auf der Oberfläche basophiler Granulozyten nach In-vitro

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5 Zusammenfassung Ergebnisse: Mit Hilfe des modifizierten In-vitro-Allergietest ließ sich für 37/41 Patienten die Diagnose der Standardverfahren bestätigen. Unter den Wespengiftallergikern fanden sich 4 Nonresponder, deren Basophile nach Stimulation mit Allergen/ Anti-IgE-Antikörper nicht in der Lage waren, CD203c hochzuregulieren. Durch Verwendung definierter Allergenmoleküle war es möglich, für jeden untersuchten Patienten das individuelle Muster der Sensibilisierung auf einzelne Giftbestandteile zu bestimmen. 28 der 36 untersuchten Patienten mit einer Wespengiftallergie zeigten eine Hochregulierung von CD203c auf Ves v5, 26 dieser Patienten reagierten mit Ves v2, 23 mit Ves v1. Unter den 14 Patienten mit Bienengiftallergie traten 9 positive Reaktionen auf Api m1 und 14 auf Api m2 auf. Keiner dieser Patienten reagierte auf Api m4. Für 3 Bienengiftallergiker und 3 Wespengiftallergiker zeigten sich kreuzreagierende IgE-Antikörper gegen die homologen Hyaluronidasen beider Insektengifte, die unter Einsatz der Insektengiftextrakte verborgen geblieben waren. Kreuzreaktionen traten auch bei einigen wespengiftallergischen Patienten für die Phospholipasen und Hyaluronidasen der Wespe und der Papierwespe auf. Eine mit Hilfe der Standarddiagnostik gestellte Wespengiftallergie konnte bei zwei Nonrespondern im In-vitro- Test nachvollzogen werden, nachdem ihre Basophilen zuvor mit Interleukin-3 behandelt worden waren. Sie hatten vor Inkubation mit IL-3 keine durch Wespengift induzierbare Hochregulation der CD203c-Expression gezeigt. Diskussion: Die durchflusszytometrische Bestimmung der Allergen-induzierten Hochregulierung der CD203c-Expression auf basophilen Granulozyten stellt einen einfachen, schnellen und wenig invasiven In-vitro-Allergietest dar. Mit Hilfe definierter Allergenmoleküle ist es möglich, für jeden untersuchten Patienten das individuelle Sensibilisierungmuster gegen einzelne Giftbestandteile zu ermitteln. Für Nonresponder-Individuen scheint die vorherige Kultivierung der Basophilen in IL-3-haltigem Medium eine Möglichkeit darzustellen, die spezifische Hochregulierbarkeit von CD203c wiederherzustellen. Mit Hilfe dieses Verfahrens können auch Nonresponder-Patienten dem CD203c-Test zugänglich gemacht werden. 76
6 Anhang 6.1 Verzeichnis der verwendeten Abkürzungen und Einheiten Ak Antikörper Api m1 Phosphlipase A2 des Bienengiftes Api m2 Hyaluronidase des Bienengiftes Api m4 Melittin BSA Bovine Serum Albumin CD Cluster of Differentiation EDTA Ethylene Diamine Tetraacetic Acid E-NPP3 Ectonucleotid-Pyrophosphatase/ Phosphodiesterase 3 FACS Fluorescence Activated Cell Sorter FITC Fluorescein Isothiocyanate FL1, 2, 3 Fluoreszenz 1, 2, 3 FSC Forward Scatter Ig Immunglobulin kDa Kilodalton kU/l Kilounits/ Liter IL Interleukin LT Leukotrien MFI Mediane Fluoreszenzintensität MoAk Monoklonaler Antikörper MW Mittelwert PBS Phosphate Buffered Saline PE Phycoerythrin Pol a1 Phospholipase A1 des Papierwespengiftes Pol a2 Hyaluronidase des Papierwespengiftes RAST Radio-Allergo-Sorbent-Test SD Standardabweichung 77
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Aus der Medizinischen Universitäts
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Für meine Eltern
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2.3.7 Kultivierung der Nonresponder
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1 Einleitung 1.1 Die Insektengiftal
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3 1.1 Die Insektengiftallergie Die
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5 1.2 Diagnostik der Insektengiftal
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1.3 Zusammensetzung des Bienen- und
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9 1.4 Zielsetzungen der Studie Wesp
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2 Patienten, Material und Methoden
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13 2.2 Standardverfahren der Allerg
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2.3 In-vitro-Untersuchungen zur CD2
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23 2.4 Statistische Methoden Gewebe
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Seite 88 und 89: 6 Anhang SI Stimulationsindex SSC S
Seite 90 und 91: 7 Literatur 12. Bühring HJ, Simmon
Seite 92 und 93: 7 Literatur 37. Golden DBK, Addison
Seite 94 und 95: 7 Literatur 62. Karpas AB, Baer H,
Seite 96 und 97: 7 Literatur clonal murine IgG antib
Seite 98 und 99: 7 Literatur 110. Przybilla B, Rueff
Seite 100 und 101: 7 Literatur 133. Valenta R, Vrtala
Seite 103: Danksagung Mein herzlichster Dank g
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