1. Úvod

More documents

Recommendations

Info

Základy kapilární izotachoforézy Obsahuje-li vedoucí elektrolyt méně pohyblivou nečistotu než vedoucí ion, tvoří směsné zóny všechny ionty pohyblivější než nečistota. Nečistoty ve vedoucím elektrolytu vedou k reprodukovatelným nadbytečným zónám při opakovaném pokusu. Vedoucí elektrolyt s větším obsahem nečistot prostě nelze použít. Požadavky na čistotu chemikálií pro přípravu vedoucího elektrolytu jsou méně přísné, protože se nečistoty koncentrují jen z relativně malého objemu separační kapiláry. Jiná situace je ovšem u látek použitých jako zdroj protiiontu, které nesmí obsahovat žádné nečistoty poskytující koprotiionty. Ve vzorku se mohou objevit nečistoty pohyblivější než vedoucí nebo méně pohyblivé než zakončující ion. Pronikají pak do obou elektrolytů, pohybují se zde mechanismem zónové elektroforézy, nelze je izotachoforeticky stanovit, ale separaci ostatních složek vzorku neruší. Tohoto jevu se využívá k eliminaci předchozích dlouhých zón (těch, které nás nezajímají) volbou méně pohyblivého vedoucího iontu. Posledním důležitým aspektem, který vždy musíme uvážit před separací, jsou změny ve složení elektrolytů při opakovaných analýzách. To se týká hlavně rezervoáru vedoucího elektrolytu (viz Obrázek 34), v němž dochází ke změnám koncentrace vedoucího iontu, protiiontu a změnám pH. Vzhledem k tomu, že změny koncentrace vedoucího iontu mohou vést prostřednictvím Kohlrauschovy regulační funkce ke změnám zón a změny pH vedoucího elektrolytu ke změnám vodivostí zón slabých elektrolytů, musíme zjistit, kolik pokusů můžeme provést bez výměny vedoucího elektrolytu v rezervoáru. V následující tabulce jsou uvedeny změny ve složení a pH vedoucího elektrolytu v rezervoáru v závislosti na počtu provedených analýz. Výsledek ukazuje, že změny ve složení elektrolytu HCl/BALA jsou významné po zhruba 20 analýzách a změna pHLE v rezervoáru může vyvolat změnu v efektivní pohyblivosti složek. Zejména v citlivých případech slabých elektrolytů může zapříčinit změnu pořadí separovaných zón i při použití ideálně pufrujícího vedoucího elektrolytu. Daleko výrazněji se však projeví změna ve složení elektrolytu při práci s vedoucím elektrolytem, jehož pH není v oblasti maximální pufrační kapacity protiiontu (tedy pHLE ≠ pKP), jak dokumentují údaje v TABULCE 4 B, kdy je rozdíl 44 CITP v analýze potravin
Základy kapilární izotachoforézy (pokles j ) pH vedoucího elektrolytu v nádobce již po páté analýze téměř 0,5 jednotky pH. TABULKA 4 Vliv počtu analýz na složení a pH vedoucího elektrolytu v nádobce o objemu 5 ml; počítáno pro vedoucí elektrolyt o složení (A) 10 mM-HCl + 20 mM-BALA (pHLE ≈ pKBALA=3,55); (B) 10 mM-HCl + 5.5 mM-BTP, pH 6,2 a analýzu trvající 10 min při hnacím proudu 100 µA m = - 80.10 -5 cm 2 V -1 s -1 a m + = 40.10 -5 cm 2 V -1 s -1 , m + = (výpočty provedeny pro − Cl 20.10 -5 cm 2 V -1 s -1 , m + + = 40.10 -5 cm 2 V -1 s -1 ) A BTP Počet analýz cBALA + (mM) cBALA + (mM) cCl - (mM) pHLE 0 10 10 10 3,55 10 9,45 10,82 10,82 3,49 20 7,59 11,61 11,61 3,37 30 6,31 12,46 12,46 3,26 B Počet analýz cBTP + (mM) cBTP ++ (mM) cCl - (mM) pHLE 0 0,92 4,58 10 6,10 1 0,81 4,74 10,07 6,03 5 0,37 5,38 10,70 5,64 8 0,04 5,86 10,56 4,63 K velké změně složení elektrolytu dochází též při použití pohyblivějšího koprotiiontu v malé koncentraci, který opouští rezervoár rychleji než pufrující protiion. V některých případech je nutno vyměnit obsah rezervoáru i po každé analýze. j u kationické analýzy jde analogicky o vzestup pH CITP v analýze potravin 45 BALA BTP
