Grundstudium Biologie Grundkurs V

III. KURS: AUSWERTUNG DER ANREICHERUNGSKULTUREN,
REINKULTUREN, ANAEROBENTECHNIK, STERILES ARBEITEN,
MIKROSKOPISCHE UNTERSUCHUNG VON BAKTERIEN
Es sollen die makroskopisch und mikroskopisch erfassbaren Merkmale der angereicherten Mikroorganismen
beschrieben und Reinkulturen angelegt werden.
1. Luftkeimplatten
Vers. III.1
Material: Luftkeimplatten von Vers. I.3, Mikroskop, Objektträger, Deckgläser, Immersionsöl,
Linsenpapier, Impföse
Auswertung: Zunächst erfolgt eine makroskopische Begutachtung der Platten hinsichtlich Form
und Farbe der Kolonien.
Mikroskopische Untersuchung:
Von einer einzelnen Kolonie wird mit der Impföse etwas Material entnommen und in einem Tropfen
Wasser auf einem Objektträger verrieben. Bedecken Sie die Probe mit dem Deckgläschen.
Objektträger und Deckgläschen nur an den Rändern anfassen!
Der Objektträger wird in den Kreuztisch des Mikroskopes so eingespannt, dass sich die Probe im
Strahlengang befindet. Am Objektivrevolver wird das 10er Objektiv (10/0,25) eingestellt. Nun
wird das Mikroskop für das Phasenkontrastverfahren justiert (siehe Anhang ).
Nach Justierung des Mikroskopes erfolgt die Betrachtung der Zellen bei höherer Auflösung im
Phasenkontrast mit dem 100er Phasenkontrast-Objektiv (100/1,25 Oil, Ph 3 ). Dazu senken Sie
zunächst den Objekttisch durch Drehung (gegen den Uhrzeigersinn!) des Grobtriebes ca. 1 cm
nach unten. Jetzt können Sie den unteren, beweglichen Teil des 100er Objektives nach oben in die
Schutzstellung schieben und ihn durch eine Drehung gegen den Uhrzeigersinn in dieser Position
arretieren. Geben Sie einen Tropfen Immersionsöl auf das Deckglas unterhalb des Objektives, lösen
Sie nun die Arretierung des Objektives, und bewegen Sie den Objekttisch mit dem Grobtrieb
langsam (unter Beobachtung von der Seite her ) nach oben bis das Objektiv in das Immersionsöl
eintaucht. Bewegen Sie von nun an den Objekttisch unter mikroskopischer Kontrolle mit dem
Feintrieb langsam nach oben bis die Zellen im Bild erscheinen. Nach dem Auflegen eines Deckglases
wird dieses Präparat mit dem Mikroskop (100er Phasenkontrast-Objektiv 100/Oil Ph 3) betrachtet.
Gelbliche Kolonien könnten aus Zellpaketen von Micrococcus luteus bestehen. Micrococcus
luteus bildet Tetraden und ist Katalase positiv.
2. Aerobe Sporenbildner ( Bacillus-Arten )
Vers. III.2
Material: Agarplatte von Vers. I.5 mit Anreicherungskultur von Bacillus spec; Mikroskop, Ob-
jektträger, Deckgläser, Immersionsöl, Linsenpapier
Auswertung:
Bakterien mikroskopisch untersuchen. Sporen erscheinen als stark lichtbrechende, helle Gebilde
in der dunklen Sporenmutterzelle (endständig oder mittelständig, ovoid bis kugelig) oder als
dunkle Vorspore in der helleren Mutterzelle.
3. Anoxygene phototrophe Purpurbakterien
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