34 Seiten als pdf - MedRSD - Heinrich-Heine-Universität Düsseldorf

Doktorandenkongress der Medical Research School Düsseldorf 2011
uns in diesem Zusammenhang die Enzymaktivität
des 20S Proteasoms näher verstehen und beschreiben
zu können. Literatur: [1] Jung T, Catalgol B, Grunde
T. The proteasomal system. Molecular Aspects of
Medicine 2009;30:191-296, [2] Wada M, Kosaka
M, Saito S, Sano T, Tanaka K, Ichihara A. Serum
concentration und localization in tumor cells of
proteasoms in patients with hematolgic malignancy
and their pathophysiologic signifi cance. J Lab
Clin Med 1993; 121:215.223, [3] Sixt S, Peters J.
Extracellulr Alveolar Proteasome – Possible Role in
Lung Injury und Repair. Proc Am Thorac Soc 2010;
7:91-96
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5.7 Thromboxan B2, sCD40L und
Thrombopoetin als Marker für die Qualität
von Thrombozytapheresekonzentraten
Anja Bärtl (1), Folker Wenzel (2), Thomas Hohlfeld
(3), Günther Giers (1)
(1) Institut für Hämostaseologie und Transfusionsmedizin, (2)
Institut für Transplantationsdiagnostik und Zelltherapeutika,
(3) Institut für Pharmakologie und Klinische Pharmakologie
Hintergrund: Während der Herstellung und
Lagerung von Thrombozytenkonzentraten treten
Beeinträchtigungen der Thrombozyten auf. Diese
Veränderungen werden unter dem Begriff platelet
storage lesion zusammengefasst. Ziel der Arbeit
war es, Einbußen der Plättchenaktivität anhand
neuer, objektiver Methoden zu charakterisieren.
Die exozytotisch-proteolytische Freisetzung von
löslichem CD40-Ligand (sCD40L), die Bildung von
Thromboxan B2 (TXB2) aus Membranphospholipiden
und die Internalisierung von Thrombopoetin
(TPO) stellen drei unterschiedliche Aspekte des
Thrombozytenstoff wechsels dar. Sie wurden in dieser
Arbeit herangezogen, um die Qualität von Plättchen in
Thrombozytapheresekonzentraten zu untersuchen.
Methoden: Proben von Thrombozytapheresepräparaten
wurden unter Routinebedingungen
gelagert. Die sCD40L- und Thromboxan-Freisetzung
und die Thrombopoetinelimination wurden am Tag
1, 3 und 5 der Lagerung bestimmt. sCD40L und
Thromboxan wurden vor und nach Zugabe von
Calciumlösung zu Proben aus dem Präparat und
Bildung eines Thrombus gemessen. Thrombopoetin
wurde vor und nach 5-stündiger Inkubation der
Probe mit auf 600 pg/ml aufgesättigter TPO-Lösung
bestimmt. sCD40L und TPO wurden mittels ELISA
(R&D Systems), TXB2 mittels Radioimmunoassay
quantifi ziert. Die Thrombozytenzahlen wurden mit
dem Zellzähler Sysmex K-4500 bestimmt. Ergebnisse:
Unmittelbar nach der Herstellung betrug die sCD40L-
Freisetzung 20,5 ± 3,8 ag, die Bildung von TXB2
1145 ± 155 ag und die TPO-Elimination 0,61 ± 0,17
ag pro Plättchen. Am Tag 1, 3 und 5 der Lagerung
war die Freisetzung von sCD40L auf 89%, 71% und
56%, die TXB2-Sekretion auf 91%, 74% und 58%
und die TPO-Clearance auf 95%, 84% und 79% des
im frischen Präparat dokumentierten Wertes gefallen.
Fazit: Die sCD40L-Freisetzung, TXB2-Bildung und
TPO-Clearance in Thrombozytapheresekonzentraten
sind abhängig von der Lagerungsdauer. Während
fünftägiger Lagerung nimmt die Aktivität der
Plättchen bezüglich der drei untersuchten
Substanzen auf ca. 60-80% des Ausgangswertes
ab. Diese Beobachtung bestätigt Literaturdaten,
die nach 5 Tagen Lagerung einen Verlust der
Plättchenfunktionalität um ca. 30% anzeigen.