Biochemie Praktikum I
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<strong>Praktikum</strong>sskript <strong>Biochemie</strong> für Biologen-Bachelor SS2012<br />
Michaelis-Menten-Kinetik<br />
Extinktionskoeffizient: 3.3 l/(mmol⋅cm)= 3.3 ml/(µmol⋅cm) <br />
Schichtdicke d= 1 cm <br />
A V = <br />
∆E <br />
⋅ <br />
∆t <br />
V T ⋅ n <br />
ε ⋅ d ⋅ V P <br />
Achtung: Hier keine Verdünnung des Enzyms einberechnen, da für diesen Versuch die <br />
Aktivität in der Küvette relevant ist! <br />
Graphische Ermittlung von v max und K M : <br />
1. v in U/ml gegen Substratkonzentration C S in µmol/l auftragen <br />
2. Auftragung nach Lineweaver-‐Burk: d.h. 1/v gegen 1/C S <br />
K M = _________ <br />
v max = ___________ <br />
3. Ermittlung der katalytischen Konstante <br />
v max in Küvette (in U/ml=µmol/ml*min) <br />
K 2 = K cat = __________________________________________ <br />
Enzymkonzentration in Testküvette (µmol/ml) <br />
Molekulargewicht der LDH = 130 000 g / mol <br />
K cat<br />
= _________ <br />
Achtung: Überlegt Euch, ob sich alle Werte auf das gleiche Volumen beziehen! <br />
Die Auswertung findet im <strong>Praktikum</strong> statt. Die Michaelis-‐Menten -‐ und Lineweaver-‐Burk –<br />
Diagramme werden den Assistenten vorgelegt. <br />
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