiente quan<strong>do</strong> compara<strong>do</strong>s<br />

àqueles <strong>em</strong> uso atualmente <strong>na</strong> agricultura.<br />

Alelopatia po<strong>de</strong> ser <strong>de</strong>finida como processo que envolve<br />

metabólitos <strong>secundários</strong> produzi<strong>do</strong>s por <strong>plantas</strong>, algas, bactérias<br />

e fungos que influenciam o crescimento e <strong>de</strong>senvolvimento<br />

<strong>de</strong> sist<strong>em</strong>as biológicos (7).<br />

As substâncias alelopáticas liberadas por uma planta irão<br />

afetar o crescimento, prejudicar o <strong>de</strong>senvolvimento normal e<br />

até mesmo inibir a germi<strong>na</strong>ção <strong>de</strong> outras espécies (8).<br />

Não se conhece com exatidão o papel <strong>do</strong>s produtos <strong>secundários</strong>.<br />

No passa<strong>do</strong> estes foram <strong>de</strong>fini<strong>do</strong>s como resíduos<br />

<strong>do</strong> metabolismo celular os quais eram armaze<strong>na</strong><strong>do</strong>s <strong>em</strong><br />

vacúolos evitan<strong>do</strong>, assim, sua autotoxici<strong>de</strong>z. Atualmente,<br />

acredita-se que os produtos <strong>secundários</strong> sejam biossintetiza<strong>do</strong>s<br />

<strong>na</strong> célula vegetal com fi<strong>na</strong>lida<strong>de</strong>s específicas obe<strong>de</strong>cen<strong>do</strong><br />

estritamente seu código genético e que fatores ambientais só<br />

modul<strong>em</strong> sua produção (9).<br />

Compostos <strong>secundários</strong> e alelopatia<br />

Entre os agentes alelopáticos, exist<strong>em</strong> mais <strong>de</strong> 300 <strong>compostos</strong><br />

<strong>secundários</strong> com diferentes estruturas químicas pertencen<strong>do</strong><br />

a diversas classes. Vários <strong>compostos</strong> orgânicos conheci<strong>do</strong>s<br />

já foram i<strong>de</strong>ntifica<strong>do</strong>s como agentes alelopáticos.<br />

Rice (10) classifica os <strong>compostos</strong> aleloquímicos <strong>em</strong> 14 categorias,<br />

sen<strong>do</strong> elas: áci<strong>do</strong> cinâmico e seus <strong>de</strong>riva<strong>do</strong>s, cumari<strong>na</strong>s,<br />

fenóis simples, <strong>de</strong>riva<strong>do</strong>s <strong>do</strong> áci<strong>do</strong> benzóico e áci<strong>do</strong><br />

gálico, flavonói<strong>de</strong>s, taninos con<strong>de</strong>nsa<strong>do</strong>s e hidrolisa<strong>do</strong>s, terpenói<strong>de</strong>s<br />

e esterói<strong>de</strong>s, áci<strong>do</strong>s orgânicos solúveis <strong>em</strong> água,<br />

lacto<strong>na</strong>s simples insaturadas, áci<strong>do</strong>s graxos <strong>de</strong> ca<strong>de</strong>ia longa,<br />

<strong>na</strong>ftoquino<strong>na</strong>s, antraquino<strong>na</strong>s e quino<strong>na</strong>s, aminoáci<strong>do</strong>s e poliptí<strong>de</strong>os,<br />

alcalói<strong>de</strong>s e cianoidri<strong>na</strong>s, glicosí<strong>de</strong>os, puri<strong>na</strong>s e nucleosí<strong>de</strong>os.<br />

Sabe-se que uma mesma planta é capaz <strong>de</strong> produzir diversos<br />

aleloquímicos e que entre estes se <strong>de</strong>senca<strong>de</strong>iam diversas<br />

interações.<br />

Muitos <strong>compostos</strong> são volatiliza<strong>do</strong>s ou libera<strong>do</strong>s pela<br />

exudação das raízes, sen<strong>do</strong> lixivia<strong>do</strong>s para o solo a partir <strong>de</strong><br />

<strong>plantas</strong> vivas ou mediante resíduos <strong>em</strong> <strong>de</strong>composição. Alguns<br />

