Biosynthese von 4-Hydroxy-2 5-dimethyl-3 - Bina
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Inhaltsverzeichnis V<br />
3.7.5 Variation der Substrate ................................................................................. 110<br />
3.8 AUFREINIGUNG DER HDMF-BILDENDEN ENZYMATISCHEN AKTIVITÄT.............. 111<br />
3.8.1 Trennung anhand des Molekulargewichtes................................................... 111<br />
3.8.1.1 Ultrafiltration......................................................................................... 111<br />
3.8.1.2 Gelpermeationschromatographie........................................................... 113<br />
3.8.2 Trennung durch Ionenaustauschchromatographie ....................................... 114<br />
3.8.3 SDS-PAGE..................................................................................................... 114<br />
3.9 SEQUENZIERUNG DES AUFGEREINIGTEN PROTEINS............................................. 116<br />
3.10 DISKUSSION........................................................................................................ 119<br />
D MATERIAL UND METHODEN........................................................................... 125<br />
1 MATERIAL ............................................................................................................. 125<br />
1.1 CHEMIKALIEN..................................................................................................... 125<br />
1.2 ENZYME ............................................................................................................. 125<br />
1.3 PFLANZENMATERIAL .......................................................................................... 125<br />
1.4 FÜLLMATERIALIEN FÜR DIE SÄULENCHROMATOGRAPHIE................................... 125<br />
1.5 MEMBRANFILTRATION ....................................................................................... 126<br />
1.6 FESTPHASENEXTRAKTION................................................................................... 126<br />
1.7 DIALYSE ............................................................................................................. 126<br />
1.8 ULTRAFILTRATION ............................................................................................. 126<br />
1.9 PUFFERHERSTELLUNG ........................................................................................ 126<br />
2 GERÄTE .................................................................................................................. 127<br />
2.1 SCHÜTTELINKUBATOR........................................................................................ 127<br />
2.2 UV-VIS-SPEKTRALPHOTOMETER ...................................................................... 127<br />
2.3 FLÜSSIGCHROMATOGRAPHIE.............................................................................. 127<br />
2.3.1 Ionenaustauschchromatographie .................................................................. 127<br />
2.3.2 Gelpermeationschromatographie.................................................................. 128<br />
2.4 HOCHLEISTUNGSFLÜSSIGCHROMATOGRAPHIE (HPLC)...................................... 129<br />
2.5 HOCHLEISTUNGSFLÜSSIGCHROMATOGRAPHIE-TANDEMMASSEN-<br />
SPEKTROMETRIE (HPLC-MS/MS)...................................................................... 132<br />
2.6 KAPILLARGASCHROMATOGRAPHIE – MASSENSPEKTROMETRIE (HRGC-MS) .... 133