Untersuchungen zur Kapazitation und Hyperaktivierung equiner ...

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Literaturübersicht Der Effekt von Pentoxifyllin und dem Antioxidans Trolox (6-Hydroxy-2,5,7,8- tetramethylchroman-2-carboxylsäure) auf Tiefgefriersamen vom Hengst wurde von SILVA et al. (2009) untersucht. Während Pentoxifyllin keinen Einfluss auf die Motilität hatte, erhielt Trolox die Motilität auch nach zweistündiger Inkubation. Trolox ist ein wasserlösliches Vitamin E-Analogon mit einer starken antioxidativen Wirkung (MICKLE und WEISEL 1993). Laut AITKEN et al. (1989) gehen viele Fälle gestörter Spermienfunktion mit erhöhten Werten freier Radikale einher. Diese könnten zur Peroxidation der ungesättigten Fettsäuren in der Akrosommembran und folgend zum Verlust der Reaktivität auf den die Akrosomreaktion auslösenden Calciumeinstrom führen. Trolox wurde bereits als Antioxidans beim Einfrieren von Ebersamen und für Frischsamen vom Hengst genutzt. Während der Einsatz von Trolox im Einfrierprozess positive Auswirkungen auf die Motilität des aufgetauten Eberspermas hat (PEŇA et al. 2003), hatte es keine signifikante Wirkung auf die Motilität von auf 5˚C gekühltem Hengstsperma (BALL et al. 2001). Bish er scheinen keine Untersuchungen auf die Wirkung von Trolox auf Kapazitation oder Hyperaktivität vorzuliegen. 8
Literaturübersicht Tabelle 1: Biomarker für die Kapazitation [modifiziert nach VARNER und JOHNSON (2011)] Messprinzip Methode Farbstoff Quelle Membranlipide in größerer Unordnung Umverteilung der Hyaluronidase Verteilung von membranständigen Lektinrezeptoren Cholesteringehalt der Zellmembran Laterale Beweglichkeit der Membranlipide Durchflusszytometrie Merocyanin 540 1, 2 Fluoreszenzmikroskopie Immunfluoreszenz 3 Durchflusszytometrie oder Fluoreszenzmikroskopie Fluoreszenzanisotrophie oder Luminiszenz- Spektrophotometrie oder Fluoreszenzmikroskopie Wiedererlangen der Fluoreszenz nach Bleichen (FRAP) oder Spektrophotometrie oder Fluoreszenzmikroskopie 9 Fluoreszierende Lektine 1,6-Diphenyl-1,3,5- hexatrien oder Filipin Fluoreszierende Lipide 4, 5, 6 5, 7, 8, 9 10, 11 Membranpotential Spektrofluometrie DiSC3(5) 12, 13 Tyrosinphosphorylie- rung Immunelektrophorese oder Immunoblotting oder Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie Aminophospholipide Durchflusszytometrie oder konfokale Mikroskopie Monoklonale Antikörper gegen Phosphotyrosin Annexin-V oder Ro- SA-FL 12, 14, 15, 16 pH im Zytosol Spektrofluometrie BCECF-AM 17, 18 Ca 2+ im Zytosol Durchflusszytometrie oder Spektrofluometrie FURA-2 oder Fluo3- AM 7 13, 19, 20, 21, 22
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