<strong>compostos</strong> que chegam no ambiente atuam diretamente <strong>na</strong><br />

inibição <strong>de</strong> germi<strong>na</strong>ção ou crescimento das espécies receptoras<br />

porém, outros apresentam proprieda<strong>de</strong>s alelopáticas<br />

ape<strong>na</strong>s após transformações químicas proporcio<strong>na</strong>das pelos<br />

microrganismos presentes no solo, <strong>de</strong>monstran<strong>do</strong> com isso<br />

que a ativida<strong>de</strong> biológica po<strong>de</strong> ser <strong>potencial</strong>izada por seus<br />

produtos <strong>de</strong> <strong>de</strong>gradação.<br />

Áci<strong>do</strong>s fenólicos e flavonói<strong>de</strong>s estão amplamente distribuí<strong>do</strong>s<br />

nos teci<strong>do</strong>s vegetais e freqüent<strong>em</strong>ente são associa<strong>do</strong>s a<br />

fenômenos alelopáticos. A maior parte <strong>do</strong>s estu<strong>do</strong>s realiza<strong>do</strong>s<br />

t<strong>em</strong> ti<strong>do</strong> como objetivo estabelecer os mecanismos <strong>de</strong><br />

ação <strong>de</strong>ssas duas classes <strong>de</strong> <strong>compostos</strong>.<br />

Áci<strong>do</strong>s fenólicos são mencio<strong>na</strong><strong>do</strong>s como responsáveis<br />

pela redução <strong>de</strong> absorção <strong>de</strong> micro e macronutrientes <strong>em</strong><br />

diversas espécies. Áci<strong>do</strong> ferúlico po<strong>de</strong> atuar <strong>na</strong> inibição da<br />

absorção <strong>de</strong> fosfato enquanto que áci<strong>do</strong> clorogênico po<strong>de</strong><br />

alterar o balanço <strong>de</strong> nutrientes <strong>na</strong>s <strong>plantas</strong>. Os flavonói<strong>de</strong>s<br />

<strong>na</strong>ringeni<strong>na</strong>, genisteí<strong>na</strong> e camferol também interfer<strong>em</strong> direta-<br />

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Artigo<br />

mente <strong>na</strong> absorção <strong>de</strong> minerais essenciais ao <strong>de</strong>senvolvimento<br />

da planta (8,10).<br />

As poliami<strong>na</strong>s alteram a permeabilida<strong>de</strong> da m<strong>em</strong>bra<strong>na</strong> celular.<br />

Tais alterações influenciam diretamente a taxa <strong>de</strong> hidratação<br />

e liberação <strong>de</strong> enzimas, alteran<strong>do</strong>, <strong>de</strong>ssa forma o<br />

processo germi<strong>na</strong>tivo das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> (11,12).<br />

A água é o fator iniciante da germi<strong>na</strong>ção e está envolvida<br />

direta e indiretamente <strong>em</strong> todas as <strong>de</strong>mais etapas <strong>do</strong> metabolismo<br />

germi<strong>na</strong>tivo. Sua participação é <strong>de</strong>cisiva <strong>na</strong>s reações<br />

enzimáticas, solubilização e transporte <strong>de</strong> metabólitos,<br />

como reagente <strong>na</strong> digestão hidrolítica <strong>de</strong> teci<strong>do</strong>s <strong>de</strong> reserva<br />

das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong>. Muitos <strong>compostos</strong> tais como áci<strong>do</strong>s fenólicos,<br />

alcalói<strong>de</strong>s, flavonói<strong>de</strong>s e poliami<strong>na</strong>s alteram a capacida<strong>de</strong> <strong>de</strong><br />

absorção <strong>de</strong> água das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> b<strong>em</strong> como seu <strong>potencial</strong> osmótico<br />

