PLATELIAâ„¢ CANDIDA Ag - Bio-Rad
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• der Beschichtung der Vertiefungen der Mikrotiterplatte und die Bindung des<br />
Mannan-Antigens,<br />
• dem Nachweis des an die sensibilisierte Mikrotiterplatte (Konjugatreagenz:<br />
mit Peroxidase markierter monoklonaler Antikörper) gebundenen Antigens.<br />
Die Serumproben werden in Anwesenheit von EDTA hitzebehandelt, um die<br />
Immunkomplexe zu trennen und die Serumproteine, die mit dem Test<br />
interferieren könnten, auszufällen.<br />
Die hitzebehandelten Serumproben und das Konjugat werden in die mit<br />
monoklonalem Antikörper beschichteten Vertiefungen gegeben und inkubiert.<br />
In Anwesenheit von Mannan-Antigen wird ein monoklonaler Antikörper –<br />
Mannan - monoklonaler Antikörper/Peroxidase-Komplex gebildet. Die<br />
Teststreifen werden gewaschen, um ungebundenes Material zu entfernen.<br />
Anschließend wird die Substratlösung zugesetzt, die mit den an die Vertiefung<br />
gebundenen Komplexen reagiert und eine blaue Reaktionsfarbe erzeugt. Die<br />
Enzymreaktion wird durch Zugabe von Säure gestoppt, so dass die Farbe von<br />
blau in gelb wechselt. Die Extinktion (optische Dichte) der Proben, Kontrollen<br />
und Bereichspunkte wird mit Hilfe eines Spektrophotometers bei einer<br />
Wellenlänge von 450 und 620 nm bestimmt.<br />
Der Test kann gemäß den folgenden zwei Verfahren durchgeführt werden:<br />
• Quantitatives Verfahren: durch Erstellen einer Kalibrierungskurve aus<br />
4 Bereichspunkten: 2,0 ; 1,0 ; 0,5 und 0,25 ng/mL. Die Ergebnisse der<br />
Testproben werden in ng Mannan pro mL Serum ausgedrückt.<br />
• Qualitatives Verfahren: Es werden nur die Bereichspunkte 0,25 ng/mL und<br />
0,5 ng/mL verwendet. Ein Vergleich zwischen der Extinktion der Testproben<br />
und der Extinktion der beiden Bereichspunkte ermöglicht eine Bestimmung<br />
der Ergebnisse als negative, mäßige oder positive Seren.<br />
5- REAGENZIEN<br />
Platelia Candida <strong>Ag</strong>: Produkt Nr. 62798 (96 Tests)<br />
Lagerung des Kits bei +2-8°C. Alle Reagenzien vor der Verwendung auf<br />
Raumtemperatur (+18-25°C) bringen. Alle Reagenzien nach der Verwendung<br />
sofort wieder bei +2-8°C aufbewahren. Unbenutzte Streifen/Platten wieder in<br />
den Beutel stecken und den Beutel wieder verschließen. Das Trockenmittel<br />
nicht entnehmen. Die Streifen sollten nach dem Öffnen und<br />
Wiederverschließen des Beutels innerhalb von 5 Wochen verwendet werden.<br />
Nach der Verdünnung kann die Arbeitswaschlösung 14 Tage lang bei +2-8°C<br />
aufbewahrt werden. Alle anderen Reagenzien sind nach dem Öffnen bis zum<br />
Verfallsdatum haltbar. Die mitgelieferten Reagenzien reichen für 96 Bestimmungen<br />
in maximal 6 Messreihen aus.<br />
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