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PLATELIAâ„¢ CANDIDA Ag - Bio-Rad

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• der Beschichtung der Vertiefungen der Mikrotiterplatte und die Bindung des<br />

Mannan-Antigens,<br />

• dem Nachweis des an die sensibilisierte Mikrotiterplatte (Konjugatreagenz:<br />

mit Peroxidase markierter monoklonaler Antikörper) gebundenen Antigens.<br />

Die Serumproben werden in Anwesenheit von EDTA hitzebehandelt, um die<br />

Immunkomplexe zu trennen und die Serumproteine, die mit dem Test<br />

interferieren könnten, auszufällen.<br />

Die hitzebehandelten Serumproben und das Konjugat werden in die mit<br />

monoklonalem Antikörper beschichteten Vertiefungen gegeben und inkubiert.<br />

In Anwesenheit von Mannan-Antigen wird ein monoklonaler Antikörper –<br />

Mannan - monoklonaler Antikörper/Peroxidase-Komplex gebildet. Die<br />

Teststreifen werden gewaschen, um ungebundenes Material zu entfernen.<br />

Anschließend wird die Substratlösung zugesetzt, die mit den an die Vertiefung<br />

gebundenen Komplexen reagiert und eine blaue Reaktionsfarbe erzeugt. Die<br />

Enzymreaktion wird durch Zugabe von Säure gestoppt, so dass die Farbe von<br />

blau in gelb wechselt. Die Extinktion (optische Dichte) der Proben, Kontrollen<br />

und Bereichspunkte wird mit Hilfe eines Spektrophotometers bei einer<br />

Wellenlänge von 450 und 620 nm bestimmt.<br />

Der Test kann gemäß den folgenden zwei Verfahren durchgeführt werden:<br />

• Quantitatives Verfahren: durch Erstellen einer Kalibrierungskurve aus<br />

4 Bereichspunkten: 2,0 ; 1,0 ; 0,5 und 0,25 ng/mL. Die Ergebnisse der<br />

Testproben werden in ng Mannan pro mL Serum ausgedrückt.<br />

• Qualitatives Verfahren: Es werden nur die Bereichspunkte 0,25 ng/mL und<br />

0,5 ng/mL verwendet. Ein Vergleich zwischen der Extinktion der Testproben<br />

und der Extinktion der beiden Bereichspunkte ermöglicht eine Bestimmung<br />

der Ergebnisse als negative, mäßige oder positive Seren.<br />

5- REAGENZIEN<br />

Platelia Candida <strong>Ag</strong>: Produkt Nr. 62798 (96 Tests)<br />

Lagerung des Kits bei +2-8°C. Alle Reagenzien vor der Verwendung auf<br />

Raumtemperatur (+18-25°C) bringen. Alle Reagenzien nach der Verwendung<br />

sofort wieder bei +2-8°C aufbewahren. Unbenutzte Streifen/Platten wieder in<br />

den Beutel stecken und den Beutel wieder verschließen. Das Trockenmittel<br />

nicht entnehmen. Die Streifen sollten nach dem Öffnen und<br />

Wiederverschließen des Beutels innerhalb von 5 Wochen verwendet werden.<br />

Nach der Verdünnung kann die Arbeitswaschlösung 14 Tage lang bei +2-8°C<br />

aufbewahrt werden. Alle anderen Reagenzien sind nach dem Öffnen bis zum<br />

Verfallsdatum haltbar. Die mitgelieferten Reagenzien reichen für 96 Bestimmungen<br />

in maximal 6 Messreihen aus.<br />

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