(8,11,13).<br />

Compostos <strong>secundários</strong> como <strong>herbicida</strong>s<br />

Estu<strong>do</strong>s comparativos entre a ação <strong>de</strong> <strong>herbicida</strong>s sintéticos<br />

e <strong>de</strong> substâncias químicas isoladas a partir <strong>de</strong> <strong>plantas</strong><br />

mostram haver alguma s<strong>em</strong>elhança entre sítios e mecanismos<br />

<strong>de</strong> ação.<br />

Um ex<strong>em</strong>plo <strong>de</strong> tal fato pô<strong>de</strong> ser observa<strong>do</strong> entre: cineol<br />

e o <strong>herbicida</strong> cinmetilin. Os <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> 1,8 cineol<br />

e seu análogo 1,4 cineol t<strong>em</strong> suas ativida<strong>de</strong>s fitotóxicas<br />

estudadas <strong>de</strong>s<strong>de</strong> a década <strong>de</strong> 60, sen<strong>do</strong> capazes <strong>de</strong> inibir o<br />

crescimento <strong>de</strong> muitas <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong>. O <strong>herbicida</strong> comercial<br />

cinmetilin, um composto análogo ao cineol (2-benzil étersubstituí<strong>do</strong>)<br />

é intensamente utiliza<strong>do</strong> no controle <strong>de</strong> <strong>plantas</strong><br />

<strong>daninhas</strong> monocotiledôneas. Ambos os <strong>compostos</strong> (tanto o<br />

<strong>na</strong>tural quanto o sintético) apresentam o mesmo mecanismo<br />

<strong>de</strong> ação, causan<strong>do</strong> inibição da síntese da enzima asparagi<strong>na</strong><br />

(14). Entretanto, muitos outros sítios moleculares <strong>de</strong> ação e<br />

ou mecanismo <strong>de</strong> ação, os quais vêm sen<strong>do</strong> observa<strong>do</strong>s <strong>em</strong><br />

certos <strong>compostos</strong> <strong>na</strong>turais, não foram observa<strong>do</strong>s nos <strong>herbicida</strong>s<br />

disponíveis no merca<strong>do</strong>.<br />

Tal constatação é <strong>de</strong> extr<strong>em</strong>a importância uma vez que a<br />

resistência <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> a <strong>herbicida</strong>s ocorre quan<strong>do</strong> se<br />

utiliza um mesmo <strong>herbicida</strong> por muito t<strong>em</strong>po, ou <strong>herbicida</strong>s<br />

diferentes, porém, com o mesmo mecanismo <strong>de</strong> ação. Dessa<br />

forma se faz necessária a <strong>de</strong>scoberta <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> com<br />

diferentes sítios <strong>de</strong> ação quan<strong>do</strong> compara<strong>do</strong>s aos <strong>herbicida</strong>s<br />

tradicio<strong>na</strong>is.<br />

Em um <strong>de</strong> seus trabalhos, Rizvi et al (15) mencio<strong>na</strong>m que<br />

pesticidas obti<strong>do</strong>s a partir <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> são facilmente <strong>de</strong>grada<strong>do</strong>s,<br />

além <strong>de</strong> ser<strong>em</strong> mais sistêmicos, isto é: a ação <strong>de</strong>sse<br />

<strong>herbicida</strong> se dá através da absorção pelas raízes da planta.<br />

Duke et al (16) relatam que produtos fitotóxicos <strong>na</strong>turais<br />

apresentam maiores massas molares e estruturas mais<br />

complexas que <strong>compostos</strong> obti<strong>do</strong>s sinteticamente; observase<br />

uma maior proporção <strong>de</strong> átomos <strong>de</strong> oxigênio e nitrogênio<br />

e a ausência <strong>de</strong> átomos da família <strong>do</strong>s halogênios (flúor, cloro<br />

etc.) os quais são bastante comuns nos <strong>compostos</strong> utiliza<strong>do</strong>s<br />

tradicio<strong>na</strong>lmente como agroquímicos <strong>na</strong> agricultura.<br />

Assim, este trabalho t<strong>em</strong> por objetivo avaliar o <strong>potencial</strong><br />

<strong>herbicida</strong> <strong>de</strong> alguns <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> freqüent<strong>em</strong>ente<br />

i<strong>de</strong>ntifica<strong>do</strong>s <strong>em</strong> extratos vegetais e que têm si<strong>do</strong> aponta<strong>do</strong>s<br />

como <strong>compostos</strong> alelopáticos <strong>na</strong> germi<strong>na</strong>ção <strong>de</strong> <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong><br />

três espécies <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> <strong>encontradas</strong> <strong>em</strong> <strong>pastagens</strong><br />

as quais v<strong>em</strong> causan<strong>do</strong> gran<strong>de</strong>s perdas <strong>na</strong> produtivida<strong>de</strong>.<br />

