Maria Kammerer - Universitätsklinikum Carl Gustav Carus

3.3.2. Quantitative Auswertung
Neben der qualitativen Auswertung untersuchten wir quantitative Unterschiede zwischen taut
+/+ und taut -/- Mäusen, vor allem Unterschiede in der Bulbusgröße, Anzahl der Mitralzellen
und der Glomeruli sowie deren Verhältnis zueinander. Darüber hinaus bestimmten wir die
Durchschnittsfläche für eine Mitralzelle und einen Glomerulus.
Die mikroskopische Auswertung und die Zählungen wurden am Olympus BX 60 F5
Mikroskop (Tokio, Japan) mit Plan-Apo-Objektiven mit Vergrößerungen von 20-fach bis 40-
fach durchgeführt und mit einer CCD - Kamera (F-View soft imaging System) fotografiert. Die
Auswertung wurde durch das Analysesystem ANALYSIS 3.1. (Olympus) unterstützt. Wir
untersuchten zehn männliche Knockouttyp- und zehn männliche Wildtypmäuse, von denen
je drei 21 Tage, drei 42 Tage, drei 70 Tage und eine 60 (taut-/-) bzw. 80 Tage (taut +/+) alt
waren.
Um Ungenauigkeiten beim Zählen und Messen zu vermeiden, haben wir nur gerade und
gleich dicke Schnitte ausgewertet.
3.3.2.1. Einteilung des Bulbus olfactorius
Es wurde jeweils ein Bulbus pro Maus ausgewertet. Entscheidende Kriterien, ob der rechte
oder der linke OB ausgemessen und ausgezählt wurde, waren die Qualität der Schnitte und
der Färbung, sowie die Vollständigkeit des OB.
Ausgewertet wurden die OT, die immunhistochemisch mit PGP 9.5 gefärbt wurden (10 bis 12
OT pro Tier). Zur Beurteilung eventueller lokaler Differenzen haben wir den OB in
verschiedene Bereiche eingeteilt. Wir analysierten jeweils einen medialen und einen
lateralen Teil auf je 400 µm Länge in anterio-posteriorer Richtung. Außerdem teilten wir den
OB in einen caudalen, centralen und rostralen Anteil ein (Abb. 10). Zur Orientierung nutzten
wir die Objektträgeranzahl und markante Stellen wie Frontalhirn oder Riechschleimhaut.
Somit wurden bei jedem OB sechs separate Bereiche (caudal medial, central medial, rostral
medial, caudal lateral, central lateral und rostral lateral) ausgewertet und die
Durchschnittswerte für jeden Bereich, lateral, medial und für den gesamten OB bestimmt
(Abb. 11).
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