Page 1 and 2: 1. Úvod Úvod Od poloviny 19. stol
Page 3 and 4: Úvod K významným zahraničním p
Page 5 and 6: 2. Základy kapilární izotachofor
Page 7 and 8: 2.1.1 Zónová elektroforéza Zákl
Page 9 and 10: Základy kapilární izotachoforéz
Page 23 and 24: Λ = Λ 0 ⎡ 5 3 8, 204 ⋅10 8, 2
Page 29 and 30: Výpočet vedoucí zóny Základy k
Page 31 and 32: Výpočet parametrů zóny vzorku Z
Page 33 and 34: c t S − c ⎧ ⎪⎡ nB ⎛ i /
Page 43: Základy kapilární izotachoforéz
Page 47 and 48: Izotachoforetická analýza zařadi
Page 49 and 50: Separační proces Izotachoforetick
Page 51 and 52: TABULKA 5 Izotachoforetická analý
Page 53 and 54: S A = F I ∂n ⋅ ∂t A ⎛ k ⎜
Page 55 and 56: Izotachoforetická analýza Napří
Page 57 and 58: R L l X X h X - hL čas l St St h S
Page 59 and 60: RSH X = h h X T − h − h L L Izo
Page 61 and 62: Izotachoforetická analýza V izota
Page 63 and 64: Izotachoforetická analýza kontinu
Page 65 and 66: Izotachoforetická analýza Separac
Page 67 and 68: Izotachoforetická analýza zaveden
Page 69 and 70: Ostatní techniky Izotachoforetick
Page 71 and 72: 4. Volba pracovních elektrolytů V
Page 73 and 74: Volba pracovních elektrolytů akce
Page 75 and 76: TABULKA 7 Základní doporučené o
Page 77 and 78: Volba pracovních elektrolytů kov
Page 79 and 80: Volba pracovních elektrolytů náz
Page 81 and 82: Volba pracovních elektrolytů Tato
Page 83 and 84: Volba pracovních elektrolytů př
Page 85 and 86: Volba pracovních elektrolytů �
Page 87 and 88: Volba pracovních elektrolytů kyse
Page 89 and 90: Instrumentace pro kapilární izota
Page 95 and 96:
Instrumentace pro kapilární izota
Page 97 and 98:
Page 99 and 100:
5.4 Řídící a vyhodnocovací č
Page 101 and 102:
5.5.1 IONOSEP 900.1 Instrumentace p
Page 103 and 104:
Page 105 and 106:
6. Aplikace CITP v analýze potravi
Page 107 and 108:
Aplikace CITP v analýze potravin V
Page 109 and 110:
Aplikace CITP v analýze potravin S
Page 111 and 112:
6.1.2 Anorganické anionty Aplikace
Page 113 and 114:
Aplikace CITP v analýze potravin t
Page 115 and 116:
Aplikace CITP v analýze potravin S
Page 117 and 118:
Aplikace CITP v analýze potravin i
Page 119 and 120:
Aplikace CITP v analýze potravin b
Page 121 and 122:
Aplikace CITP v analýze potravin k
Page 123 and 124:
Aplikace CITP v analýze potravin a
Page 125 and 126:
Aplikace CITP v analýze potravin f
Page 127 and 128:
Aplikace CITP v analýze potravin c
Page 129 and 130:
6.2.4 Regulátory kyselosti Aplikac
Page 131 and 132:
6.2.6 Látky chuťové a povzbuzuj
Page 133 and 134:
Aplikace CITP v analýze potravin P
Page 135 and 136:
Aplikace CITP v analýze potravin p
Page 137 and 138:
6.3.3 Ostatní kontaminanty Aplikac
Page 139 and 140:
Použitá literatura 16 Hirokawa T.
Page 141 and 142:
Použitá literatura 48 Blatný P.,
Page 143 and 144:
Použitá literatura 77 Fanali S.,
Page 145 and 146:
Použitá literatura 105 Blatný P.
Page 147 and 148:
Použitá literatura 138 Stover F.S
Page 149:
Použitá literatura 167 Stránský
show all

1. Úvod

Create successful ePaper yourself

Delete template?

Save as template?