Mate ria is e Mé t o d o s<br />

Reagentes<br />

Os solventes (hexano, diclorometano, acetato <strong>de</strong> etila e<br />

metanol) foram <strong>de</strong> grau HPLC, obti<strong>do</strong>s da Mallinkrodt, e a<br />

água utilizada foi <strong>de</strong>sionizada pelo sist<strong>em</strong>a Milli-Q (Millipore,<br />

Bedford, MA, USA).<br />

Utilizaram-se padrões <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> com<br />

alto grau <strong>de</strong> pureza obti<strong>do</strong> das fontes: Acros Organics e Sigma<br />

Aldrich Ch<strong>em</strong>ical Co. para a realização <strong>do</strong>s bioensaios.<br />

Para evitar a proliferação <strong>de</strong> fungos <strong>na</strong>s placas <strong>de</strong> Petri<br />

on<strong>de</strong> se efetuaram os bioensaios, utilizou-se Nistati<strong>na</strong> (micostatin)<br />

– Bristol-Myers Squibb Brasil.<br />

Como <strong>plantas</strong> receptoras (<strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong>) foram utilizadas<br />

aquelas com maior freqüência <strong>de</strong> ocorrência <strong>em</strong> áreas<br />

<strong>de</strong> <strong>pastagens</strong> da região Amazônica: Cassia tora (mata-pasto),<br />

Mimosa pudica (malícia) e Cássia occi<strong>de</strong>ntalis (fe<strong>de</strong>goso).<br />

Tais <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> foram coletadas <strong>em</strong><br />

áreas <strong>de</strong> <strong>pastagens</strong> nos municípios <strong>de</strong> Castanhal e Paragomi<strong>na</strong>s,<br />

centros b<strong>em</strong> representativos da pecuária no Pará.<br />

As <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia passaram por um processo <strong>de</strong><br />

“limpeza” utilizan<strong>do</strong> H 2<br />

SO 4<br />

concentra<strong>do</strong>, posterior lavag<strong>em</strong><br />

com água e secag<strong>em</strong> antes <strong>de</strong> ser<strong>em</strong> usadas nos bioensaios.<br />

Bioensaios<br />

Foram realiza<strong>do</strong>s bioensaios com soluções conten<strong>do</strong> cada<br />

um <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> <strong>na</strong> concentração 5 mg L -1 e uma solução<br />

mista conten<strong>do</strong> to<strong>do</strong>s os <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> estuda<strong>do</strong>s<br />

<strong>na</strong> mesma concentração.<br />

As soluções foram adicio<strong>na</strong>das ape<strong>na</strong>s uma vez, no início<br />

<strong>do</strong>s bioensaios, sen<strong>do</strong> adicio<strong>na</strong>da, a partir <strong>de</strong> então, ape<strong>na</strong>s a<br />

solução 0,2% <strong>de</strong> micostatin (para evitar proliferação <strong>de</strong> fungos<br />

<strong>na</strong>s placas) <strong>em</strong> água <strong>de</strong>stilada.<br />

Cada placa <strong>de</strong> Petri <strong>de</strong> 9,0 cm <strong>de</strong> diâmetro, forrada com<br />

uma folha <strong>de</strong> papel <strong>de</strong> filtro, recebeu 5,0 mL das soluções<br />

<strong>em</strong> solventes apropria<strong>do</strong>s. Após a evaporação <strong>do</strong> solvente<br />

adicio<strong>na</strong>ram-se 2 mL <strong>de</strong> uma solução 0,2% <strong>de</strong> micostatin <strong>em</strong><br />

água <strong>de</strong>stilada, receben<strong>do</strong>, então, 25 <strong>s<strong>em</strong>entes</strong>. Para efeitos<br />

<strong>de</strong> comparação, foi realiza<strong>do</strong> um tratamento test<strong>em</strong>unha<br />

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Artigo<br />

(controle) no qual se utilizaram ape<strong>na</strong>s 5 mL <strong>de</strong> solvente e<br />

após evaporação <strong>do</strong> mesmo 2 mL da solução 0,2% <strong>de</strong> micostatin<br />

