11.01.2013 Views

1. Úvod

1. Úvod

1. Úvod

SHOW MORE
SHOW LESS

Create successful ePaper yourself

Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.

Základy kapilární izotachoforézy<br />

Z rovnice vyplývá, že vysoké rozlišovací schopnosti IEF je dosaženo minimalizací<br />

d(<br />

pH )<br />

směrnice pH gradientu v separační části, aplikací vysokých intenzit<br />

dx<br />

elektrického pole (E), fokuzací látek s nízkým difúzním koeficientem (Di) nebo<br />

snížením difúze vlivem stabilizujícího prostředí (gel) a velkou změnou pohyblivostí v<br />

okolí svého izoelektrického bodu<br />

proteiny lišící se o 0,005 pI jednotek.<br />

2.<strong>1.</strong>4 Izotachoforéza<br />

dmi . Ve určitých případech je možné rozlišit<br />

d(<br />

pH )<br />

Při izotachoforéze se používají dva základní elektrolyty, vedoucí (leading) a koncový<br />

(terminating). Vedoucí elektrolyt obsahuje vedoucí ion, který má větší efektivní<br />

pohyblivost (v absolutní hodnotě) než všechny analyzované ionty vzorku. Koncový<br />

(zakončující) elektrolyt obsahuje koncový ion, který má menší efektivní pohyblivost<br />

než kterýkoliv ion vzorku. V jedné analýze je možné separovat pouze jeden druh<br />

iontů, tj. anionty nebo kationty. Při separaci aniontů je na začátku experimentu<br />

anodový a separační prostor vyplněn vedoucím elektrolytem (viz Obrázek 5). Tento<br />

elektrolyt obsahuje kromě vedoucího aniontu (bývá používán nejčastěji chloridový<br />

anion, pro kationické analýzy draselný či amonný kation) kation, tzv. protiion, který<br />

spolu s vedoucím aniontem tvoří pH tlumící směs. Katodová část je vyplněná<br />

roztokem zakončujícího elektrolytu. Roztok obsahující analyzovaný materiál se<br />

vkládá mezi vedoucí a koncový elektrolyt. Vložením stejnosměrného elektrického<br />

proudu se anionty začnou pohybovat k anodě. Vzhledem k tomu, že v době startu<br />

analýzy se nacházejí všechny anionty vzorku v oblasti shodné intenzity elektrického<br />

pole E pohybují se podle rovnice (1) různými rychlostmi, které jsou úměrné jejich<br />

efektivním pohyblivostem. Vedle rovnice (1) podmiňující separaci iontů A a B musí<br />

být v každém místě separačního prostoru splněny čtyři podmínky:<br />

<strong>1.</strong> Ohmův zákon<br />

E ⋅κ =<br />

i<br />

(rovnice 5)<br />

12 CITP v analýze potravin

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!