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2. Methoden und Materialen 23
2. Methoden und Materialien
2.1 Mikrogliale Antwort im verletzten Nervensystem
2.1.1 Tiermodell: Der axotomierte motorische Fazialiskern der Maus
Die meisten experimentellen Tiermodelle für Verletzungen des zentralen Nervensystems
(z.B. Ischämie, Infektion oder direktes Schädelhirntrauma) gehen mit einer frühen Störung
der Bluthirnschranke und der damit verbundenen frühen Einwanderung von
Blutmakrophagen einher (Dickson et al., 1993; Mc Geer et al.,1993). Das Antigenprofil der
Makrophagen stimmt weitgehend mit dem der residenten aktivierten Mikroglia überein, so
dass keine eindeutige Differenzierung zwischen beiden Zelltypen vorgenommen werden
kann (Perry und Gordon, 1988; Gräber und Streit, 1990; Kreutzberg, 1996). Dieses Problem
wird durch das Tiermodell der Fazialisaxotomie umgangen. Auf Grund der großen
Entfernung der Läsionsstelle vom Ncl. facialis kommt es weder zu einer Einwanderung von
Makrophagen oder Granulozyten ins ZNS, noch zu einer erhöhten Durchlässigkeit der BBB
für Serumproteine (Kreutzberg, 1996; Werner et al., 1998). Des weiteren lässt sich der rein
motorische Fazialiskern der Maus eindeutig vom umgebenden Hirnstamm abgrenzen,
enthält ausreichend viel Gewebe für quantitativ immunhistochemische Untersuchungen und
bietet in jedem Gehirnschnitt mit dem kontralateralen Ncl. facialis eine unmittelbare
endogene Negativkontrolle. Im weiteren Verlauf kommt es nach der Durchtrennung des N.
facialis in der Maus zu einem verzögerten Untergang von Nervenzellen sowie zur
spezifischen Einwanderung von Lymphozyten, die an Knötchen von phagozytierender
Mikroglia adhärieren (Möller et al., 1996; Raivich et al., 1998a).
Vor Durchführung der Tierversuche erging eine Genehmigung der Regierung von
Oberbayern (AZ 211-2531-10/93 und AZ 211-2531-37/97). Die Operation wurde unter
Anästhesie mit einer intraperitonealen Injektion von 0.4 ml/g Körpergewicht Triobromethanol
(Avertin; Sigma, Deisenhofen, Deutschland) an drei bis sechs Monate alten Mäusen
durchgeführt. Zunächst wurde ein Teil des Felles im Bereich des rechten Ohres ausrasiert,