<strong>em</strong> água <strong>de</strong>stilada, seguin<strong>do</strong> a partir daí o mesmo procedimento<br />

realiza<strong>do</strong> <strong>na</strong>s placas on<strong>de</strong> se aplicaram as soluções<br />

com os <strong>compostos</strong>.<br />

O bioensaio foi <strong>de</strong>senvolvi<strong>do</strong> <strong>em</strong> câmara <strong>de</strong> germi<strong>na</strong>ção<br />

à t<strong>em</strong>peratura constante <strong>de</strong> 25 0 C e fotoperío<strong>do</strong> <strong>de</strong> 12 horas.<br />

A germi<strong>na</strong>ção foi monitorada por um perío<strong>do</strong> <strong>de</strong> 15 dias com<br />

contag<strong>em</strong> diária e elimi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> germi<strong>na</strong>das. A<br />

germi<strong>na</strong>ção foi a<strong>na</strong>lisada sob o aspecto percentual.<br />

Os bioensaios foram realiza<strong>do</strong>s <strong>em</strong> triplicata e a porcentag<strong>em</strong><br />

<strong>de</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> foi calculada<br />

utilizan<strong>do</strong>-se a equação 1:<br />

Inibição da Germi<strong>na</strong>ção (%)<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

• malícia<br />

• mata pasto<br />

• fe<strong>de</strong>goso<br />

1 2 3 4 5<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

<br />

(1)<br />

Figura 2. Inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> frente aos áci<strong>do</strong>s fenólicos.<br />

1.áci<strong>do</strong> clorogênico, 2.áci<strong>do</strong> cafeico, 3.áci<strong>do</strong> ferúlico, 4.áci<strong>do</strong> p-anísico,<br />

5.mistura<br />

on<strong>de</strong>: I (%) - porcentag<strong>em</strong> <strong>de</strong> inibição<br />

SG AMOSTRA<br />

- <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> germi<strong>na</strong>das <strong>na</strong>s placas <strong>de</strong> Petri <strong>na</strong>s quais<br />

s<strong>em</strong> aplicaram os extratos.<br />

SG CONTROLE -<br />

<strong>s<strong>em</strong>entes</strong> germi<strong>na</strong>das <strong>na</strong>s placas <strong>de</strong> Petri on<strong>de</strong> não<br />

foram aplica<strong>do</strong>s os extratos (branco)<br />

Re s u l t a d o s e Discussão<br />

Potencial <strong>herbicida</strong> <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> sobre<br />

a germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong><br />

A Figura 1 apresenta os resulta<strong>do</strong>s obti<strong>do</strong>s ao utilizar<br />

soluções <strong>do</strong>s alcalói<strong>de</strong>s. Atropi<strong>na</strong> foi mais eficaz <strong>na</strong><br />

Inibição da Germi<strong>na</strong>ção (%)<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

• malícia<br />

• mata pasto<br />

• fe<strong>de</strong>goso<br />

1 2 3 4 5 6 7 8<br />

Figura 3. Inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> frente aos áci<strong>do</strong>s carboxílicos.<br />

1.áci<strong>do</strong> oxálico, 2.áci<strong>do</strong> maleico, 3.áci<strong>do</strong> malônico, 4.áci<strong>do</strong> tartárico, 5.áci<strong>do</strong><br />

málico, 6.áci<strong>do</strong> aspártico, 7.áci<strong>do</strong> cítrico, 8.mistura<br />

Inibição da Germi<strong>na</strong>ção (%)<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

• malícia<br />

• mata pasto<br />

• fe<strong>de</strong>goso<br />

1 2 3<br />

Figura 1. Inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> frente aos alcalói<strong>de</strong>s<br />

1.cinconidi<strong>na</strong>, 2.atropi<strong>na</strong>, 3.mistura<br />

inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong><br />

quan<strong>do</strong> comparada a cinconidi<strong>na</strong>, as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia<br />

foram as mais sensíveis a ambos os <strong>compostos</strong>. Ao<br />

realizarmos bioensaio utilizan<strong>do</strong> uma solução <strong>na</strong> qual se<br />

acrescentou os <strong>do</strong>is <strong>compostos</strong>, observa-se um ligeiro<br />

aumento <strong>do</strong> efeito inibitório sobre as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> mata<br />

pasto e fe<strong>de</strong>goso.<br />

Ao utilizar áci<strong>do</strong>s fenólicos (Figura 2) também foi observada<br />

maior sensibilida<strong>de</strong> das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia, os valores <strong>de</strong><br />

inibição variaram <strong>de</strong>: 5,1% para as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> mata pasto a<br />

53,4% para <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia ambas submetidas à solução<br />

<strong>de</strong> áci<strong>do</strong> ferúlico.<br />

As <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> fe<strong>de</strong>goso não sofreram inibição quan<strong>do</strong><br />

expostas aos áci<strong>do</strong> cafeico e p-anísico. Observa-se aumento<br />

<strong>de</strong> inibição <strong>de</strong> germi<strong>na</strong>ção <strong>de</strong> todas as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> ao utilizar a<br />

mistura com to<strong>do</strong>s os áci<strong>do</strong>s fenólicos.<br />

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Inibição da Germi<strong>na</strong>ção (%)<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

• malícia<br />

• mata pasto<br />

• fe<strong>de</strong>goso<br />

1 2 3 4 5 6<br />

Figura 4. Inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> frente<br />

aos flavonói<strong>de</strong>s<br />

1.genisteí<strong>na</strong>, 2.ruti<strong>na</strong>, 3.<strong>na</strong>ringeni<strong>na</strong>, 4.camferol, 5.querceti<strong>na</strong>, 6.mistura<br />

Inibição da Germi<strong>na</strong>ção (%)<br />

100<br />

80<br />

60<br />

40<br />

20<br />

0<br />

• malícia<br />

• mata pasto<br />

• fe<strong>de</strong>goso<br />

1 2 3<br />

Figura 5. Inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> frente<br />

às poliami<strong>na</strong>s.<br />

1.diaminobutano, 2.diaminopentano, 3.mistura<br />

A Figura 3 apresenta os resulta<strong>do</strong>s obti<strong>do</strong>s ao utilizarmos<br />

áci<strong>do</strong>s carboxílicos nos bioensaios.<br />

Não foi constatada inibição <strong>de</strong> germi<strong>na</strong>ção ao utilizar áci<strong>do</strong><br />

oxálico, maleico, malônico e aspártico para nenhuma das<br />

<strong>s<strong>em</strong>entes</strong> utilizadas nos bioensaios. Os áci<strong>do</strong>s tartárico, málico<br />

e cítrico, porém, se mostraram eficientes ape<strong>na</strong>s para<br />

as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia sen<strong>do</strong> os valores <strong>de</strong> inibição menores<br />

que 20%. Ao utilizarmos a mistura <strong>de</strong> áci<strong>do</strong>s carboxílicos<br />

observou-se inibição da germi<strong>na</strong>ção <strong>de</strong> todas as espécies, os<br />

valores obti<strong>do</strong>s foram: 26, 30 e 35% para as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong><br />

malícia, mata pasto e fe<strong>de</strong>goso, respectivamente.<br />

A Figura 4 apresenta os resulta<strong>do</strong>s obti<strong>do</strong>s ao utilizar<br />

soluções <strong>do</strong>s flavonói<strong>de</strong>s: Constatou-se que genisteí<strong>na</strong>, <strong>na</strong>-<br />

ringeni<strong>na</strong> e querceti<strong>na</strong> foram eficazes <strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção<br />

<strong>de</strong> todas as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong>, os valores <strong>de</strong> inibição variaram<br />

<strong>de</strong> 10,6% ao utilizar <strong>na</strong>ringeni<strong>na</strong> <strong>em</strong> <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> fe<strong>de</strong>goso a<br />

42,6% quan<strong>do</strong> se utilizou <strong>na</strong>ringeni<strong>na</strong> <strong>na</strong>s <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> malícia.<br />

Ruti<strong>na</strong> e camferol não se mostraram ativas <strong>na</strong> inibição da<br />

germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> fe<strong>de</strong>goso. Para este caso também<br />

foi observa<strong>do</strong> aumento <strong>na</strong> porcentag<strong>em</strong> <strong>de</strong> inibição <strong>de</strong><br />

germi<strong>na</strong>ção ao utilizarmos a mistura <strong>do</strong>s flavonói<strong>de</strong>s quan<strong>do</strong><br />

compara<strong>do</strong> aos bioensaios utilizan<strong>do</strong> soluções <strong>de</strong> ape<strong>na</strong>s um<br />

<strong>do</strong>s <strong>compostos</strong>.<br />

A Figura 5 mostra os gráficos <strong>de</strong> barras obti<strong>do</strong>s ao utilizar<br />

poliami<strong>na</strong>s nos bioensaios.<br />

Diaminobutano e diaminopentano foram eficazes <strong>na</strong> inibição<br />

<strong>de</strong> todas as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> estudadas, os<br />

valores <strong>de</strong> inibição variaram <strong>de</strong> 30% a 65%. Ao avaliarmos o<br />

efeito da mistura <strong>de</strong> ambas as ami<strong>na</strong>s, observamos aumento<br />

<strong>na</strong> porcentag<strong>em</strong> <strong>de</strong> inibição, os valores encontra<strong>do</strong>s foram:<br />

55% para fe<strong>de</strong>goso e 70% para malícia e mata pasto.<br />

A Figura 6 mostra uma comparação com relação à eficiência<br />

<strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong><br />

<strong>daninhas</strong> entre as diversas classes <strong>de</strong> <strong>compostos</strong>.<br />

O gráfico foi feito com base <strong>na</strong> média das inibições observadas<br />

para as três <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> (malícia, mata pasto e fe<strong>de</strong>goso)<br />

ao utilizar a mistura para cada uma das classes <strong>de</strong> <strong>compostos</strong><br />

estuda<strong>do</strong>s.<br />

Os alcalói<strong>de</strong>s e as poliami<strong>na</strong>s se mostraram mais eficazes<br />

<strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong><br />

estudadas. Os áci<strong>do</strong>s carboxílicos foram os menos eficientes.<br />

Co n c l u s õ e s<br />

A maioria <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> estudada apresentou ativida<strong>de</strong><br />

<strong>herbicida</strong> <strong>na</strong> germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> das <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> estudadas.<br />

Os áci<strong>do</strong>s tartárico, málico e cítrico foram eficientes<br />

ape<strong>na</strong>s nos bioensaios com <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> da planta daninha malícia.<br />

12%<br />

17%<br />

19%<br />

12%<br />

17%<br />

26%<br />

19%<br />

26%<br />

26% ● alcalói<strong>de</strong>s ● áci<strong>do</strong>s fenólicos<br />

● alcalói<strong>de</strong>s ● áci<strong>do</strong>s fenólicos ● áci<strong>do</strong>s carboxílicos<br />

● áci<strong>do</strong>s carboxílicos ● flavonói<strong>de</strong>s ● poliami<strong>na</strong>s<br />

● flavonói<strong>de</strong>s ● poliami<strong>na</strong>s<br />

Figura 6. Eficiência das diferentes classes <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> <strong>na</strong> inibição da<br />

germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong><br />

26%<br />

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Artigo<br />

Os <strong>de</strong>mais áci<strong>do</strong>s carboxílicos não se mostraram bioativos para<br />

nenhuma das espécies <strong>de</strong> <strong>s<strong>em</strong>entes</strong> utilizadas nos ensaios.<br />

Observou-se especificida<strong>de</strong> <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> com relação<br />

às <strong>s<strong>em</strong>entes</strong>. A s<strong>em</strong>ente <strong>de</strong> malícia foi a mais sensível e a <strong>de</strong><br />

fe<strong>de</strong>goso a menos sensível à ação <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong>.<br />

Os <strong>compostos</strong> da classe <strong>do</strong>s alcalói<strong>de</strong>s e das poliami<strong>na</strong>s<br />

foram os mais eficientes <strong>na</strong> inibição da germi<strong>na</strong>ção das <strong>s<strong>em</strong>entes</strong><br />

<strong>de</strong> <strong>plantas</strong> <strong>daninhas</strong> enquanto que áci<strong>do</strong>s carboxílicos<br />

foram os menos eficientes.<br />

Constatou-se um aumento no grau <strong>de</strong> inibição das misturas<br />

<strong>do</strong>s <strong>compostos</strong> quan<strong>do</strong> compara<strong>do</strong>s aos bioensaios<br />

realiza<strong>do</strong>s com os mesmos <strong>em</strong> separa<strong>do</strong> para todas as <strong>s<strong>em</strong>entes</strong><br />

sugerin<strong>do</strong> a possibilida<strong>de</strong> <strong>de</strong> efeito sinergístico entre<br />

os <strong>compostos</strong>.<br />

O <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> <strong>herbicida</strong>s mediante estu<strong>do</strong>s<br />

com <strong>compostos</strong> <strong>secundários</strong> t<strong>em</strong> um longo caminho a seguir.<br />

Este estu<strong>do</strong> se esten<strong>de</strong> <strong>de</strong>s<strong>de</strong> a i<strong>de</strong>ntificação (feita no<br />

campo) <strong>de</strong> <strong>plantas</strong> as quais apresent<strong>em</strong> ativida<strong>de</strong> alelopática,<br />

até o <strong>de</strong>senvolvimento <strong>de</strong> meto<strong>do</strong>logias a<strong>na</strong>líticas eficientes<br />

<strong>de</strong> extração, caracterização e i<strong>de</strong>ntificação <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong><br />

<strong>secundários</strong> responsáveis pela inibição. Além das etapas citadas<br />

acima, é necessário, também, um intenso estu<strong>do</strong> <strong>de</strong>termi<strong>na</strong>n<strong>do</strong><br />

o mo<strong>do</strong> <strong>de</strong> ação <strong>de</strong>ssas substâncias, seu comportamento<br />

no ambiente b<strong>em</strong> como sua toxicida<strong>de</strong> para<br />

animais e o hom<strong>em</strong>.<br />

É importante salientar que o fato <strong>de</strong> tais <strong>compostos</strong> ter<strong>em</strong><br />

orig<strong>em</strong> <strong>na</strong>tural, não indica que sejam ambientalmente corretos.<br />

Tanto a planta <strong>do</strong>a<strong>do</strong>ra como a receptora estão inseridas<br />

<strong>em</strong> <strong>de</strong>termi<strong>na</strong><strong>do</strong> ambiente, viven<strong>do</strong> <strong>em</strong> equilíbrio. Sen<strong>do</strong><br />

assim, a liberação <strong>na</strong>tural <strong>de</strong> <strong>compostos</strong> tóxicos por <strong>de</strong>termi<strong>na</strong>da<br />

espécie po<strong>de</strong> não apresentar riscos àquele ambiente,<br />

porém quan<strong>do</strong> o objetivo é a utilização <strong>de</strong> tal composto <strong>em</strong><br />

larga escala é necessário um longo estu<strong>do</strong> a fim <strong>de</strong> <strong>de</strong>termi<strong>na</strong>r<br />

o comportamento <strong>do</strong> mesmo no ambiente. Fenômenos<br />

como <strong>de</strong>gradação, translocação e adsorção <strong>de</strong>v<strong>em</strong> ser minuciosamente<br />

estuda<strong>do</strong>s. Além da toxicida<strong>de</strong> aguda (a curto<br />

prazo) e crônica (a longo prazo) nos animais e no hom<strong>em</strong>.<br />

Alcalói<strong>de</strong>s como berberi<strong>na</strong>, quini<strong>na</strong> e co<strong>de</strong>í<strong>na</strong>, por ex<strong>em</strong>plo,<br />

são potentes inibi<strong>do</strong>res, porém a utilização <strong>de</strong> tais <strong>compostos</strong><br />

como <strong>herbicida</strong>s se encontra limitada <strong>de</strong>vi<strong>do</strong> à alta<br />

toxicida<strong>de</strong> <strong>do</strong>s mesmos para animais.<br />

Outro parâmetro a se avaliar é a seletivida<strong>de</strong> <strong>do</strong>s <strong>compostos</strong><br />

uma vez que tal característica é extr<strong>em</strong>amente <strong>de</strong>sejável<br />

<strong>em</strong> se tratan<strong>do</strong> <strong>de</strong> <strong>herbicida</strong>s.<br />

Ag r a d e c im e n t o s<br />

Os autores agra<strong>de</strong>c<strong>em</strong> à FAPESP e CAPES pelo suporte<br />

fi<strong>na</strong>nceiro e à EMBRAPA Amazônia Oriental pelas <strong>s<strong>em</strong>entes</strong><br />

cedidas.<br />

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